Module 1. Concepts de base Flashcards
Quelle est la définition de l’histologie?
Science qui étudie la structure microscopique des tissus et des organes (anatomie microscopique)
SLIDE 3
Quelle est la différence entre l’histologie et la physiologie?
Histologie = étude de la structure / forme
Physiologie = étude de la fonction
SLIDE 3
Que permet l’histologie?
Discipline visuelle qui permet de reconnaître et identifier les structures normales et donc, de reconnaître lorsqu’elles sont anormales (histopathologie) + Comprendre la forme des structures (relation avec leurs fonctions)
SLIDE 3
Quelle est l’unité structurelle et fonctionnelle de base du vivant?
La cellule
SLIDE 4
Quelle est la différence entre les cellules eucaryotes et procaryotes?
Eucaryotes = noyau + organites
Procaryotes = pas de noyau + peu d’organites
SLIDE 4
Que représentent les cellules somatiques animales?
Toutes les cellules formant un organisme, à l’exception des cellules germinales (sexuelles)
SLIDE 4
Est-ce que toutes les cellules somatiques animale sont composées du même génome?
Oui
SLIDE 4
Quelles sont les 2 fonctions des cellules somatiques animales?
- Différenciation en une grande diversité structurelle / fonctionnelle selon l’expression d’une partie du génome
- Interaction des cellules entres elles et avec le milieu extracellulaire
SLIDE 4
Quelle est la définition d’un tissu?
Regroupement de cellules avec la même fonction + Matrice extracellulaire
SLIDE 5
Quelles sont les 4 tissus de base?
- Tissu épithélial
- Tissu conjonctif (de soutien)
- Tissu musculaire
- Tissu nerveux
SLIDE 5
Que composent le tissu épithélial?
Cellules polarisées (deux domaines - apicale et basale), liées les unes aux autres
SLIDE 6
Quelle est la disposition des cellules du tissu épithélial?
Sépare le milieu intérieur de l’organisme du milieu extérieur
SLIDE 6
Quels sont les 3 emplacements ou se retrouve le tissu épithélial?
- Surface externe (peau)
- Tapisse cavités internes (ex. digestif)
- Glandes (ex. endocrines, exocrines)
SLIDE 6
Quelles sont les 3 fonctions du tissu épithélial?
- Protection mécanique
- Absorption
- Sécrétion
SLIDE 6
Quelle est la disposition des cellules du tissu conjonctif?
Relie les autres tissus
SLIDE 7
Que composent le tissu conjonctif?
Nombre limité de cellules + Matrice extracellulaire abondante
SLIDE 7
Quelles sont les 3 distributions du tissu conjonctif?
- Tissu de soutien embryonnaire
- Tissu de soutien proprement dit
- Tissu de soutien spécialié (adipeux, cartilage, os, hématopoïétique)
SLIDE 7
Quelles sont les 4 fonctions du tissu conjonctif?
- Ancrage
- Échanges (nutriments / déchets)
- Protection / Défense
- Stockage
SLIDE 7
Que composent le tissu musculaire?
Protéines contractiles = Actine + Myosine
SLIDE 8
Quelle est la fonction du tissu musculaire?
Capacité de contraction pour créer des mouvements
SlIDE 8
Quels sont les 3 types de tissu musculaire?
- Squelettique
- Lisse
- Cardiaque
SLIDE 8
Quelle est la fonction du tissu nerveux?
Intégration et transfert de l’information par des signaux internes et externes
SLIDE 9
Quels sont les 2 types de cellules principales du tissu nerveux?
- Neurones (gestion d’information)
- Cellules gliales (support + protection)
SLIDE 9
Quelle est la définition d’un organe?
Au moins deux tissus de base (souvent les quatres)
SLIDE 10
Quelle est la définition d’un système?
Organes liés fonctionnellement et parfois anatomiquement (en continuité physique)
SLIDE 10
Qu’est-ce qui permet le fonctionnement normal de l’animal?
Ensemble des systèmes
SLIDE 10
Quels sont les 3 objectifs lors de la préparation d’échantillons en histologie?
- Révéler les structures microscopiques
- Conserver les caractéristiques initiales
- Limiter les artéfacts
SLIDE 11
Quels sont les 3 étapes lors de la préparation d’échantillons en histologie?
- Fixation
- Inclusion et enrobage
- Coupe, montage, coloration
SLIDE 11
Que se passe-t-il lors de l’étape de la fixation des échantillons?
Préserver la structure du tissu en ajoutant du formaldéhyde qui
- Inhibe l’activité enzymatique (arrêt du métabolisme cellulaire)
- Prévient la dégradation cellulaire
- Durcis le tissu cellulaire
SLIDE 12
Que se passe-t-il lors de l’étape de l’inclusion et de l’enrobage des échantillons?
Facilisation de la coupe du tissu par la:
- Déshydratation dans l’éthanol
- Parrafine comme support rigide
SLIDE 12
Que se passe-t-il lors de l’étape de la coupe des échantillons?
- Coupe du tissu avec le microtome (3 à 9 um)
- Pose sur une lame de verre
SLIDE 12
Pourquoi colore-t-on les échantillons?
- Coupes de tissu sont transparentes et sans couleurs distinctes
- Densités optiques très similaires entre tissus donc, impossible à différencier
SLIDE 13
Que faut-il faire avec les colorants hydrosolubles des échantillons paraffinés?
Déparaffiner + Réhydrater avant la coloration
SLIDE 13
Que représente le colorant de couleur rose/rouge?
Typiquement l’éosine
- Colorant acide
- Basophile = attire les structures basiques
SLIDE 13
Quelles structures sont normallement colorés par l’éosine?
Majorité des composantes du cytoplasme et des protéines de la matrice extracellulaire :
- Filaments intracytoplasmiques
- Organites intracellulaires
- Fibres extracellulaires
SLIDE 13
Que représente le colorant de couleur violet/bleu?
Typiquement l’hématoxyline:
- Colorant basique
- Acidophile = noyaux, nucléoles et ribosomes
SLIDE 13
Quelles structures sont normallement colorés par l’hématoxyline?
Acides nucléiques :
- Noyaux
- Nucléoles
- Ribosomes
SLIDE 13
Que permet la microscopie?
- Augmentation du pouvoir de résolution
- Capacité à produire des images séparées de deux éléments rapprochés
SLIDE 15
Qu’est-ce qui détermine le pouvoir de résolution d’un microscope?
- Objectifs du microscope
- Longueur d’onde source lumineuse
SLIDE 15
Quelles sont les meilleures méthodes en ordre croissant pour observer des structures microscopiques?
Oeil < Microscopie optique (phototonique) < Microscopie électronique à transmission < Microscopie électronique à balayage
SLIDE 15
Comment est choisi le type de colorant ajouté à l’échantillon de tissu?
En fonction des structures que l’on veut observer
SLIDE 14
Quel est le pouvoir de grossissement de microscope optique?
40X à 1000X
SLIDE 16
Quelles sont les 2 différences entre la microscopie optique et la microscopie électronique?
- Faisceau d’électrons VS photons = augmentation de résolution
- Coupes ultraminces (50-100 nm) VS Coupes minces (3 à 9 um)
SLIDE 17
Quels sont les caractéristiques des résultats obtenus par la microscopie électronique à transmission (MET)?
- Agrandissement de 100 000X
- Image bidimensionnelle
- Révélation d’ultrastructure (structure subcellulaires)
SLIDE 17
Quelles sont les 2 différences entre la microscopie électronique à transmission (MET) et la microscopie électronique à balayage (MEB)?
- Électrons traversent l’échantillon VS Électrons balaient la surface de l’échantillon
- Coupes ultraminces (50-100 nm) VS Aucune coupe nécessaire
SLIDE 18
Quels sont les caractéristiques des résultats obtenus par la microscopie électronique à balayage (MEB)?
- Image tridimensionnelle
- Révélation surface des cellules / tissus
SLIDE 18
Que permet l’immunohistochimie?
Détection d’une protéine spécifique dans un échantillon histologique
SLIDE 19
Quelle est la méthode pour pratiquer l’immunohistochimie?
- Génération d’anticorps dirigé contre la protéine d’intérêt (monoclonaux ou polyclonaux)
- Incubation du tissu avec la solution d’anticorps conjugé à un colorant fluorescent ou un enzyme
- Rinçage de l’échantillon
- Microscopie optique
SLIDE 19
Quelle est la technique directe pour générer des anticorps en immunohistochimie?
- Anticorps primaire + colorant fluorescent
- Chaque anticorps primaire est lié au colorant
SLIDE 20
Quelle est la technique indirecte pour générer des anticorps en immunohistochimie?
- Anticorps primaire
- Anticorps secondaire + anticorps primaire + colorant fluorescent
- Chaque anticorps secondaire est lié au colorant / Chaque anticorps primaire est lié à deux anticorps secondaires ou plus
SLIDE 21
Quels sont les avantages de la technique indirecte en immunohistochimie?
- Amplification du signal, technique plus sensible = plus de colorants sur une même protéine d’intérêt
- Anticorps secondaires contre plusieurs diffrents anticorps primaires (et autant de protéines) = reconnaissance de tous les protéines d’intérêts ciblées par les anticorps primaires
SLIDE 21
Quels sont les désavantages de l’inclusion et l’enrobage à la paraffine dans la préparation des échantillons pour la microscopie optique?
- Altération de certaines composantes
- Interférence avec l’immunofluorescence
SLIDE 22
Quelle méthode peut remplacer l’étape de l’inclusion et l’enrobage à la paraffine, et ainsi éviter les désavantages associés?
Coupe congelée
SLIDE 22
Quelle est la méthode pour préparer des échantillons de tissus congelés pour la microscopie optique?
- Milieu d’enrobage visqueux (optimal cutting temperature compound)
- Congélation rapide (azote liquide)
- Cryomicrotome (-20°C / -30°C)
- Coloration et / ou immunofluorescence
SLIDE 22
Quelle est l’avantage et le désavantage de la méthode de la coupe congelée pour la microscopie optique?
- Avantage : rapide (> 10 min.)
- Désavantage : qualité moindre d’image
SLIDE 22
