Mikroskopie Flashcards
Beispiele Fluoraphore
FITC (fluorescin isothiocyanat) grün,
Rhodamin rot/ornage,
GFP, RFP, YFP
Lösung für out-of-focus blurr
- image deconvolution (mathematische Lösung)
- Confocal mikroskopie (optische Lösung)
STED Mikroskopie
Auflösung 50nm
Bescheinen mit Anregungsfokus und gleichzeitig mit ringförmigem Ausschaltfokus. Es entsteht ein kleinerer scharfer Bereich
FRET
Fluorescence resonance energy transfer
Methode zur Untersuchung von Proteininteraktion
Markierung der Proteinen mit unterschiedlichen Fluoraphoren Emmission des ersten = Absorptionswl des 2. Wenn die Proteinen weniger als 5nm abstand haben wird das 2. Fluoraphor angeregt.
FRAP
Fluorescence recovery after photobleaching
Fluoraphor wird mit Laser gebleached - Die kinetischen Parameter des Proteins können anhand der recover-Zeit bestimmt werden
AFM
Atomic force Mikroskopie: Mikroskopie für Information über Domänen eines Proteins
Elektronenmikroskopie
Auflösung: 0,1nm
Mikroskopie durch beschießen mit Elektronen. Auflösung von Wellenlänge abhängig: Je höher die Geschwindigkeit eine Elektrons desto kleiner ist die Wellelänge
Cryo
in wässriger Lösung
Methode der Elektronenmikroskopie: Schockfrosten der Probe in cryo – Kristalline Auflösung