Histotecnia Flashcards

1
Q

se refiere a los métodos utilizados para obtener preparaciones histológicas para su estudio en microscopía óptica.

A

Histotecnia

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2
Q

¿Qué abarca la Técnica Histológica?

A

abarca varios procedimientos a los que se somete un tejido para proporcionar cortes montados bajo un cubre objeto con imágenes de estructuras contrastadas.

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3
Q

¿Cuál es el propósito de la Histotecnia?

A

El propósito de la Histotecnia es preparar muestras de tejido para su estudio detallado bajo microscopía óptica o electrónica.

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4
Q

¿Qué tipos de microscopía se utilizan para el estudio de las preparaciones histológicas?

A

Las preparaciones histológicas pueden ser estudiadas tanto bajo microscopía óptica como electrónica.

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5
Q

¿Cuáles son las dos formas de obtener una muestra de tejido para comenzar con la técnica histológica?

A

son la necropsia y la biopsia.

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6
Q

Para comenzar con la histotecnia primero se debe de

A

obtener una muestra del tejido a estudiar

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7
Q

¿Qué es la necropsia en el contexto de la técnica histológica?

A

La necropsia es el examen u obtención de tejido de un organismo muerto.

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8
Q

¿Qué es la biopsia en el contexto de la técnica histológica?

A

Respuesta: La biopsia es el examen u obtención de tejido de un organismo vivo.

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9
Q

¿Cuáles son algunos tipos de biopsia?

A

Algunos tipos de biopsia mencionados son la biopsia incisional
excisional
por sacabocado
por punción y absorción,
por raspado
y por trepanación.

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10
Q

¿Cuál es la diferencia entre necropsia y biopsia en términos de la condición del organismo?

A

La necropsia se realiza en organismos muertos, mientras que la biopsia se realiza en organismos vivos.

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11
Q

¿Qué es la fijación en el contexto de la técnica histológica?

A

La fijación se refiere al tratamiento del tejido con sustancias químicas con varias finalidades.

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12
Q

¿Cuáles son las finalidades de la fijación ?

A

1) Conservar los tejidos para que se asemejen lo más posible a su estado in vivo.

2) Aumentar la dureza del tejido para facilitar la preparación de finas películas.

3) Eliminar bacterias y gérmenes presentes en los tejidos.

4)Detener los procesos celulares dinámicos que ocurren tras la muerte de la célula.

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13
Q

¿Cómo se mantienen las estructuras durante el proceso de fijación?

A

Respuesta: Las estructuras se mantienen al estimular la formación de enlaces cruzados entre las proteínas.

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14
Q

¿Cuáles son algunos de los agentes más utilizados para la fijación en la microscopía de luz?

A

1) formaldehído al 5%
2) formol al 10% o formalina
3) glutaraldehído al 2.5%
4) tetróxido de osmio
5) líquido de Helly
6) fijador de Bowie
7) cloruro de mercurio
8) ácido pícrico.

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15
Q

¿Cuáles son algunos de los fijadores utilizados en la microscopía electrónica?

A

*glutaraldehído al 2.5%
* paraformaldehído
* tetróxido de osmio
*permanganato de potasio.

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16
Q

¿Cuál es la regla de oro para la fijación de tejidos?

A
  1. se minimiza el tiempo entre la muerte del tejido y el proceso de fijación, preferiblemente alrededor de 12 horas.
  2. Tamaño de la Muestra que debe ser de 2-3 cm. variando el estudio para lo cual se va a utilizar.
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17
Q

¿Qué proceso sigue a la fijación de la muestra en la técnica histológica?
.

A

El proceso que sigue a la fijación es la deshidratación.

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18
Q

¿Por qué es necesario deshidratar la muestra después de la fijación?

A

: La deshidratación es necesaria porque gran parte del tejido está compuesto por agua, y se busca eliminar esta agua para preparar adecuadamente la muestra para los siguientes pasos del proceso histológico.

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19
Q

¿Qué tipo de soluciones se utilizan para la deshidratación del tejido?

A

Se utilizan soluciones acuosas de menor a mayor concentración de un agente deshidratante, como Alcohol Etílico o Acetona.

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20
Q

¿Cuál es la serie gradual de soluciones acuosas utilizada en la deshidratación?

A

La serie gradual comienza con alcohol al 50%, luego con soluciones de 60%, 70%, 80%, 90%, 96%, y finalmente alcohol al 100% para eliminar el agua.

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21
Q

¿Por qué se aplica una serie gradual de soluciones en lugar de utilizar alcohol al 100% de forma inmediata?

A

porque si se colocara el tejido directamente en alcohol al 100%, el agua saldría demasiado rápido y podría deformar el tejido.

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22
Q

¿Cuánto tiempo suele tomar el proceso de deshidratación?

A

El proceso de deshidratación generalmente toma de 6 a 24 horas, dependiendo de la naturaleza y tamaño de la muestra.

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23
Q

¿Qué efecto tienen el alcohol y el xileno en la célula durante el proceso de histotecnia?

A

El alcohol y el xileno disuelven los lípidos de la célula.

24
Q

¿Qué se extrae junto con los lípidos de la célula al utilizar alcohol y xileno?

A

Al utilizar alcohol y xileno, se extraen las grasas y los lípidos de la célula

25
Q

¿Qué colorantes se utilizan para contrarrestar la extracción de lípidos durante el proceso histológico?

A

colorantes de Sudan

26
Q

¿Por qué es necesario realizar la inclusión o impregnación de los tejidos en el proceso histológico?

A

La inclusión o impregnación es necesaria para poder obtener cortes lo suficientemente finos de los tejidos que sean observables al microscopio.

27
Q

¿Cuáles son las sustancias comúnmente utilizadas para la inclusión de los tejidos?

A

Las sustancias utilizadas para la inclusión son la gelatina y la parafina.

28
Q

¿Cuál es el objetivo principal de la inclusión en el proceso histológico?

A

distinguir entre las células superpuestas en un tejido y la matriz extracelular, y también proporcionar una consistencia lo suficientemente firme al tejido para su manejo y corte.

29
Q

¿Cómo se logra la inclusión de la parafina o el medio de inclusión en el tejido?

A

La inclusión se logra al infiltrar el tejido con parafina líquida o cualquier medio de inclusión en estado líquido que disuelve el medio de aclaramiento y penetra en el tejido

30
Q

¿Cuál es el proceso para realizar la inclusión de parafina en el tejido?

A

: Por lo general, la muestra de tejido se coloca en un recipiente y se le agrega parafina fundida a 60º C. Luego, se mantiene la muestra en una estufa a 60º C durante un tiempo que varía de 30 minutos a 6 horas para permitir la penetración y solidificación de la parafina.

31
Q

¿Qué se forma a partir de la solidificación de la parafina con el trozo de tejido incluido?

A

A partir de la solidificación de la parafina con el trozo de tejido incluido, se forma un bloque sólido de parafina conocido como taco.

32
Q

¿Qué tipo de medios de inclusión se utilizan comúnmente en la microscopía electrónica?

A

En la microscopía electrónica, se utilizan comúnmente resinas polimerizadas como medios de inclusión

33
Q

¿Cuál es el objetivo de la sección o corte en el proceso histológico?

A

El objetivo de la sección o corte es obtener secciones delgadas del taco de tejido que permitan el paso de la luz y sean adecuadas para su observación al microscopio.

34
Q

¿Qué instrumento se utiliza para realizar los cortes en el proceso histológico?

A

Se utiliza un aparato llamado microtomo para realizar los cortes en el proceso histológico.

35
Q

¿En qué situaciones se utiliza la técnica de congelación de tejidos en lugar de la inclusión en parafina?

A

cuando se desea estudiar grasas o lípidos que se extraen durante el aclaramiento, o cuando se requiere preservar enzimas que pueden ser inactivadas por el calentamiento en la inclusión en parafina.

36
Q

¿Cómo se logra la congelación rápida de una muestra de tejido en la técnica de congelación?

A

La muestra de tejido se sumerge en nitrógeno líquido para lograr una congelación rápida en la técnica de congelación.

37
Q

¿Qué instrumentos se utilizan para realizar cortes de congelación en la técnica de congelación de tejidos?

A

Respuesta: Se utiliza un aparato especial llamado microtomo de congelación, aunque también existe un dispositivo más avanzado conocido como criostato, que permite obtener cortes de congelación de manera más eficiente.

38
Q

¿Qué tipo de cortes se requieren para la microscopia electrónica y qué instrumento se utiliza?

A

Para la microscopia electrónica se requieren cortes más delgados, denominados ultrafinos, con un espesor de aproximadamente 25 a 100 nm. Se utiliza un microtomo con hoja de vidrio o diamante para obtener estos cortes.

39
Q

¿Cómo se montan los cortes preparados para la microscopia electrónica?

A

Los cortes preparados se montan sobre rejillas de cobre con un diámetro de 3 mm. para su posterior análisis en la microscopia electrónica.

40
Q

¿Por qué los cortes en parafina no son aptos para su examen con el microscopio?

A

porque los tejidos se encuentran infiltrados en parafina y carecen de color.

41
Q

¿Qué se utiliza como adhesivo para colocar los cortes en portaobjetos?

A

: Se utiliza una pequeña cantidad de albúmina como adhesivo para colocar los cortes en portaobjetos.

42
Q

¿Qué se utiliza para eliminar la parafina de los cortes en el proceso de montaje?

A

Se utiliza un solvente orgánico para eliminar la parafina de los cortes en el proceso de montaje.

43
Q

¿Cuál es el paso siguiente después de eliminar la parafina de los cortes en el proceso de montaje?

A

Después de eliminar la parafina, los cortes se incluyen nuevamente en xilol y la muestra se rehidrata mediante una serie de graduaciones decrecientes de alcohol etílico hasta llegar a una solución 100% de agua.

44
Q

¿Cuáles son las tres clases de colorantes utilizados en el proceso de tinción?

A

*colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula,

*colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz extracelular

*sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de metales con ellos.

45
Q

¿Qué son los colorantes básicos y cómo reaccionan con los componentes texturales?

A

Los colorantes básicos son moléculas de anilina con una o más cargas positivas en su porción coloreada. Reaccionan con los grupos aniónicos de los componentes texturales, como los grupos fosfato de los ácidos nucleicos, los grupos sulfato de los glucosaminoglucanos y los grupos carboxilo de las proteínas.

46
Q

¿Cuál es el papel de la hematoxilina en la coloración de los tejidos?

A

La hematoxilina no es un colorante básico en sentido estricto, pero se utiliza con un mordiente como intermediario entre el componente textural y la anilina. La coloración con hematoxilina se asemeja a la tinción que produce un colorante básico debido a este proceso.

47
Q

¿Qué componentes de los tejidos se consideran basófilos y presentan basofilia?

A

Los componentes como la heterocromatina y los nucléolos del núcleo debido a los grupos fosfato ionizados, y la matriz del cartílago debido a los grupos sulfato ionizados se consideran basófilos y presentan basofilia.

48
Q

¿Qué caracteriza a los colorantes ácidos y qué componentes texturales son acidófilos?

A

Los colorantes ácidos llevan una carga negativa en la porción coloreada de la molécula. Los componentes texturales como la mayor parte del citoplasma no especializado, los filamentos citoplasmáticos y las fibras extracelulares son acidófilos y presentan acidofilia.

49
Q

¿Qué es la metacromasia y cómo se manifiesta en el fenómeno de cambio de color de un colorante?

A

La metacromasia es el fenómeno en el cual un colorante cambia de color después de reaccionar con un componente textural. En tejidos con altas concentraciones de polianiones, la molécula del colorante se polimeriza entre sí, lo que provoca que sus propiedades de absorción sean diferentes a las de las moléculas individuales.

50
Q

¿Cuál es la causa de la metacromasia y qué tipo de cargas aniónicas están involucradas?

A

La metacromasia se debe a la presencia de una gran cantidad de cargas aniónicas cercanas unas a otras en el tejido. Esto es prevalente en la sustancia fundamental del cartílago y en los gránulos de los mastocitos. El fenómeno de metacromasia se observa cuando el Azul de Toluidina tiñe estos componentes de color púrpura.

51
Q

¿Qué son los cromotropos y qué componentes texturales pueden colorearse meta cromáticamente?

A

Los cromotropos son los componentes texturales que pueden colorearse meta cromáticamente. Principalmente, los glucosaminoglucanos sulfatados y las nucleoproteínas son los componentes que muestran metacromasia en la coloración.

52
Q

¿Qué nombre reciben las alteraciones en los tejidos causadas por errores en los procedimientos histotécnicos?

A

: Las alteraciones en los tejidos causadas por errores en los procedimientos histotécnicos reciben el nombre de artefactos.

53
Q

¿Qué causa la deshidratación rápida en altas concentraciones de alcohol o el excesivo calor de la parafina?

A

La deshidratación rápida en altas concentraciones de alcohol o el excesivo calor de la parafina causa retracciones, que es la separación de los tejidos que en vida eran vecinos.

54
Q

¿Qué ocurre cuando la cuchilla del micrótomo está mal afilada?

A

Cuando la cuchilla del micrótomo está mal afilada, presenta muescas microscópicas que al cortar los tejidos producen líneas de destrucción llamadas mellas o estrías.

55
Q

¿Qué sucede cuando el baño de flotación no tiene la temperatura adecuada durante el proceso de corte de los tejidos?

A

Cuando el baño de flotación no tiene la temperatura adecuada, los cortes no se extienden completamente, lo que causa dobleces anormales en el tejido llamados arrugas o pliegues.

56
Q

¿Qué se logra al inactivar ciertas enzimas celulares durante el proceso de fijación?

A

Al inactivar ciertas enzimas celulares, se evita la autólisis y la degeneración post mortem de los tejidos