Manipulación de genes Flashcards
Microinyeccion de DNA en pronucleos en los huevos fertilizados
Se introduce vector en el momento que se fecunda ovulo
Se tiene que hacer antes de primera division para que llegue a todas las celulas
Proceso de Microinyeccion de DNA en pronucleos en los huevos fertilizados
Ovulo fecundado
Vector se introduce en fecundacion
Inician divisiones
El blastocisto se implanta en madre
PCR se usa para identificar presente de gen
Problemas de Microinyeccion de DNA en pronucleos en los huevos fertilizados
Sobreviven pocos huevos inyectados
Mutacion presente pero no se expresa
El gen se inserta al azar por lo que no todas las celulas reciben el gen (es dificil poner vector antes de primer division)
Proceso de modificaciones geneticas en celulas madre embrionicas
Huevo fecundado
Se llega a blastocisto
Celulas del blastocisto se remueven y se modifican a parte
Se transforman y esperamos para poder regresarlas al blastocisto
Nacen bebes quimera
Proceso de transferencia nucleo a celulas somatica (clonacion)
Nucleo de celula somatica
Nucleo se paso al citoplasma de un ovulo
Al citoplasma sentir que tiene los 46 cromosomas empieza a dividirse
Desarrollo del embrion in vitro
Blastocisto se implanta en madre
¿Qué debe hacerse con el óvulo receptor antes de introducir el nuevo núcleo?
El óvulo debe ser enucleado, es decir, se le debe quitar su núcleo.
CRISPR-CAS
Porcion CRISPR
CAS
CAS
Proteinas asociadas a CRISPR
CRISPR
Repeticiones palindrómicas cortas agrupadas y regularmente interespaciada
PAM
Secuencia de nucltoeidos que bacteria detecta como exogeno
Prcoeso de formacion de complejo CRIPR.-CAS
Bacteriofago inserta DNA
Ya que lo inserta se detecta PAM
Enzimas de restriccion cortan pedazo de DNA del bacteriofago
DNA cortado se pone en CRISPR espaciando las regiones palindromicas
Generacion de proteinas CAS
Corte de RNA CRISPR para madurarlo
Union de RNA con proteina CAS
Que da los interespacios el es CAS
DNA cortado del bacteriofago
Determina por cantidad de fagos que infectaron
Que genera la region CAS
Proteinas
En que se convierte el CRISPR
RNA
Que se le tiene que hacera a CRISPR para madurarlo
Corte de region palindromica y fago
Composicion de CRISPR-CAS
Region palindromica + fago + proteina CAS
Tipos de CRISPR-CAS
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Estructua de CRISPR-CAS
Tracer RNA
crRNA
Tracer RNA
Une RNA del bacteriofago con proteina CAS
Como se llama a la secuencia de fago una vez madurado el RNA
crDNA
Como se le llama a la secuencia palindromica en RNA ya maduro de CRISPR
Tracer RNA
Tipo de corte que realiza CAS
Doble hebra
Endonucleasa del CRISPR-CAS
CAS
Tipos de CAS que cortan solo DNA