Grunnleggende medisinsk laboratorieteknologi Flashcards
Hvordan utføre avfallsbehandling av giftig Drabkins reagens?
Prøver med Drabkins reagens helles av på egen avfallsflaske i avtrekkskap. Ha på hansker.
Hvilken reaksjon skjer i HemoCue hemoglobin fotometer?
Reagenset i kuvetten hemolyserer de røde blodcellene og hemoglobiner frigjøres. Skjer kjemisk reaksjon mellom hemoglobinet og reagensene natriumnitritt og natriumazid i kuvetten. Det dannes en farget forbindelse azidmethemoglobin. Fargeforandringen måles fotometrisk.
Hva er CRP og når analyserer man det?
CRP er akutt-fase protein, dannes i leverceller, binder seg til C-polysakkaridet i kapselen i pneumokokker. Høye verdier ved sykdommer som innebærer cellenekrose. Eks bakteriell infeksjon, akutt hjerteinfarkt, etter kirurgiske inngrep, noen kroniske infeksjoner, maligne sykdommer. CRP stiger rask ved sykdom og synker fort igjen når det er forbi.
Når ser man på CRP?
- Mistanke om bakteriell infeksjon
- Skille mellom bakteriell og virusinfeksjon
- Følge sykdomsaktivitet
- Påvisning av postoperative komplikasjoner
Hva er analyseprinsippet bak Affinion CRP?
- prøve fortynnes, blodceller ødelegges
- løsning gjennom membran med anti-CRP antistoff, CRP fester seg til membranen
- anti-CRP konjugat med gullpartikler tilsettes og gullpartikler fester seg til CRP på membranen og gir rødbrun farge.
- overskudd av gullpartikler vaskes bort.
- intensitet på farge måles fotometrisk, proposjonal med mengde CRP i prøven.
Forklar hensikten med kalibrator i et analyseoppsett
Kalibrator er en faktor vi bruker for å finne linearitet mellom absorbansen og konsentrasjonen til analytten vi ser på. Kalibrator har kjent konsentrasjon og vi finner absorbans for den aktuelle løsningen av kalibratoren slik at vi har tall å sammenligne absorbansmålingene for de påfølgende prøvene med. Vi benytter 2-punktskalibrering (kan bare brukes ved lineær sammenheng mellom absorbans og konsentrasjon). Kalibrator har kjent verdi av analytt og dens absorbans måles i analysen, da får vi ett punkt på grafen. Det andre punktet er absorbansavlesning av reagensblank (0,000). Trekker en rett linje mellom => kalibreringskurve.
Beers lov
Forklar hensikten med kvalitetskontroll i et analyseoppsett
En kontrollprøve analyserer vi og sammenligner verdien vi får med et referanseområde. Havner kontrollen innenfor gitt område kan vi stole på at resten av resultatene fra de påfølgende prøvene er troverdige.
Kontroll på reagenser, instrumenter, utstyr og analytiker som utfører testen. Resultatet gir grunnlag for godkjenning av resultater på pasientprøver. Kontrollmaterialet bør ha mest mulig lik biologisk sammensetning som pasientprøvene. Bør ha god holdbarhet og ikke utgjøre en smitterisiko. Kontrollen har en fasitverdi, og den analyserte kontrollen må komme innenfor et visst grenseområde satt ut ifra fasitverdien før resultatene på pasientprøvene kan blir godkjente.
Angi bølgelengdeområde som er synlig lys
400-750nm
Beskriv hvorfor reagensblank brukes ved avlesning i et spektrofotometer
Reagensblank brukes for å nullstille absorbansen. Reagensblank består av samme reagens som de andre rørene bare uten pasientprøve. Derfor kan vi se på forskjellen i absorbans mellom reagensblank og reagens+prøve når vi analyserer.
Beskriv rutiner for kvalitetssikring i et manuelt analyseoppsett
Ved å kvalitetssikre analyseoppsett lager vi rutiner som hindrer feil i analyseprosessen. Eksempel på god rutine:
- Sette opp reagensrør systematisk
- Merke alt av utstyr som brukes i analyseprosessen
- Blande prøvemateriale før det skal tilsettes
- Bruke et bestemt flyttesystem ved tilsetning av prøvemateriale og reagens
- Bruke kvalitetskontroller som følger analyseoppsettet på samme måte som prøvene
Hva er et kontrollkort og hva skal det brukes til?
Kontrollresultater føres inn i kontrollkort slik at vi får et visuelt bilde av kvalitetskontrollens verdier over tid.
Hva menes med prøvematerialets matrix?
Prøvematerialets matrix er det samme som prøvematerialets biologiske sammensetning.
Vurdering av analyseresultat
- Vurder kalibrator
a. %avvik innenfor CV – aksepteres
b. %avvik utenfor CV – analysen forkastes - Vurder kvalitetskontroll
a. %avvik innenfor CV – aksepteres. Kontrollens konsentrasjon beregnes ut fra middelverdien av absorbansene og sammenlignes med oppgitt grenseverdier (se kontrollkort).
b. %avvik utenfor CV – kontrollens konsentrasjon beregnes for hver enkelt absorbans på kontrollen og vurderes hver for seg, om noen er utenfor grenseverdier forkastes analyserekken - Vurder pasientprøver – hvis kalibrator + kontroll er ok
a. %avvik mellom parallellene mindre enn CV beregnes middelverdi som brukes i beregning av resultat på pasientprøven
b. %avvik større enn CV – forkastes prøver
Antall desimaler i resultatføring
Resultat pasientprøver : like mange desimaler som i referanseområdet for analytten som måles
%avvik mellom paralleller : like mange desimaler som CV for metoden
Proteiner i serum(plasme
Plasmaproteiner mellom blod og ekstracellulær væske via passiv diffusjon og aktiv transport. Opprettholder osmotisk trykk, transporterer hormoner, metaller og medikamenter.
Albumin 60% av proteinmengden
Bestemmelse av proteiner i serum brukes ved tilstander som kan gi endringer i plasmavolum eller endring i konsentrasjonen til en-flere spesfikke plasmaproteiner
Beskriv analyseprinsippet for totalprotein i serum med biuretmetoden.
Proteiner = aminosyrer med peptidbindinger
Biuret inneholder Cu2+. Na-K-tartrat holder Cu2+ i løsningen. NaOH i reagenser gjør miljøet alkalisk. Dannes kompleks mellom Cu2+ og -C=O og N-H i peptidbindingene. Trengs minst to peptidbindinger. Gir blåfiolett farge som er proposjonal med antall peptidbindinger og proteinkonsentrasjonen.
Lar stå i 30 min romtemp og 10 min i varmeskap. Måler absorbans ved 540nm
