DNA recombinante Flashcards

1
Q

Que son las enzimas de restriccion

A

Endonucleasas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Que hacen las enzimas de restriccion cuando detectan ADN extraño

A

Lo destruye

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Cual es la funcion de las enzimas de restriccion

A

Sistema de defensa natural de las bacterias

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

DNA Plasmidico

A

DNA con informacion genetica extra

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Modificacion que se necesita hacer al DNA para que no sea degradado y se reconozca como propio

A

Metilacion

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Enzimas de restriccion

A

Endonucleasas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Funcion de las endonucleasas

A

Degradan DNA extraño, reconoce secuencia y corta DNA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Enzimas del sistema de modificacion

A

Metilasas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Funcion de la enzima de restriccion tipo I

A

Encuentra una secuencia especifica y corta muy lejos
no es especifica

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Funcion de la enzima de restriccion tipo II

A

Reconoce secuencas palindromicas y ahi corta

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

que son secuencias palindromicas

A

secuencias que se ven igual de izquierda a derecha que de derrecha a izquierda

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Funcion de la enzima de restriccion tipo III

A

reconocen secuencia y corta a cualquiera lado un poco mas lejos

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Funcion de la enzima de restriccion tipo IV

A

no se sabe
Cortan DNA metilado

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Enzimas de restriccion que se conocen

A

I
II
III
IV

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Corte cohesivo

A

cortes en diferentes posiciones
Dejan nucleotidos libres

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Corte romo

A

Cortes simetricos en ambas cadenas
no nucleotidos libres

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Tipos de cortes de las enzimas de restriccion tipo II

A

Cohesivo
Romo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Tipos de cortes de las enzimas de restriccion tipo II que se prefiere en el laboratorio

A

Cohesivo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Que cortan las enzimas de restriccion

A

DNA
plasmido

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Que permite que sean complementarios el DNA y el plasmido cortados por enzimas de restriccion

A

Que sean cortados por la misma enzima

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Enzima que une plasmido y DNA

22
Q

Vector

A

molecula dobel cadena de DNA que puede albergar otro DNA

23
Q

Todo aquello que puede ser utilizado para generar DNA recombinante

24
Q

Tipos de vectores

A

Clonacion
Expresion

25
Vector de expresion
Permite producir un transcrito o una proteina
26
Vector de clonacion
Permite almacenar secuencias y obtener grandes cantidades de DNA
27
Tipo de corte que causar ADN linales
Romo
28
Funcion de los puntos ORI
Permitir replicacion
29
Que necesita tener el plasmido para una clonacion
punto ori Secuencia multiple de clonacion Marcaje de seleccion
30
Cual es la funcion de las secuencias multiples de clonacion
Es la region donde se hace el corte Ahi estan las secuencias palindromicas
31
Funcion del marcaje de seleccion
Determina si el vector entro en la celula
32
Funcion del vector de expresion
Generacion de una proteina
33
que debe de tener un vector de expresion
ORI - replicacion Promotor - transcripcion Secuencia IRES - traduccion Secuencia multiple. - secuencias palindromicas Marcaje de seleccion - determina entrada
34
IRES
Permite traduccion independiente de cap
35
Importancia del sitio ORI
Origen de la replicacion
36
Importancia del promotor
Inicion transcripcion
37
Importancia de las secuencias multiples
Determina sitio de secuencias palindromicas que es donde esta el gen que se corta
38
plasmido
Doble cadena de DNA Circular Puede albercar fragmentos de DNA pequeños
39
Que determina que se utilice un plasmido o un bacteriofago como. vector
Secuencia corta. - plasmido Secuencia larga - bacteriofago
40
Cosmido
Mezcla de bacteriofago con plasmido
41
Ventajas de los cosmidos
Permite fragmentos mas grandes Puede volverse circular
42
Principal funcion de los cosmidos
Clonacion
43
Principal uso de los cromosomas artificiales
Clonacion
44
Tipos de cromosomas artificiales
BAC YAC
45
Tipos de huesped
Bacterias Levaduras
46
Bacteria mas utilizada como huesped
escherichia coli
47
Limitaciones de usar bacterias como huesped
No realiza modificaciones postraduccionales (glicolisacio) Puede tener problemas en el plegamiento
48
Limitaciones de usar levaduras como huesped
modificaciones postraduccionales son distintas a las del humano
49
Ventaja de utilizar levaduras como huesped
Permite modificaciones postraduccionales
50
Pasos de la clonacion
Preparacion del inserto que se va a clonar se corta con enzimas de restriccion Se selecciona el vector dependiendo del gen (expresion o clonacion) Corte con la misma enzima de restriccion Union con ligasa Ya tenemos DNA recombinante (dos DNA de origen diferente en misma molecula) Preparacion de celulas (medio de cultivo que genera permeabilidad en la membrana de la bacteria) Transformacion celular que es definida por el marcaje
51
¿Cuál es el objetivo principal de la preparación del inserto durante la clonación?
Obtener un fragmento de DNA específico mediante el uso de enzimas de restricción.
52
¿Cuál es el objetivo de la transformación celular en el proceso de clonación?
Permitir la adquisición del gen exógeno y generar un nuevo fenotipo.