Microscopia Flashcards
Cos’è l’ingrandimento?
Rapporto tra dimensioni immagine vista all’oculare e dimensioni reali
Cos’è il potere di risoluzione?
Distanza minima alla quale si possono distinguere due punti vicini
Cos’è la risoluzione?
Capacità di vedere distinti i punti che formano un’immagine
Quali relazioni lega la risoluzione è il potere di risoluzione?
Risoluzione = 0,61 x lamda / n senalfa
Lambda = lunghezza d’onda luce incidente
n = indice di rifrazione del mezzo tra obiettivo e vetrino
Cioè la risoluzione diminuisce all’aumentare del potere di risoluzione
Quali sono i poteri di risoluzione dei microscopi?
Occhio: 0,1 mm
Microscopio ottico: 0,2 µm
Microscopio elettronico a scansione: fino a 20 nm
Microscopio elettronico a trasmissione: fino a 0,2 nm
Microscopio a forza atomica: 0,15 picometri
Come aumento il contrasto e che cos’è?
È la differenza di aspetto tra parti adiacenti di un oggetto
Uso coloranti
Basici:
Blu di metilene
Tionina
Blu di toluidina
Fucsina
(Hanno gruppo reattivo catione)
Acidi
Blu di anilina
Orange G
Da cosa è formato il colorante?
CROMOFORO: composto capace di assorbire radiazioni elettromagnetiche visibili da 790 nm 360 nm
AUXOCROMO: gruppo chimico ionizzabili unito covalentemente al cromoforo è responsabile di:
Solubilità in acqua del colorante
La sua ionizzabilità
Capacità di contrarre legami stabili con sostanze tissutali
Anche questo può essere acido (gruppo solfonico o carbossilico idrossilico)
O basico (gruppo manico i metalli)
Che vuol dire fissare?
Operare una morte rapidissima delle cellule con sostanze chimiche che si chiamano fissativi che consentono di preservare la cellula in una condizione simile a quella nello stato vivente
Cosa rimane dopo la fissazione?
- nucleoproteine (proteine associate al DNA)
- strutture del citoscheletro
- strutture giunzionali
- proteine extracellulari (fibre collagene ed elastiche)
- complessi proteici, carboidratici e fosfolipidici
