La régulation de la transcription chez les eucaryotes Flashcards
Quelles-sont les deux techniques pour observer l’effet des séquences régulatrices?
- Utilisation de gènes rapporteurs
2. Utilisation de protéine de fusion (Tag) à la fin de l’ADN
Le domaine de liaison à l’ADN des protéines activatrices/inhibitrices sont normalement:
A) des domaine ARN complémentaires à la séquence ADN
B) Des feuillets-ß
C) Des hélice qui s’insèrent dans le sillon majeur
C) Des hélice qui s’insèrent dans le sillon majeur
Qui suis-je?
Domaine souvent en hétérodimères, de plusieurs hélices dont une reconnait la séquence dans le sillon majeur et les autres servent au positionnement sur la charpente.
Homéodomaine.
Pourquoi est-il intéressant d’avoir des hétérodimères pour les domaines des protéines?
L’utilisation combinatoire d’un nombre limité de TF fournit les moyens de contrôler finement le transcriptome. ↑ complexité.
À quoi sert le zinc dans les domaines doigts de zinc?
Stabiliser la structure. Lie les aa cystéine et histidine et modifie la structure 3D de la protéine régulatrice
Qui suis-je?
Homo ou hétérodimère d’hélices alpha insérées dans sillons majeurs voisins avec domaines de tronçons spiralés enroulés par interaction hydrophobes entre résidus de leucine.
Agraffe à leucine
Qui suis-je?
4 hélices alpha qui ont des intéractions via leur région leucine dans une région relâchée formant une boucle. Les 2 unités structurales dont des dimères.
Hélice-boucle-hélice
Quels-sont les domaines de liaison à l’ADN vus?
Agraffe à leucine, Doigt de zinc, hélice-boucle-hélice, homéodomaine
Quelle affirmation est fausse concernant les domaines activateurs de la transcription:
A) Les domaines activateurs sont peu structurés
B) Les domaines activateurs peuvent recruter indirectement la polymérase via FTG (généraux) ou complexes médiateurs
C) Les domaines activateur recrutent des facteurs de modifications des histones
D) Agissent directement sur l’ARN pol.
D) Agissent directement sur l’ARN pol.
Faux, indirectement.
Quels-sont les 3 modes d’action possibles des répresseurs?
- interférer avec les activateurs par compétition ou blocage
- Interagir avec le complexe d’initiation via le complexe médiateur
- Compacter l’ADN pour rendre les gènes moins accessibles
Qui suis-je?
Lie l’ADN sur une séquence spécifique partout dans le génome, contribue à la l’organisation du génome en domaines transcriptionnels disctincts. Peut influencer un enhancer à activer un autre promoteur ou former une boucle. Concept de mur.
Isolateur. CCCTC-binding factor chez les mammifères.
Quelles-sont les caractéristiques additionnelles des actions des protéines régulatrices chez les eucaryotes?
- Les nucléosomes et les modificateurs de la chromatine
- Plus de régulateurs et plus de grandes séquences régulatrices
- Vaste intégration de signaux
Qui suis-je?
Séquence d’ADN qui fixe des facteurs régulateurs de transcription ce qui a pour conséquence d’augmenter la transcription de gènes situés en aval ou en amont.
Enhancer
Qu’est-ce qu’un isolateur?
Élément spécifique d’ADN contrôlant l’action des activateurs. Situé entre un enhancer et un promoteur, un isolateur inhibe l’activation du gène induite par l’activateur.
Quelles-sont les 3 zones de promoteurs?
Promoteur basal, promoteur proximal, promoteur distal
Pour élucider les séquences régulatrices, on utilise des gènes rapporteurs. Quelles caractéristiques doivent avoir ces derniers?
- Le gène doit être étranger au génome de l’organisme modifié.
- Le produit doit permettre une visualisation précise de l’expression dans les tissus.
- Le résultat doit être quantifiable afin de mesurer l’activité du promoteur.
Nommer deux exemples de gènes rapporteurs
B-galactosidase et luciférase
Nommez tous les types de domaines liant l’ADN qu’on peut retrouver.
- Homédomaine
- Doigt de zinc
- Agraffe à leucine
- Hélice-boucle-hélice
Pourquoi utiliser des hétérodimère pour les facteurs de transcription?
Plus grande complexité, variété combinatoire.
Comment la dimérisation des deux longues hélices alpha de l’agraffe à leucine est-elle réalisée?
elles forment des courts tronçons bispiralés, au
sein desquels les deux hélices restent associées
par des interactions hydrophobes entre des
résidus leucine
Vrai ou faux. L’agraffe à leucine et l’homéodomaine forment des hétérodimères.
Faux,
L’homéodomaine forme des hétérodimères.
L’agraffe à leucine peut former des homo ou hétérodimères.
Comment se fait l’association des deux sous-unités chez l’hélice-boucle-hélice?
Se fait via une région riche en leucine présente sur les deux hélices.
Qui sont-ils?
Ils sont relativement peu structurés. On pense qu’ils forment plutôt des surfaces adhésives capables d’interagir avec plusieurs autres protéines.
Les domaines activateurs.
Vrai ou faux.
Les activateurs agissent directement sur l’ARN pol
Faux.
Quels-sont les deux modes d’actions des activateurs?
- Recruter des modeleurs de la chromatine (modificateurs d’histones)
- Recruter indirectement la polymérase à travers le complexe médiateur ou des facteurs généraux de la transcription.
Quelles-sont les 3 façons dont peuvent agir les répresseurs?
- Interférer avec les acrtivateurs (compétition avec le site de liaison ou blocage)
- Interagir avec les complexe d’initiation via le complexe médiateur
- Compacter la chromatine et rendre les gènes inaccessibles.
Quel-est l’effect de l’acétylation des histones sur la régulation de la transcription?
L’acétylation permet de dérouler l’ADN et le rend donc plus accessible: activation plus facile
Quel-est l’effet d’une méthylation des histones sur la régulation de la transcription?
Un groupement méthyl sur la queue provoque le recrutement de protéines pour la formation de l’hétérochromatine. Répression de la transcription.