genen

Question 1

wat is een restrictienenzym?

Answer 1

enzymen die het DNA op specifieke nucleotidesequentie splitsen

Question 2

Hoe wordt het eigen DNA van een bacterie beschermd tegen splitsing?

Answer 2

chemische modifictaie van specifieke sequenties (eigen DNA wordt gemethyleerd)

Question 3

Hoe werkt gel electroforese?

Answer 3

DNA fragmenten worden op basis van grote gescheiden. Kleine moleculen gaan sneller door de gel. Gaat van negatief naar positief. Bandjes zijn te zien onder UV licht.

Question 4

Hoe werkt voorbereiding voor klonering?

Answer 4

DNA fragmenten worde ingebracht in een vector > recombinant DNA. samenvoegen van de fragmenten wordt gedaan door DNA-ligase.

Question 5

Wat is een vector?

Answer 5

een vector is een cirkelvormig DNA molecuul (plasmide) en bevat zijn eigen replicatieoorsprong.

Question 6

Hoe werkt klonering in een vector?

Answer 6

Het gezuiverde plasmide-DNA wordt geopend door een restrictie enzym en het te kloneren DNA-fragment wordt gesplitst mbv DNA-ligase. Dit kan in een bacterie worden geplaatst en worden gekopieerd.

Question 7

Hoe werkt PCR?

Answer 7

Aan het begin van elke cyclus worden de twee strengen van de dubbelstrengs DNA-streng gescheiden en wordt met elk een unieke primer gehybridiseerd. Vervolgens laat men DNA-polymerase elke streng onafhankelijk repliceren. In volgende cycli dienen alle nieuw gesynthetiseerde DNA-moleculen die door de polymerase worden geproduceerd als sjablonen voor de volgende replicatieronde