IVc. Purificación de proteínas

Question 1

Técnica para fraccionar mezclas orgánicas (prote, CHO, lípidos, ácidos nucleicos) al desplazarlas a través de una matriz

Answer 1

Cromatografía

Question 2

La cromatografía es el método que aprovehca las diferencias en coeficiente de partición entre una fase móvil y una estacionaria. V o F

Answer 2

V

Question 3

Cociente entre las concentraciones de una sustancia en las 2 fases formadas por 2 disolventes inmiscibles en equilibrio. Mide solubilidad diferencial

Answer 3

Coeficiente de partición

Question 4

Los componentes de la mestra que interaccionan fuertemente con la fase estacionaria tendrán un tiempo de retención menor. V o F

Answer 4

F, tendran un tiempo de retención mayor

Question 5

Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, puede ser un sólido o un líquido ancaldo a un soporte sólido

Answer 5

Retención

Question 6

Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase móvil que puede ser un líquido o un gas

Answer 6

Desplazamiento

Question 7

Migración de los componentes de una mezcla retenidos a lo largo de la fase estacionaria, impulsados por el desplazamiento ejercido por la fase móvil

Answer 7

Elución

Question 8

Tipo de cromatografía donde la fase estacionaria es un líquido anclado a un soporte sólido y la móvil es un líquido

Answer 8

Líquido-líquido

Question 9

Tipo de cromatografía donde la fase estacionaria es un líquido no volátil impregnado en un sólido y la fase movil es un gas

Answer 9

Líquido-gas

Question 10

Versión primitiva de la capa fina, para aa individuales o dipéptidos. Empleado por Sanger en secuenciación de la insulina

Answer 10

Cromatografía en papel

Question 11

Los más utilizados son silica gel y alumina, fase estacionaria: placa absorbente. Adherido a soporte de plástico, vidrio o aluminio

Answer 11

Cromatografía en capa fina

Question 12

Fase estacionaria se empaqueta en columna evitando que el aire quede atrapado interrumpiendo la continuidad de fases. Muestra se eluye con una mezcla de solventes de dif polaridades

Answer 12

Cromatografía en columna

Question 13

Mecanismo es el intercambio reversible de los iones en solución con los grupos funcionales cargados unidos covalentemente a una fase estacionaria insoluble llamada resina

Answer 13

Comatografía de intercambio iónico

Question 14

Fuerte: ácido sulfónico
Débil: ácido carboxilico
Resina de carga negativa

Answer 14

Intercambio catiónico

Question 15

Fuerte: aminas cuaternarias
Débil: aminas secundarias o terciarias
Resina carga positiva

Answer 15

Intercambio aniónico

Question 16

Molécula con carga negativa se unira a intercambiador iónico con grupos cargados +, pero eluirá de la columna al incrementar la [] de sales. V o F

Answer 16

V

Question 17

Separación se optimoza cambiando gradualmente el pH y/ la [ ] de sales de la fase móvil para crear un gradiente. V o F

Answer 17

V

Question 18

Llamada también filtración en gel, su fase estacionaria = material poroso inerte. Moléculas pequeñas entran en laberinto de espacios dentro de matriz y son retrasadas.

Answer 18

Cromatografía de exclusión molecular

Question 19

En la cromatografía de exclusión molecular su verdadero mecanismo se basa en el tamaño en disolución. V o F

Answer 19

V

Question 20

Diferentes fases móviles pueden afectar al orden de elución debido a los cambios de tamaño en disolución (radio hidrodinámico o radio de giro). V o F

Answer 20

V

Question 21

Cromatografía de mayor especificidad y selectividad. Se basa en la interacción específica de 2 moléculas (antígeno/anticuerpo)

Answer 21

Cromatografía de afinidad

Question 22

Moléculas retenidas se liberan mediante un cambio del medio eluyente a condiciones en las que la interacción se debilite (pH, fuerza iónica, polaridad, solución de moléculas inmovilizadas). V o F

Answer 22

V

Question 23

Muchas proteínas no se unen suficientemente a un ligando que permita purificación. se expresa prote recombinante de fusión con un péptido que une con alta afinidad y especificidad a un ligando

Answer 23

Etiquetas terminales

Question 24

La etiqueta se remueve posteriormente con una proteasa que corta cerca de la unión entre proteína de interés y la etiqueta. V o F

Answer 24

V

Question 25

Cromatografía líquida de alto rendimiento. Uso de bombas de alta presión para mover las moléculas a través de la columna. Analisis de componentes no volátiles (azúcares, vit, drogas y metabolitos)

Answer 25

High performance liquid chromatography (HPLC)