Immunohistochimie

Question 1

Qu’est-ce que l’immunohistochimie ?

Answer 1

Réaction d’un anticorps avec son antigène correspondant où l’antigène est l’élément ciblé dans le tissu et l’anticorps l’agent de reconnaissance ajouté.

Question 2

Quels sont les principaux objectifs des techniques d’immunohistochimie ?

Answer 2

• Détermination de la présence de cellules cancéreuses
• Détermination de l’origine des cellules tumorales dans un tissu
• Détermination de cellules métastasiques
• Détermination de la présence de toxines

Question 3

Quels sont les deux types majeurs de fixation des tissus ?

Answer 3

• Déshydratation (séchage)
• Fixation par des agents chimiques

Question 4

Quelles sont les conséquences de la fixation par congélation pour l’immunofluorescence ?

Answer 4

• La congélation de nuit préserve l’activité antigénique
• Le signal est plus fort
• Les antigènes solubles sont perdus

Question 5

Quels facteurs influencent la qualité de la technique de fixation ?

Answer 5

• Délai entre le prélèvement et la fixation
• Propriétés et concentration des fixateurs
• pH et solutions tampons
• Durée dans le fixateur
• Entreposage des lames finales

Question 6

Vrai ou Faux : La vimentine est un antigène facilement détruit.

Answer 6

Vrai

Question 7

Quelles sont les conséquences d’une fixation excessive sur la vimentine ?

Answer 7

Perte progressive de la coloration si trop longtemps dans le fixateur. Si vimentine est complètement négatif (et devrait être positif), les sections ont été trop fixées.

Question 8

Quelles méthodes de récupération des épitopes existent ?

Answer 8

• Méthode à la chaleur (solution à bon pH, température élevée)
• Méthode aux enzymes (digestion par enzymes)

Question 9

Quels sont les fluorochromes les plus communs utilisés en immunofluorescence ?

Answer 9

• Fluoroscéine (coloration verte)
• Rhodamine (coloration rouge-orange)

Question 10

Qu’est-ce que la méthode directe en immunohistochimie ?

Answer 10

Anticorps à spécificité connue pour identifier un antigène dans le tissu du patient, couplé à un fluorochrome.

Question 11

Quelles sont les étapes de la méthode indirecte en immunohistochimie ?

Answer 11

• 1er anticorps : spécifique à l’antigène
• 2ème anticorps : spécifique au 1er anticorps et couplé à un marqueur

Question 12

Qu’est-ce que l’avidine et où se trouve-t-elle ?

Answer 12

Protéine provenant du blanc d’œuf ou streptomycetes, possédant une forte affinité pour la biotine.

Question 13

Complétez la phrase : La fixation dans l’_______ est préférable pour préserver la vimentine.

Answer 13

alcool

Question 14

Quelles sont les méthodes de visualisation en immunohistochimie ?

Answer 14

• Immunofluorescence
• Immunohistochimie enzymatique

Question 15

Quels sont les désavantages de la méthode directe en immunofluorescence ?

Answer 15

• Seulement les sections congelées
• Microscope en fluorescence souvent nécessaire

Question 16

Quelles sont les deux principales méthodes de blocage dans la méthode Avidine-Biotine ?

Answer 16

• Blocage de l’activité endogène de la peroxydase
• Blocage des sites chargés (collagène et conjonctif)

Question 17

Vrai ou Faux : Les méthodes d’immunohistochimie peuvent rencontrer des problèmes qui nécessitent des résolutions spécifiques.

Answer 17

Vrai