MO Et Technique Marquage Caire Ou Tossulaire Flashcards
L’avantage du MO et qu’il a une faible résolution
Faux c’est qu’il a une lumière relativement peu destructrice
Son inconvénient est qu’il a une faible résolution
La limite de séparation est la plus grande distance à laquelle deux objets sont encore distingués
Faux la plus PETITE DISTANCE
Microscopie a transmission:
C vivantes et non colorées
C fixées et colorées
Vrai
MF:
Detection reste possible que pour une faible quantité de molécules fluorescentes
Faux, son AVANTAGE: détection reste possible MÊME pour une qtté faible de molécules fluorescentes
> grande sensibilité
Préparation des échantillons:
Très frequente pour les tissus (pas nécessaire dans certains cas) et obligatoire si observation de cellules vivantes, non colorées
Faux: PAS OBLIGATOIRE si observation de C vivantes, non colorées
Préparation des échantillons les 5 étapes ?
Fixation, déshydratation, inclusion, coupe et obtention du contraste
Fixation:
Objectifs sont de tuer les C tous en maintenant en place les constituants et de conserver les préparations
Vrai
Objectifs déshydratation sont de préparer l’étape suivante (coupe) > faciliter la miscibilité avec le matériau d’inclusion et d’éviter les déformations si le vide est nécessaire
Faux, étape suivante INCLUSION et pas coupe
Inclusion: obj sont de préparer étape suivant (coupe) et si T fragiles il faut les inclure dans des structures plus solides pour résister a la coupe
Vrai
Coupe: obs est d’obtenir des tranches suffisamment épaisses
Faux, des tranches suffisamment FINES pour que les faisceaux puissent passer au travers des préparations
Contraste en MO:
Réfringence naturelles des cellules > coupe de tissus ou C isolées
Faux
Soit réfringence naturelle > C vivantes en culture
Soit coloration par des colorants ou des fluorochromes > coupe de T ou C isolées
Coloration :
Hématoxyline > noyaux en bleu
Faux noyau en violet noir
Colrants basiques pour les structures basiques avecr ex le colorant basique hématoxyline
Faux colorants basique > structures ACIDES
Ex de colorants B hématoxyline
Ex mol acides : acides nucléiques du noyau
Colorants acides pour structures basiques ex colorant éosine et ex de mol basiques: ptotéines du cytoplasme
Vrai
Ex de couplage: protéine annexine V avec fluorochrome FITC
Vrai sinon avec iodure de propidium comme fluorochrome
Annexine V est une prot possédant une forte affinité pour la sérine
Faux pour la PHOSPHATIDYLSERINE
Iodure de propinium est une molécule chargée se liant a l’ARN
Faux a l’ADN
Immunocytochimie:
Anticorps est couplé a un fluorochrome
Vrai
Ex: FITC
TRITC
Reconnaissance spécifique de prot dans les C ou les T
Sans perméabilisation préalable, les Ac ne franchissent pas les mb Caires
Vrai
Intérêt de immunocytochimie est identification spécifique de protéines dans les T et les C
Vrai
Agents de contraste permettent id globale de structures et n’ont pas de spécificité moléculaire
Marquage direct:
Sont sensibles et permettent les doubles marquages
Faux ils sont PEU SENSIBLES
Double marquage:
Vinculline marquage vert et actine marquage rouge et si co localisation des 2 prot > marquage jaune
Faux c’est l’inverse vinculline > rouge et actine > vert
MàFluo:
Vert: Ac anti tubuline couplé au FITC (MT)
Vrai et
Bleu: marquage ADN par le DAPI (noyau)
Rouge: marquage actine par la phalloïde liée au TRITC (MF)
Marquage indirect est plus sensible
Vrai car amplification du signal
