GENSKI PRENOSI Flashcards
kako se ločijo vrste prenosa informacij
po načinu prenosa DNA
po vektorju
po tem ali so medcelični/znotrajcelični prenosi
ali gre za naravne oz umetne procese
kateri so naravni medcelični prenosi DNA
konjugacija
transdukcija
transformacija
transpozicija
je naraven znotrajcelični prenos
konjugativna transpozicija
je naraven znotrajcelični ali medcelični prenos
umetni genski prenos
molekulsko kloniranje
konjugacija
je prenos DNA, do katerega pride ob
neposrednem stiku dveh bakterijskih celic.
Vsa informacija, potrebna za konjugacijo je zapisana na konjugativnih plazmidih. Najbolje preučen konjugativni plazmid je plazmid F.
kako izvajamo konjugacijo v laboratoriju
v tekočem gojišču
z razmazom na plošči
z odtisom preko žameta
Oznake povezane s konjugacijo
F+ donorski sev
F− recipientski sev
Hfr sev z vključenim konjugativnim plazmidom v kromosom
F’ sev s konjugativnim plazmidom, ki ima tudi nekaj kromosomske informacije
Faze konjugacije pri bakterijah so:
- neposreden stik in zbliževanje
F+ in F- celice - mobilizacija prenosa,
- prenos enojne linearne molekule
DNA s 5’ koncem in hkratna sinteza v donorju in recipientu; - zaokrožitev in nastanek funkcionalnega plazmida
Uporabnost konjugacije:
- mapiranje približne lege genov na kromosomu
- prenos informacije iz seva v sev.
transdukcija
je prenos DNA iz ene bakterijske celice
v drugo bakterijsko celico s pomočjo bakteriofaga.
Dva tipa transdukcije
- stabilna transdukcija: prenesena DNA se v celici ohrani
- abortivna transdukcija: prenesena DNA se sčasoma izgubi
Faze transdukcije:
- vstop bakteriofaga v donorsko celico;
- izstop bakteriofaga z delom bakterijske DNA iz donorske celice;
- vnos DNA donorske celice v drugo, recipientsko celico.
Ločimo dve obliki transdukcije:
- splošno transdukcijo – prenos kateregakoli dela DNA;
- specializirano transdukcijo – prenos specifičnega dela DNA.
Uporabnost splošne transdukcije:
- mapiranje s fagi;
- priprava sevov z minimalnimi spremembami.
Uporabnost specializirane transdukcije:
- za prenos specifičnega dela DNA.
transformacija
je sprejem in vključitev proste DNA v celico.
kako se lahko prenesena DNA vključi
kot replikon, ki se sam podvaja (npr. plazmid)
z rekombinacijo se vključi v replikon, ki je že v celici
kateri obliki transformacije poznamo
naravna ali fiziološka - niso sposobni vsi sevi
umetna
faze transformacije
- vezava DNA na zunanjo membrano celice;
- prenos DNA preko celičnega ovoja;
- vključitev prenesene DNA v genom recipienta.
ali se razlikujeta transformacija G+ in G- bakterije in kako?
pri G- se pojavijo transformasomi - uvihki na membrani