Kapittel 3 - Mikroskopering

Question 1

Mikroskoper

Answer 1

• Lysfeltmikroskopi
  - Gir liten kontrast
• Fasekontrast
  - Enklere å bruke ved ikke-fargede preparater
• Mørkfeltmikroskopi
  - Gir mørk bakgrunn og bakterier som lyser opp
• Elektronmikroskop (bruker elektroner i stedet for lys, gir høyere oppløsning siden elektroner har kortere bølgelengde enn synlig lys)

Question 2

Hvorfor farging?

Answer 2

• Liten kontrast mellom omgivelsene og organismer
• Bestemme hvilke gruppe organismen hører til(gram-farging)
• Undersøke spesifikke strukturer
• Basiske fargestoffer oftest brukt
  - Der salter av organiske baser der kationet(+) er farget
  - Bakterier svakt negativ ladd

Question 3

Enkel farging

Answer 3

• FIKSERING
• Metylenblått eller Krystallfiolett - Vaske av overskudd
  - Alle får samme farge
  - Fungerer for å se form

Question 4

Differensiell farging (gramfarging)

Answer 4

• FIKSERING (VELDIG VIKTIG Å HUSKE)
  
  • Mikroorganismene spres utover på objektglass -> Tørke -> Fikseres ved varme (gassflamme)
• Krystall fiolett (Lilla)
• Farge med “Iod-iod-kalium”
• Etanol (vaske ut krystallfiolett i Gram-negative)
• Safranin (Rosa)

Question 5

Differensiell farging (syrefast)

Answer 5

Benytter et basisk fargestoff (karbolfuksin) i en syre-alkohol blanding, kalles syrefast farging.

Question 6

Spesielle fargeteknikker

Answer 6

Negativ farging, farger løsningen rundt objektet
- benyttes for å se kapsel

Farge med varm malakitt grønn
- endosporer

Mordant-tilleggsfargestoff 
      -kan benyttes for å holde på fargen
       Binde spesifikke strukturer
       øker ”størrelsen” på cellen
       benyttes ved flagellfarging

Question 7

Hvorfor vi må benytte immersjonsolje sammen med oljeimmersjonslinser (100x)

Answer 7

På grunn av lysavbøyning ved 100x linser. Lyset avbøyes så kraftig at det ikke går inn i mikroskopet. Oljen retter opp avbøyningen