Génome 4

Question 1

quelles sont les méthodes de séquençage d’une mutation ponctuelle?

Answer 1

• PCR
• hybridation
• Methode de Sanger

Question 2

quelles sont les méthodes de sequencage des macro-lésions?

Answer 2

tres longues donc:
- cytogénétique moléculaire
- cytogénétique classique

Question 3

quelles sont les 4 principales étapes de l’extraction des acides nucléiques?

Answer 3

1. lyse des cellules
2. dénaturation des protéines
3. inactivation des nucléases
4. purification des A.N.

Question 4

quelle est la technique de référence pour l’extraction de l’ADN?

Answer 4

la technique au phénol-chloroforme
entre la 2ème et la 4ème étape on a:
2. extraction par phénol chloroforme
3. précipitation alcoolique à ethanol/isopropanol
4. dissolution dans de l’H2O pour purifier

Question 5

les techniques alternatives d’extraction de l’ADN?

Answer 5

• kits automatisés
• automates
• FTA card

Question 6

quelle est la différence entre l’extraction d’ADN et d’ARN?

Answer 6

la dissolution (4) se fait au H2O RNAse-free

Question 7

comment savoir si l’ARN est de bonne qualité?

Answer 7

on l’analyse avec un bioanalyseur, et on cherche le ratio 18s/28s
on s’attend à ce que la quantité de 28s soit supérieure à 18s
puis on calcule le RIN, plus il est proche de 10 l’ARN est de meilleure qualité