Micropropagation

Question 1

totipotence

Answer 1

capacité théorique des cellules végétales à pouvoir reproduire un plant complet par elle même lorsque mise dans des conditions optimales

Question 2

totipotence (explication)

Answer 2

• chaque cellules contient tous les gènes

- gènes exprimés dans une cellule (contrôle de l’environnement, par les hormones végétales)

Question 3

micropropagation

Answer 3

technique de multiplication à partir d’un fragment de végétal placé dans un milieu nutritif en conditions aseptiques

Question 4

explant

Answer 4

• petite portion d’une plante

- explant d’organe (tiges, racines, feuille) ou de tissus (parenchymes, etc.)

Question 5

utilisation

Answer 5

• centres de recherches universitaires et gouvernementaux
• sauvetage d’sp. en voie de disparition
• conservation banque de tissus (ds espace restreint)
• propagation asexuée commerciale de plantes
• application des techniques in vitro à la germination de semences

Question 6

avantages

Answer 6

• moins espace, de chauffage et de contrôle humidité que méthodes conventionnelles
• flexibilité de la saison de reproduction
• prod de plantes exemptes d’org pathogènes
• X rapide de cultivars dont on ne possède que quelques individus

Question 7

désavantages

Answer 7

infrastructure et équipement nbr et coûteux

personnel qualifié, bonnes connaissances techniques

moyenne de 5 ans av. d’ê rentable

souvent une instabilité génétique (car clones, donc même bagage génétique, accumulation de mutations)

Question 8

stade 0

Answer 8

le choix et le conditionnement du plant mère

Question 9

stade 0 description

Answer 9

le plant mère doit respecter conditions suivantes :

• pas carence minérale
• pas en stress hydrique
• aucun parasite/pathogène
• en pleine croissance (déjà mode /)

Question 10

stade 1

Answer 10

la mise en culture

Question 11

stade 1.1

Answer 11

le choix du fragment

Question 12

description stade 1.1

Answer 12

explant de tige, de feuille ou de racine ?
dépend de l’espèce
souvent basé sur mode de reproduction asexué naturel

Question 13

stade 1.2

Answer 13

l’aseptisation

Question 14

stade 1.2 description

Answer 14

souvent mettre fragment dans eau de javel durant quelque sec ou quelque minutes et plusieurs rinçage en eau stérile pour tuer les pathogènes de surface (la plus difficile car chance de brûler les cellule)

Question 15

stade 1.2 à savoir

Answer 15

• % infection des tissus en surface très ∆
• partie aérienne moins de pathogènes que souterraine
• plante de serre sont plus propres que plantes naturelle
• jeunes pousse = plus propres que le plus âgées
• plus l’explant est petit, moins il a de chance d’être contaminé mais moins il a de chance de reprise
• la plus petite concentration permet d’assurer asepsie est meilleure puisqu’elle permet de ne pas brûler les explants

Question 16

aseptisant le + utilisé :

Answer 16

• eau javel (0,5%)
• l’alcool, éthanol (70%)
• antioxydant (mélange acide abscorbique + acide citrique)

Question 17

stade 1.3

Answer 17

le choix contenant

Question 18

stade 1.3 caractère obligatoire

Answer 18

• résister autoclave
• laisse la lumière passer
• hermétique pour garder asepsie
• ajuster à la taille et au nombre d’explants

Question 19

stade 1.3 caractère souhaitables

Answer 19

• se nettoyer et manipuler facilement
• être réutilisable
• être peu coûteux

Question 20

1.4

Answer 20

contrôle des phénol

Question 21

stade 1.4 description

Answer 21

• phénol = substance produite naturellement suite à blessure qui a comme rôle d’aseptiser et est un inhibiteur de croissance (donc neutraliser)

Question 22

contrôler phénol :

Answer 22

• charbon activé
• jus de citron
• période de noirceur

Question 23

1.5

Answer 23

le milieux de culture

Question 24

le milieux de culture

Answer 24

sels minéraux en [ ]représentatif du milieux
vitamines pour favoriser croissance
phytohormones : auxines, cytokinins ou gibbéréline
sucres ; pas bcp de photosynthèse = 30g/l
la glose : agar semi-solide ou solide (6-10 g de poudre/L)
acides aminés ( pour augmenter l’organogenèse)
extrait de levure (augmente la vitamine B)
lait de coco (cytokinins)
antibiotique = surtout contre bactéries endogènes

Question 25

1.6

Answer 25

stérilisation du milieu de culture

Question 26

1.6 description

Answer 26

tous instrument utilisés doivent être stérilisés à autoclave
alternatives (autocuiseur de cuiseur, micro-onde, eau bouillante)

manipulation sous al hotte à flux laminaire ou avec brûleur, gants

Question 27

1.7

Answer 27

condition de culture
T entre 20-28 selon sp
éclairage fluorescent selon besoin

Question 28

1.8

Answer 28

repiquage –> plus de nutriments et pas de racines

Question 29

stade 2

Answer 29

multiplication des tiges

• même milieu nutritif mais souvent changement hormonal (auxine/cytokinine)
• concentration cytokinins est augmenté pour stimuler croissance des tiges

croissance même vitesse que milieux naturel

lors repiquage des plantules dans des contenants plus gros

augmente nbr dans ch. contenants (4-5 ligneux, 4-12 herbacées)

• 4-5 SEmAiNE

Question 30

stade 3

Answer 30

enracinement

• apparition racines et ajustement balancement hormonal (auxines)
• jeunes tiges et feuilles produit naturellement auxine donc s’enracine souvent par elle-même
• ajustement de lumière et température
• 2 à 4 semaines

Question 31

stade 4

Answer 31

endurcissement

• adapter progressivement les microplantules aux conditions de destination
• étape critique, risque élevée de perte
• après élimination glose, plantule transférés dans substrat horticole
• parties aériennes à 100% H.R (stomates toujours ouvertes et diminution graduelle humidité sur longue période (enlever dôme quelque minutes par jour et arroser souvent(
• attendre nouvelles feuilles et enlever graduellement le recouvrement