microscopi parte 1. Flashcards
formula del potere di risoluzione:
la formula è. R=(λ)/2n sen (α)
λ= alla lunghezza di onda
n=indice di rifrazione d’onda tra l’oggetto e l’osservatore
Sen(α)= angolo di apertura di una lenta
quale tipi di microscopi elettronici ci sono?
1.TEM
2.SEM
3.STEM
4.effetto tunello
5.a forza atomica
perché usiamo il microscopio ottico?
per osservare della struttra si utilizza il microscopio ottico
tipi di microscopio ottico?
1.stereomicroscopio
2.luce in campo chiaro
3.in campo scuro
4.polarizzatore
5.invertito
6.fluorescenza
7.con focale a scansione laser
quale sono le tappe di microscopia ottica?
1.fissazione
2.disidratazione
3.diafanizzazione
4.inclusione
5.taglio
6.colorazione
7.allestimento del vetrino
quale metodi di fissazione ci sono?
abbiamo due metodiche principali:
fisica o chimica
la fissazione fisica è quella che usa o il calore o il freddo per preservare le cellule, per il freddo uttiliziamo l’azoto liquido che ha le temperatura di -190 gradi e per il caldo utilliziamo becco bunsen ch esi rescalda il velocemnte il tessuto e evapora l’acqua
la fissazione chimaca: abbiamo anche qua due metodiche
1.imersione: che quando immergiamo un frammento da fissare
2.perfusione: quando si toglie il sangue da un animale e si sistuisce con i liquidi fissativi
quale sono le caratterstiche dei liquidi fessativi?
1.la velocità della penatrazione
2.la qualità di conservazione
più rapida è la velocità meno è la qualità di conservazione
e al contrario è giusto
quale sono le due tipi di fissativi chimici?
i fessativi chimici agiscono sulle proteine e sono di due categorie:
1.fessativi coagulanti: che agiscono al livello cellulare sull’idratazione delle proteine, quindi il fissativo si sostituisce l’acqua do odratazione delle proteine che denaturano e precipitano
2. fissativi additivi: reagiscono com i componenti tissutali, perciò le molecole del fissatico reagiscono con i componenti del tessuto con consumo del fissativo
i
*i fissativi coagulanti sono fissativi alcolici come l’alcol atelico a 95%
** i fissativo additivo per eccellenza è la formaldiede (HCOH) che è una sostanza a 40% ma la formalina è a 10% e la formalina non brucia il preparato, la formalina ha la velocità di penetrazione di 0,8mm/h e la fissazione dura 12h a 4/5 giorni.
cosa usiamo per lo studio istochimico
usiamo la paraformaldeide che è formaldeide diluita a 4% perché altremente il preparato si brucirebbe
cosa dobbiamo fare dopo aver fissato il preparato
si passa al lavaggio in tampone fosfato che ha il pH di 7,3-7,4 e dopo si passa alla disidratazione
quale le tappe di disidratazione al microscopio ottico?
dobbiamo utilizzare l’alcool etilico
prima dobbiamo usare l’acool a 50% e aqua distilata
dopo 70% con l’acqua distilata
dopo 80% con l’acqua distilata
dopo 96% con l’acqua distilata
e l’ultima tappa è di 100% alcool etilico
che cosa è la diafanizzazione?
la parola diafanizzazione significa vedere attraverso allora qua il preparato diventa trasperente
per la diafanizzaione cosa dobbiamo usare?
bisogna immergere il campio in liquido incolore: lo xilolo o xelene
perché usiamo lo xilolo?
perché permette eseguire il passaggio successivo cioè l’inclusione perché si effetua con una sostanza non affine all’alcool atilico: la paraffina e lo xililo è affine sia all’alcool sia alla paraffina e consente di eseguire l’inclusione
quale l’effetto dello xilolo?
è di rendere il preparato trasperente
