Histologia do Cerebelo Flashcards
Constituição do Sistema Nervoso
Sistema Nervoso Periférico (SNP)
Sistema Nervoso Central (SNC)
- Nervos cranianos (12 pares)
- Nervos espinhais/raquidianos (31 pares) e gânglios associados
- Encéfalo
- Medula espinhal/Espinhal Medula
Regiões do Encéfalo
Anterior:
- Diencéfalo:
» Tálamo
» Hipotálamo
- Tranco Cerebral:
» Mesencéfalo
» Ponte ou protuberância
» Bulbo raquidiano
Posterior:
- Cérebro
- Corpo caloso
- Cerebelo
Anatomia do Cerebelo
- Lobo anterior
- Lobo posterior
- Vermis
- Folhas
- Hemisfério cerebeloso
- Matéria branca (arbor vitae)
- Matéria cinzenta
Funções do Cerebelo
- Coordenação musculaar
- Controlo da motricidade fina
- Controlo do tónus muscular
- Manutenção da postura e equilíbrio
- Aprendizagem motora
- Envolvimento nas emoções, processamento de estímulos tácteis, perceção espacial e linguagem
Cerebellar Comparator Function
(1) Action potencials from the motor cortex descend into the spinal cord to initiate voluntary movements
(2) At the same time, action potencials are carried from the motor cortex to the cerebellum to give the cerebellar neurons information representing the intended movement
(3) In addiction, action potencials from proprioceptive neurons ascend through the spinocerebellar tracts and simultaneously arrive at the cerebellum. Proprioceptive neurons innervate the joints and tendons of the structure being moved, such as the elbow or knee, and provide information about the position of the body or body parts. These action potencials give the cerebellar neurons information from the periphery about the actual movements
(4) The cerebellum compares the action potencials from the motor cortex with those from the moving structures. That is, it compares the intended movement with the actual movement
(5) If a difference is detected, the cerebellim sends action potencials to the motor cortex, via the thalamus, and to the spinal cord to correct the discrepancy
(6) The result is smooth, coordinated movements
Disfunção do Cerebelo
- Atraso no movimento
- Erros na amplitude dos movimentos
- Erros nos movimentos padronizados
- Ataxia
Ataxia
Grupo de doenças neurodegenerativas.
Origem
> Genética:
- Autossómica dominante (Ataxias espeinocerebelosas (SCAs))
- Autossómica recessiva (ex.: Ataxia de Friedreich; Ataxia-telangiectasia)
- Ligada ao X (ex.: Síndrome de tremor/ataxia associado ao X frágil)
- Mitocondrial
> Não-Genética (ex.: Degeneração cerebelosa paraneoplásica)
Ataxia — Manifestações Clínicas
- Vascular
- Inflamatória
- Traumática
- Metabólica
- Desenvolvimental
- Causado por toxinas ou drogas
- (Para)neoplásica
- Infeções
Ataxia Espinocerebelosa
- Cognitive impair
- Ocular dysmetria and slow saccades
- Muscle cramps
- Ataxia
- Bradykinesia and rigidity
- Dysarthria
- Dysphagia
Células do Sistema Nervoso
- Neurónios
- Células da Glia (Neuróglia)
> Astrócitos
> Microglia
> Oligodendrócitos - Células ependimárias
- Células estaminais neurais
Neurónios
Neurónio não-mielizado:
- Dendrite
- Corpo celular
- Cone de implantação
- Axónio
- Terminal axónico
Neurónio mielinizado
- Dendrite
- Corpo celular
- Cone de implantação
- Axónio
- Nódulo de Ranvier
- Bainha de mielina
- Terminal axónico
Histologia do Cerebelo
- Molecular layer
- Purkinje cell layer
- Granular layer
> Purkinje cells
Basket cell
Climbing fibre
Inferior olive
Pontine nuclei
Mossy fibre
Granule cell
Golgi cell
Parallel fibre
Stellate cell
Basic structure of the cerebellar cortex
There are two main afferents to the cerebellar cortex: climbing fibres, which make direct excitatory contact with the Purkinje cells, and mossy fibres, which terminate in the granular layer and make excitatory synaptic contacts mainly with granule cells, but also with Golgi cells. In some cases, the stem axons of climbing and mossy fibres also provide collaterals to the cerebellar nuclei en route to the cerebellar cortex. The ascending axons of the granule cells branch in a T-shaped manner to form the parallel fibres, which, in turn, make excitatory synaptic contacts with Purkinje cells and molecular layer interneurons — that is, stellate cells and basket cells. Typically, parallel fibres extend for several millimetres along the length of individual cerebellar folia. With the exception of the granule cells, all cerebellar cortical neurons, including the Purkinje cells, make inhibitory synaptic connections with their target neurons.
Cerebellum Histology
The cerebellar cortex contains five types of neurons organized into three layers. A vertical section of a single cerebellar folium illustrates the general organization of the cerebellar cortex. The detail of a cerebellar glomerulus in the granular layer is also shown. A glomerulus is the synaptic complex formed by the bulbous axon terminal of a mossy fiber and the dendrites of several Golgi and granule cells. Mitochondia are present in all of the structures in the glomerulus, consistent with their high metabolic activity
Planos Anatómicos e Termos descritivos
A. Rostral-causal and dorsal-ventral axes
B. Medial- lateral axis
C. Section planes
> Horizontal plane
> Coronal plane
> Sagital plane
Desenvolvimento do Encéfalo
(1) Early neural plate
(2) Neural folds form
(3) Neural crest cells form
(4) Neural tube forms
Desenvolvimento do Sistema Nervoso Central
(1) Early embryo
> Forebrain (prosencephalon)
> Midbrain (mesencephalon)
> Hindbrain (rhombencephalon)
(2) Late embryo
> Telencephalon
> Diencephalon
> Mesencephelon
> Metencephalon
> Myelencephalon
(3) Adult
> Cerebrum (from telencephalon)
> Diencephalon
> Cerebellum (from metencephalon)
> Brainstem
» Midbrain (mesencephalon)
» Pons (from metencephalon)
» Medulla oblongata (from myelencephalon)
> Spinal cord
Preparação do tecido do cerebelo de murganho
- Anestesia terminal dos murganhos
- Fixação dos tecidos por perfusão intracardíaca de paraformaldeído 4%
- Recolha do encéfalo e incubação com paraformaldeído 4%
- Incubação com sacarose 30%
- Preparação de cortes histoçógicos no crióstato
- Armazenamento das secções em PBS (phosphate buffer saline, tampão fosfato salino) com azida de sódio 0,05%
Coloração com Violeta de Cresilo
- Utilizado na chamada “Coloração de Nissl”
- Corante básico (“acidófilo”)
- Cora ácidos nucleicos de roxo/azul
> RNA: no retículo endoplasmático e nos ribossomas (substãncia/grânulos/corpos de Nissl)
> DNA: no núcleo
Coloração com Violeta de Cresilo — Passos
- Montagem das secções em lâminas cobertas com gelatina
- Secagem
- Passagem sequencial por soluções com concentração decrescente de álcool
- Coloração
- Passagem sequencial por soluções com concentração crescente de álcool
- Montagem das preparações com lamelas
Método de Golgi
- Permite visualizar neurónios individuais e observar as suas projeções
- Cora alguns neurónios mas não outros, aleatoriamente
- Sais de prata precipitados coram as células de castanho/preto
Método de Golgi — Passos
- Incubação com dicromato de potássio
- Secagem
- Incubação com nitrato de prata
- Formação de complexos de cromato de prata
- Desidratação com álcool
- Montagem das preparações com lâminas e lamelas
Imunomarcação
Marcação de antigénios com anticorpos, para pbservação microscópica
- Imunocitoquímica: maracção de células (culturas ou suspensões)
- Imunohistoquímica: marcação de tecidos
Procedimento Geral de Imunomarcação
- fixação das células ou tecidos — para tudo o que se passa nas células para impedir a degradação e a mudança de posição das moléculas existentes (utiliza-se normalmente paraformaldeído)
- permeabilização — tornar a membrana capaz da passagem de anticorpos (utiliza-se geralmente o composto Triton X-100)
- bloqueio dos locais inespecíficos de ligação — impedir que os anticorpos se liguem a locais além dos da proteína de interesse (mesmo objetivo que no Western blot)
- incubação com o anticorpo primário — reconhecer a proteína de interesse
- lavagem — retirar todo o anticorpo primário que não se ligou à proteína de interesse (utiliza-se PBS)
- incubação com o anticorpo secundário — mesma função que o anticorpo primário
- lavagem — retirar todo o anticorpo secundário que não se ligou à proteína de interesse
- montagem das preparações entre lâminas e lamelas
- observação ao microscópio
Com que objetivos se pode fazer este tipo de imunomarcações
- Determinar a distribuição subcelular de uma proteína
- Visualizar organelos e outros compartimentos e estruturas celulares
- Determinar a distribuição de uma proteína num tecido
- Visualizar populações particulares de células
Modificação de anticorpos — Conjugação com enzimas
Antigénio → Anticorpo conjugado a uma enzima fosfatase alcalina peroxidade de rábano → Ensaio enzimático produto corado ou luminescente
Modificação de anticorpos — Conjugação com Fluoróforos
Antigénio → Anticorpo conjugado a um fluoróforo → Deteção de fluorescência
Imunidade Inata — Características
- Resposta genérica
- Não há memória imunológica
- Presente em todos os organismos
Imunidade Adquirida — Características
- Resposta específica
- Exposição provoca memória imunológica e a maximização de respostas seguintes
- Presente apenas em vertebrados
Imunidade Inata — Componentes
- Barreiras físicas
- Barreiras químicas
- Resposta inflamatória
- Células: macrófagos e células natural killer (NK)
Imunidade Adquirida — Componentes
- Imunidade mediada por anticorpos (linfócitos B)
- Imunidade mediada por células (linfócitos T citotóxicos)
Anticorpos
(a) Inactivate the antigen: an antibody binds to an antigen and inactivates it
(b) Bind antigens together: antibodies bind several antigens together
(c) Activate the complement cascade: an antigen binds to an antibody. As a result, the antibody can activate complement proteins, which can produce inflammation, chemotaxis, and lysis
(d) Initiate the release of inflammatory chemicals: an antibody binds to a mast cell or a basophil. When an antigen binds to the antibody, it triggers the release of chemicals that cause inflammation
(e) Facilitate phagocytosis: an antibody binds to an antigen and then to a macrophage, which phagocytizes the antibody and antigen
Anticorpos — Componentes
- Local de ligação ao antigénio
- Cadeias pesadas
- Cadeias leves
