Histotechniek

Question 1

Chemische fixatie geeft een goede:

Answer 1

Morfologie

Question 2

Fysische fixatie geeft een goede:

Answer 2

Antigeniciteit

Question 3

Waardoor is de antigeniciteit lager bij een chemische fixatie?

Answer 3

Doordat de fixatie bindingen aan gaat met het weefsel waardoor antilichamen minder plek heeft om te kunnen binden sinds deze al bezet zijn

Question 4

Waarvoor gebruik je magnetron?

Answer 4

Om de epitopen op een weefsel weer herkenbaar te maken –> antigen retrieval

Question 5

PATOS…

Answer 5

versneld de fixatie proces doordat moleculen sneller bewegen

Question 6

Vries substitutie =

Answer 6

onder vacuum de water mantel verwijderen in e.g. aceton/alchohol, dit voorkomt krimping

Question 7

Kritisch punt =

Answer 7

het moment dat een vloeistof naar de gasfase springt

Question 8

Hoe krijg je maximale fixatie en morfologie voor EM?

Answer 8

Door te fixeren met osmium en glutaaraldehyde

Question 9

Osmolariteit =

Answer 9

Het aantal deeltjes in een buffer, als deze laag is krijg je een hypotome oplossing

Question 10

Hoe kun je osmolariteit verhogen?

Answer 10

Door sucrose (suiker) toe te voegen om het aantal deeltjes te verhogen

Question 11

Hoe kun je krimping voorkomen?

Answer 11

Door high-pressure freezing of door een additief toe te voegen e.g. Bouin

Question 12

Normaliteit =

Answer 12

gaat over de lading (H+)

Question 13

Molariteit =

Answer 13

Gewicht

Question 14

Welke fixatie gebruik je voor lipiden?

Answer 14

Fysische fixatie, want onder paraffine lost het op

Question 15

Waar wordt enzymhistochemie voor gebruikt?

Answer 15

Om aan te tonen of een eiwit een substraat kan knippen –> dus de enzymatische activiteit

Question 16

Hoe komt het dat moleculen migreren? hoe kun je dit voorkomen?

Answer 16

Deze migreren door diffusie, dit kan worden voorkomen door te fixeren met formaline

Question 17

Noem een catalysator:

Answer 17

Peroxidase H2O2

Question 18

Hoe kun je immuno methodes versterken?

Answer 18

Door ABC methode, goud-zilver en peroxidase anti-peroxidase (PAP)

Question 19

Wat moet je doen tussen oplossingen in tijdens immuno?

Answer 19

Enzymen e.g. pronase of gevoelige antigenen toevoegen want niet alle epitopen komen vrij tijdens antigen retrieval

Question 20

Absorptie =

Answer 20

Een bepaalde kleur zien omdat alle andere golflengtes worden geabsorbeerd

Question 21

Noem 4 lokalisatie patronen:

Answer 21

Nuclear, perinuclear, cytoplasmatisch en membraneus

Question 22

Affiniteit =

Answer 22

de mate van een binding

Question 23

Hoe krijg je een monoclonale antilichaam?

Answer 23

Door een hybrodoma

Question 24

Hoe krijg je een polyclonale antilichaam?

Answer 24

Uit het bloedplasma/serum

Question 25

Noem 3 labels

Answer 25

Naftol blauw/rood en NBT/BCIP, en radioactieve labels?

Question 26

Hoe voorkom je endogeen peroxidase?

Answer 26

Door H2O2 toe te voegen, zodat peroxidase niet meer bindt of apart incuberen en iets anders dan peroxidase gebruiken op het antlichaam

Question 27

Hoe krijg je excitatie?

Answer 27

Doordat een molecuul wordt bestraald en de elektronen de stralingsenergie overnemen, hierdoor komen de elektronen van de atomen in een aangeslagen toestand

Question 28

Hoe krijg je emissie?

Answer 28

Doordat die elektronen terugvallen naar hun grondtoestand, het teveel aan energie komt vrij door licht/warmte uit te zenden

Question 29

Elke eiwit heeft een…

Answer 29

watermantel, hoe groter, hoe dikker deze is

Question 30

Waar worden proteolytische enzymen ook voor gebruikt?

Answer 30

Voor antigen retrieval

Question 31

Antigen-dilution curve:

Answer 31

geeft je een idee van welke concentratie je het best kan gebruiken voor antigen

Question 32

DNA….. door fixatie

Answer 32

Fragmenteerd, hoe meer crosslinks, hoe meer fragmentatie waardoor frequenties niet meer te herkennen zijn

Question 33

FISH =

Answer 33

Een fluoroscent complementair RNA probe bindt aan een deel van de chromosoom die grote gelijkenis vertoont en hiermee zie je fluoroscentie in DNA van interesse

Question 34

Noem de 4 stappen van ISH:

Answer 34

Pre-hybridisatie, hier bindt alles behalve de probe
Hybridisatie, hier wordt de probe toegevoegd
Post-hybridisatie, alles wat ongebonden is wordt weggespoeld door stringent wassen
Immunologische kleuring met DIG label

Question 35

Wat zit er in ISH? (4)

Answer 35

EDTA, Denhardt’s solution, suiker en haringsperma

Question 36

Waar wordt DAPc voor gebruikt?

Answer 36

Om RNAse weg te spoelen, dit voorkomt contaminatie vanuit je handen

Question 37

Waarom worden antilichamem verdund en ingevroren?

Answer 37

Want elke keer als er iets wordt uitgevroren verlies je een deel van je probe dus verdeel je het in kleine hoeveelheden

Question 38

HER2=

Answer 38

belangrijk receptor bij borstkanker

Question 39

PCR=

Answer 39

het uitsmelten van het DNA om vervolgens te verdubbelen en dan weer uit te smelten zodat je fragmenten krijgt van het stuk DNA wat je wilt hebben

Question 40

EGFR=

Answer 40

endothelial growth factor receptor, bij overexpressie heb je veel proliferatie

Question 41

Resolutie van LM en SEM/TEM

Answer 41

LM: 1/10 micron, SEM: 1^-5 nm, TEM: 0.1 nm

Question 42

Alkalifosfatase kun je ontwikkelen met:

Answer 42

NBT/BCIP

Question 43

Waarom wil je bij sommige tumoren juist grote blokken weefsel hebben?

Answer 43

omdat tumoren heterogeniciteit tonen, dus niet alle cellen zijn hetzelfde

Question 44

Adhesive slides =

Answer 44

Slides met een lading of coating waardoor je geen achtergrond signaal krijgt

Question 45

Waarmee snijden we plastics?

Answer 45

Met glas of diamant

Question 46

Metacrilaten =

Answer 46

Meerdere plastics, deze zijn doorlaatbaar waardoor de antigeniciteit behaald kan worden

Question 47

Propyleen =

Answer 47

een intermediare stof tussen alcohol en plastic

Question 48

Raster zijn gemaakt van:

Answer 48

Geleidend materiaal e.g. koper, nikkel, goud etc.

Question 49

Waardoor krijg je contrast?

Answer 49

Doordat zouden binden aan plastic coupes

Question 50

Hoe krijg je compressie?

Answer 50

Wanneer je te snel snijdt, dit zorgt voor compressie omdat de coupes tegen elkaar drukken