Grunnleggende teknikker i hematologi og mikroskopi Flashcards
Beskriv funksjonen til ulike linsesystemer i et vanlig mikroskop
Det finnes tre linsesystemer: kondensor, objektiv og okular
Kondensor
- Under preparatbordet, samler og sentrerer lyset på preparatet
Objektiv og okular
- Festet over preparatbordet, gir forstørret bilde av preparatet
Beskriv funksjonen til aperturblenderen i mikroskopet
Aperturblenderen tilhører linsesystemet kondensor. Betyr åpning. Regulerer bildets kontrast og avgjør mikroskopets evne til å gjengi fine detaljer (god oppløsningsevne). Ved å bruke aperturblende kan vi innstille en bestemt skråbelysning på preparatet. Lys som treffer på skrå gjennom preparatet gir flere detaljer enn lyset som treffer vinkelrett.
Tre virkninger:
- Bildet blir mørkere/lysere
- Åpen blender reduserer kontrast i bildet og oppløsningsevne blir bedre
- Lukket blender gir god kontrast og dårlig oppløsningsevne
Beregn hvor mye mikroskopbildet forstørres når objektivet og okularene er kjent
Eksempel:
x40 objektiv + x10 okular gir forstørrelse av preparatet på x100
Beskriv hva Numerisk aperture (NA) som er oppgitt på objektivene er et uttrykk for
NA er et mål på objektivets oppløsningsevne. Oppløsningsevne er relatert til den minste avstanden som linsesystemet kan skille 2 punkter. Jo større NA, desto bedre oppløsningsevne
Beskriv rengjøring av 100 x objektivet /”Oljelinsen” på mikroskopet.
Bruker heptan på bomullspinne for å fjerne olje, «tørker» med linsepapir
Beskriv hvordan kontrasten i et mikroskopbilde kan økes
Kontrasten i bilde kan økes ved å lukke aperturblender
Beskriv hva som menes med mikroskopets oppløsningsevne
Mikroskopets oppløsningsevne er det samme som NA. Det er relatert til den minste avstanden som linsesystemet kan skille 2 punkter.
Hvorfor benyttes Køhles prinsipp ved innstilling av mikroskop?
Vedlegg 10
Bruker prinsippet for at kondensorens og mikroskopets optiske akser skal falle sammen og eliminere unødig lys. Det gir best mulig oppløsningsevne.
Beskrive «motstandsprinsippet» /impedans på en celleteller og beskrive histogrammer over leukocytter, erytrocytter og trombocytter ved telling på Micros celleteller
Instrumentet fortynner EDTA-blod med isoton løsning som leder elektrisk strøm. Blodceller (fortynnet) suges enkeltvis gjennom en kalibrert mikro-apertur i en bestemt tid. Elektrode på innside og utside av aperturen med kontant elektrisk strøm som passerer mellom i en sluttet strømkrets. Ohms lov: U=RI. Celler leder strøm dårlig og vil skape motstand i kretsen når den passerer mikroaperturen. Øker motstand øker spenningen. Spenningsøkning er proporsjonal med cellens volum og registreres som en puls. Blodplater er minst og gir minst spenningsøkning, røde gir litt mer og leukocytter gir størst økning. Pulsens størrelse sier derfor hvilken type blodcelle vi har. Pulsene samles til cellestørrelsedistribusjonshistogrammer. Antall pulser mellom diskriminatorgrensene beregnes og instrumentet kompenserer for fortynning og gir resultatet ut i antall celler pr. liter fullblod. Resultatet overføres til skjerm og printer.
Beskriv hva som menes med RBC parameterne MCV og MCHC
MCV er forkortelse for mean corpuscular volume/mean cell volume og er det gjennomsnittlige cellevolumet av de røde blodcellene
MCHC er en forkortelse for mean corpuscular hemoglobin concentration, gjennomsnittskonsentrasjonen av hemoglobin i de røde blodcellene hos en person.
Beskriv hva Senkningsreaksjonen (SR) er
Tester hvor raskt erytrocytter synker (sedimenterer) i en blodsøyle. Avhenger av antall og størrelse på erytrocytter og nivået av plasmaproteiner
Normalt blod: erytrocytter frastøter hverandre pga negativ overflate. Ved sykdom kan plasmaproteiner øke -> påvirker negativ overflate -> tiltrekker hverandre og danner pengeruller. Spesielt proteinene fibrinogen og gammaglobuliner. -> erytrocytter synker raskere
SR øker ved mange inflammatoriske tilstander. Brukes som screening for ulike sykdomstilstander + for å følge opp sykdomsforløp
Beskriv hva PT-INR benyttes til
PT-INR benyttes til å kontrollere marevannbehandlingen til mennesker med økt tendens til trombedannelse, forskjellige hjertelidelser og mekanisk hjerteventil.
INR i rør tilsatt natriumcitrat (blått rør), fullblod fortynnes 9+1. Citrat binder Ca2+ i blodet og hindrer koagulasjon.
Marevan
- Warfarin i marevan hemmer vitamin K og gjør at koagulasjonen går saktere.
Beskriv hvilke komplikasjoner som kan oppstå dersom en pasient ved behandling med marevan har PT-INR utenfor terapeutisk området
Riktig dosering er viktig. For stor dose = blødningsfare, for liten dose = trombedannelse
Beskriv målemetoden som brukes til måling av PT-INR på Simple Simon
Analyseprinsipp protrombin -INR:
Reagens består av tørrstoff med tromboplastin (TF) og er tilsatt F5 og fibrinogen. Tørrstoff tilsettes rekonstitueringsvæske med Ca2+ før bruk, da får tørrstoffet kort holdbarhet. Test utføres ved at citratplasma/blod blandes med reagenset og starter kaskade av enzymatiske reaksjoner som ender med at fibrinogen omdannes til fibrin (klott i prøvekuvetten). Protrombintid (PT) måles – tiden fra plasma og reagens blandes til klott dannes.
INR er internasjonal normalisert ratio som gjør at alle labber må kalibrere etter Equalis kalibreringsprogram. INR er definert som: (PT(pasient)/PT(normal))^ISI.
ISI er mål på styrken på tromboplastinet i reagenset.
Beskriv det optimale området i et blodutstryk
Det optimale området for et blodutstryk er i det området cellene ligger mer eller mindre enkeltvis. Er man for langt ut på utstryket kan det være opphoping av monocytter, granulocytter og store, unormale celler. Er man for langt inn kan det være opphoping av lymfocytter
