l'apport de la biologie moléculaire en hémato-oncologie Flashcards
qu’est-ce que la biologie moléculaire?
une discipline scientifique qui combien la génétique, la biochimie et la physique, c’est une étude des mécanismes moléculaires de la cellule
quel est l’immunohistochimie?
lorsqu’on utilise un Ac pour repérer un Antigenes et finalement un autre anticorps qui va se lier au premiers et créer une couleures, ceci est pour pouvoir visualiser les genres de cellules dans un tissu
pourquoi est-ce que lorsqu’on observe le sang de personne affecté par la leucémie myéloïde chronique on dit qu’il est purulent?
le sang a une accumulation de cellules nucléées et granuleuses
en 1960 ils ont découvert quoi?
que la leucémie myéloïde chronique était causer par le chromosome de Philadelphie
qu’elle est le chromosome de Philadelphie ?
translocation entre les gènes Bcr-Abl des chromosomes 9 et 22, ce qui fait en sorte que le chromosome 22 est plus petit qu’à la normale et le chromosome 9 est plus grand que d’habitude
le chromosome de Philadelphie est nécéssaire pour quoi?
le diagnostic et la thérapeutique
vrai ou faux: il y’a 100% de chance de développer la leucémie myéloïde chronique si nous possédons un chromosome de Philadelphie même s’il nous n’avons pas de symptômes
Vrai
Bcr-Abl est quoi? quel composante de la cellule ?
un recepteur membranaire qui conduit à la proliferation et la survie cellulaire
comment est-ce que le médicament Gleevec marche?
il bloque l’attachement de l’ATP à Bcr-abl ce qui empêche la phosphorylation du substrat
quels sont les trois méthodes de détecter la LMC?
-Caryotype
- FISH
-PCR
comment marche un caryotype?
on met en culture des cellules, on ajoute de la colchicine qui bloque les cellules en métaphase, on les lyse et ensuite on les fixe et étale sur une lame, finalement on colore les chromosomes au Giemsa. La coloration montre les patrons des chromosomes que nous pouvons observer
Qu’est-ce que la FISH?
on étiquette un petit morceau d’ADN qui va nous servir de sonde avec un colorant fluorescent. On va le dénaturer et s’il y’a hybridation de la sonde avec le chromosome cible ça va fluorescé ce qui va nous montrer que la séquence cible est présente dans le chromosome.
pour détecter la LMC avec la FISH, les sondes devraient être diriger vers quoi?
Bcr- Abl, s’il y’a fluorescence ca veut dire que il y’a un chromosome de Philadelphie
quels sont les points forts de la technique FISH ?
- technique simple avec une excellents résolution
- utilisable avec cellules en division ou non
- peut l’utiliser avec plusieurs sondes
- identification de differents types de mutations
quel est le point faible de la technique FISH?
faut savoir ce qu’on recherche
quel est la PCR?
Une amplification d’une séquence génique donc exemple si on amplifie la séquence Bcr-Abl mais il n’y a pas de chromosome de Philadelphie il n’y aura pas d’amplification si oui, il y aura amplification de la séquence génique et on va pouvoir l’observer sur un gel
comment marche le FRET?
on a deux sondes diriger vers des séquences géniques qui sont une à coté de l’autre, une des sondes est une sonde donneuse et l’autre une receveuse, lorsqu’ils vont s’apparier a leur séquence cible si elles sont proches l’une de l’autre il y aura fluorescence puisque la donneuse donnera de l’énergie à la receveuse. Mais si les séquences ne sont pas proche l’une de l’autre il n’y aura pas de fluorescence
1.quel est la méthode de détection de la LMC la plus sensible?
2. la moins sensible?
- Caryotype
- le PCR
que veut dire une Mesure de la reponse?
c’est la mesure du nombre de gène Bcr-Abl dans le sang ou la moelle osseuse
que veut dire MMR ?
major molecular response: 0.1% des cellules ont le gene bcr-abl suite à un traitement (une grande réduction)
L’étude IRIS sert à quoi?
Définir le seuil des réponses hématologiques et cytogénétique suite à un traitement contre la LMC, ça caractérise la diminution du nombre de cellules avec le gène Bcr-Abl
qu’arrive t’il si nous arrêtons le traitement contre la LMC?
soit la maladie va réapparaitre et/ou il y aura apparition d’une resistance au médicament
Vrai ou faux: après un diagnostique de LMC il n’y a pas de monitoring.
Faux, il y’a du monitoring
que veut dire un jalon thérapeutique?
une étape importante du traitement (un minestrone)
