mg Flashcards
Τρανσφεράσες της γλουταθειόνης (Glutathione Stransferases, GSTs)
- Mια υπερ-οικογένεια γονιδίων τα οποία
παράγουν ενζυμικά προϊόντα που
συμμετέχουν στη φάση ΙΙ του μεταβολισμού. - Η φάση αυτή χαρακτηρίζεται από τη σύζευξη
ενδογενών υδατοδιαλυτών ενώσεων με
λιπόφιλα υποστρώματα.
ti kanoun oi GSTS?
- Οι GSTs καταλύουν τη σύζευξη της GSH σε λιπόφιλα υποστρώματα
καταλήγοντας σε μόρια με μειωμένη δραστικότητα και μεγαλύτερη ευκολία
απέκκρισης από τον οργανισμό. - Η γλουταθειόνη είναι ένα τριπεπτίδιο αποτελούμενο από γλουταμινικό οξύ,
κυστεΐνη και γλυκίνη.
Πως αξιοποιουν τα καρκινικα κυτταρα τις γλουταθειονες
Τα καρκινικά κύτταρα αξιοποιούν τις GSTs
για να απομακρύνουν αντι-καρκινικά
φάρμακα που δημιουργούν σύμπλοκο με
την GSH (GSH-X), μέσω των Pgp και
MRPs
Η υπεροικογένεια GSTs απαρτίζεται από τρεις οικογένειες:
κυτταροπλασματικές (cGSTs)
✓ μιτοχονδριακές (κGSTs)
✓ μικροσωμικές (membrane-associated proteins in eicosanoid and glutathione
metabolism-MAPEG).
Οι κυτταροπλασματικές περιλαμβάνουν επτά κατηγορίες πρωτεϊνών:
α, μ,
ω, π, σ, θ και ζ.
Στα γονίδια των κυτταροπλασματικών πρωτεϊνών περιλαμβάνονται τα
GSTM1, GSTM2, GSTM3, GSTM4, GSTM5, GSTT1, GSTT2, GSTP1, GSTP2,
GSTA1 και GSTZ1
Είναι πιθανόν άτομα με πολυμορφισμούς στα γονίδια των τρανσφερασών
της γλουταθειόνης να παρουσιάζουν
Είναι πιθανόν άτομα με πολυμορφισμούς στα γονίδια των τρανσφερασών
της γλουταθειόνης να παρουσιάζουν μεγαλύτερη επιδεκτικότητα σε
διάφορες μορφές καρκίνου και άλλες ασθένειες.
* Η συχνότητα πολυμορφισμού στις κυτταροπλασματικές GSTs σχετίζεται με
τη φυλετική προέλευση
Το GSTM1 γονίδιο
Βρίσκεται στο πρώτο χρωμόσωμα, στην θέση 1p13.3.
* 20-50% των ατόμων δεν παράγουν το αντίστοιχο ένζυμο εξαιτίας
ομόζυγου ελλείμματος του γονιδίου (μηδενικός γονότυπος, null). To
μηδενικό αλληλόμορφο συμβολίζεται GSTM1*0.
* Το ποσοστό των ατόμων που δεν παράγουν το ένζυμο είναι
υψηλότερο στην Καυκάσια και Ασιατική φυλή συγκριτικά με την
Αφρικανική.
Αρκεί ο μηδενικός γονότυπος για ένα GST γονίδιο για την εμφάνιση
μιας ασθένειας;
οχι για να εμφανιστει μια ασθενεια παιζουν πολλοι παραγοντες ρολο οπως ο τροπος ζωης….τΑ GST γονιδια εμφανιζουν πολλους πολυμορφισμους σε διαφορα χρωμοσωματα
Το GSTT1 γονίδιο
Eδράζεται στο χρωμόσωμα 22, στην θέση 22q11.23
* 20-60% των ατόμων δεν παράγουν το αντίστοιχο ενζυμικό προϊόν
λόγω ομόζυγου γονιδιακού ελλείμματος (μηδενικός γoνότυπος, null).
Το μηδενικό αλληλόμορφο συμβολίζεται GSTT1*0.
* Περίπου 60% των Ασιατών, 40% των Αφρικανών και 20% των
Καυκάσιων δεν παράγουν το ένζυμο και είναι μηδενικού γoνοτύπου.
περιεγραψε την pcr
Σχεδιάζονται δύο εκκινητές
(συνήθως ολιγονουκλεοτίδια με
μήκος 18-25 βάσεις), οι οποίοι
είναι συμπληρωματικοί με τα
άκρα της περιοχής του DNA που
πρόκειται να πολλαπλασιαστεί.
* Το δίκλωνο μόριο που
χρησιμοποιείται ως μήτρα
θερμαίνεται, προκειμένου να
διαχωριστούν οι αλυσίδες του.
* Στη συνέχεια, η θερμοκρασία
μειώνεται, ώστε να επιτραπεί η
πρόσδεση των εκκινητών σε
καθεμία από τις αλυσίδες της
μήτρας.
→ Η DNA πολυμεράση του Thermus aquaticus (πολυμεράση Taq) χρησιμοποιείται για τη
σύνθεση των νέων αλυσίδων DNA, ξεκινώντας από τους εκκινητές. Έτσι, από ένα αρχικό
μόριο-μήτρα συντίθενται δύο μόρια DNA. Η διαδικασία μπορεί να επαναληφθεί για δεκάδες
κύκλους. Σε κάθε κύκλο, η ποσότητα του DNA διπλασιάζεται.
Κατά την PCR, το δίκλωνο DNA που πρόκειται να
πολλαπλασιαστεί (μπλε χρώμα) θερμαίνεται ώστε
να αποδιαταχθεί.
* Στη συνέχεια, σε καθεμία από τις αποδιαταγμένες
αλυσίδες προσδένεται ένα ολιγονουκλεοτίδιοεκκινητής. Τα 5′ άκρα των εκκινητών οριοθετούν
την αλληλουχία-στόχο που πρόκειται να
πολλαπλασιαστεί.
* Κατόπιν, η DNA πολυμεράση επεκτείνει τους
εκκινητές, με αποτέλεσμα την αντιγραφή της
αλληλουχίας-στόχου (το νεοσυντιθέμενο DNA
αναπαρίσταται με κόκκινο χρώμα).
* Η παραπάνω διαδικασία τριών βημάτων, που
συνιστά έναν κύκλο του πολλα-πλασιασμού,
επαναλαμβάνεται διαδοχικά κατά την PCR: (1) Το
DNA θερμαίνεται, ώστε να αποδιαταχθεί, (2) οι
εκκινητές προσδένονται στις αποδιαταγμένες
αλυσί-δες και (3) η DNA πολυμεράση συνθέτει
DNA επεκτείνοντας τους εκκινητές.
Το βρωμιούχιο αιθίδιο (με κόκκινο)
Λειτουργεί ως παρενθετικός
παράγοντας μεταξύ των ζευγών
βάσεων.