Fixace Preparátu Flashcards

1
Q

Co studuje histologie?

A

Tkáně

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Základní typy tkání

A

Nervová, epitelová, svalová a pojivová

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Max rozlišovací schopnost světelného mikroskopu

A

1500x

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Typy mikroskopie (4)

A

Světelná (1500x, obarvené tkáně), fázová (neobarvené tkáně), fluorescenční (obarvené fluerescenčně), elektronová (dělí se transportní a skenovací)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Světelná mikroskopie (max. měřítko, co dělám s tkání)

A

Obarvená tkáň, 1500x, světelný mikroskop

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Fázová mikroskopie (princip, co dělám s tkaní, název mikroskopu)

A

Na neobarvenou tkáň je vysláno světlo. Při průchodu různými strukturami má různý index lomu a rychlost. Vznikají tmavé a světlé struktury.
Mikroskop s fázovým kontrastem

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Fluorescenční mikroskopie (co se dělá s tkání, název mikroskopu, technika barvení název)

A

Tkáň se obarví fluorescenčními barvami, Mikroskop s fluorescencí, imunohistochemie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Jak funguje sekundární imunohistochemie?

A

Vyrobím si primární protilátku, která se váže na protein, co chci. Pak sekundární protilátku, která se váže na tu primární a má na sobě fluorescenční barvičku

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Jak si vyrobím protilátky pro imunohistochemii?

A

Naočkuji myšku, která mi začne produkovat protilátky. Pak jí odeberu buňky ze sleziny, které je produkují. Ty spojím s tumorovýmu buňkami. Vznikne hybridní buňka, která se hodně dělí. Z ní odeberu protilátky.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Na co se dělí elektronová mikroskopie

A

Transmitní a skenovací

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Díky čemu dosáhnou elektronové mikroskopy většího zvětšení, než světelné?

A

Díky kratší vlnové délce paprsku elektronů

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Jak funguje TEM?

A

Proud elektronů je vyslán na velmi úzce nakrájený, vysušený preparát. Tento proud snadněji projde místy s málo elektrony (ztratí míň energie). A vytvoří tím světlé a tmavé části na ploše s chemikálií, která září bíle při kontaktu s elektrony.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

TEM

A

Transmitní elektronový mikroskop

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

SEM

A

Skenovací elektronový mikroskop

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Jaký elektronový mikroskop dělá 3D a jaký 2D obrázky?

A

3D - skenovací
2D - transmitní

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Jak funguje SEM?

A

Vzorek je pokryt ionty. Je na něj vyslán proud elektronů (tzv. primární). Ty uvolní (a nahradí) elektrony z iontů (tzv. sekundární). Sekundární elektrony jsou emitovány ven a zaznamenány detektorem.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

Nevýhoda TEM a SEM

A

Zničí vzorek, nelze pracovat se živímy

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

Cesta vzorku z těla pod mikroskop (jednotlivé kroky) (5)

A

Odebrání vzorku, fixaci vzorku, zalévání do bločků, krájení, barvení preparátu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

Odběr materiálu ze živého pacienta

A

Biopsie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

Odebrání a vyhodnocení vzorku v průběhu operace

A

Peroperační biopsie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
21
Q

Odběr materiálu z mrtvého

A

Nekropsie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
22
Q

Odebrání celého orgánu/léze

A

Extirpace

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
23
Q

Odebrání pouze kousku tkáně

A

Excize

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
24
Q

Jak velké vzorky odebírám pro světelnou a elektronovou mikroskopii

A

Světelná - 1 cm^3
Elektronová - 1 mm^3

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
25
Q

Nabodnutí části těla jehlou

A

Punkce

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
26
Q

Punkce

A

Nabodnutí části těla jehlou

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
27
Q

Typy punkce (3)

A

Punkční biopsie, aspirační biopsie, trepanobiopsie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
28
Q

Punkční biopsie

A

Nabodnutí tlustou jehlou, ve které zůstane váleček tkáně

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
29
Q

Aspirační biopsie

A

Napíchnutí tenkou jehlou, odsátí buněk na cytologické vyšetření

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
30
Q

Trepanobiopsie

A

Odběr kostní dřeně + kousek kosti jehlovitým nástrojem

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
31
Q

Otisk

A

Přiložení sklíčka k lézi, přichycení nějakých buněk

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
32
Q

Stěr

A

Volné setření buněk, gynekologie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
33
Q

Nástroj pro odběr vzorku endometria (děložní sliznice)

A

Kyretáž

34
Q

Endoskopický odběr

A

Odštípnutí části tkáně že špatně přístupných míst (střeva, močový měchýř…)

35
Q

Proč se vzorek fixuje?

A

Aby se nerozložil

36
Q

Typy rozkladu

A

Hniloba a autolýza

37
Q

Rozklad činností vlastních enzymů

A

Autolýza

38
Q

Rozklad činností cizími enzymy, bakteriemi, plísněmi

A

Hniloba

39
Q

Dělení fixačních prostředků

A

Fyzikální, chemické

40
Q

Na jakémpak principu fungují fyzikální fixační metody

A

Omezení tekutosti vody a denaturace bílkovin (enzymů)

41
Q

Typy fyzikálních fixačních metod (4)

A

Zmrazení, Lyofilizace, Mikrovlnné záření, Vysoká teplota

42
Q

Fixace zmrazením, podmínky, látky

A

Musí být rychlá (krystalky ledu by jinak poškodili membrány)
Suchý led, tekutý dusík

43
Q

Lyofilizace

A

Vysušení za nízké teploty, reverzibilní

44
Q

Na čem se zakládají chemické fixační prostředky

A

Chemické tekutiny, nebo jejich výpary => šetrná denaturace bílkovin

45
Q

Typy chemické fixace (2)

A

Perfúze, imerze

46
Q

Perfúze

A

Vstřik fixační tekutiny do krve zvířete (to umře)

47
Q

Imerze

A

Ponoření vzorku do fixačního roztoku

48
Q

Co je to FORMOL?

A

1 FORMOL = 40% roztok formaldehydu

49
Q

Kolika procentní roztok fomolu se používá k fixaci?

A

10% FORMOL (4% formaldehyd)

50
Q

Fixační tekutiny s formolem (2)

A

Bakerova tekutina, Bouiniova (bouénova) tekutina

51
Q

Bakerova tekutina

A

10% formol ve vodném roztoku s chloridem vápenatým (CaCl2), který zabraňuje rozpuštění lipidů

52
Q

Na co je vhodná Beckerova tekutina

A

Průkaz lipidů a enzymů vázaných na membrány

53
Q

Bouinova tekutina (bouénova) složení

A

25% formol ředěný kys. pikrovou (před použitím se přidává kys. octová)

54
Q

Na co je vhodná a nevhodná Bouinova tekutina

A

Vhodná - polysacharidy
Nevhodná - krevnaté orgány (sráží krev)

55
Q

Sublimát (chem. Složení)

A

Chlorid rtuťnatý

56
Q

Sublimát

A

Chlorid rtuťnatý

57
Q

Na co se používá sublimát, nevýhod a řešení

A

Jako základ fixačních tekutin, tvoří černé sraženiny, ty odstraníme jódováním, taky koroduje chirurgické nástroje

58
Q

SUSA (význam názvu + co tím fixuju)

A

Su = sublimát, Sa = salt, kosti, zuby, chrupavky

59
Q

Co je vhodné pro fixaci kostí, chrupavek a zubů?

A

SUSA

60
Q

Zenkerova tekutina (cca chem. Složení, pro co je vhodná)

A

Sublimát a další látky, krevnaté orgány

61
Q

Zalévání média rozpustná ve vodě (3)

A

Želatina, celodal, umělé pryskyřice

62
Q

Výhody a nevýhody zalévacích médií rozpustných ve vodě

A

V - Nemusím tkáň odvodňovat (nescvrkne se)
N- Obtížnější barvení

63
Q

Zalévací média nerozpustná ve vodě (4)

A

Parafín (nejčastější), celoidin, paraplast, umělé pryskyřice

64
Q

Postup zalévání do parafínu

A

Odvodnění vzorku (postupným nahrazením vody etanolem), projasnění (nahrazení ethanolu intermédiem), Odstranění intermédie (58°), Prosycení parafínem (80°), tvrzení

65
Q

Typy mikrotomů (kráječů)

A

Sáňkový, Rotační, Kryostat

66
Q

Sáňkový mikrotom (co se hýbe a co krájí)

A

Hýbe se ostří, krájí parafín, celoidin, celodal

67
Q

Rotační mikrotom

A

Pohybuje se tkáňového bloček, parafín

68
Q

Kryostat (kdy se používá, co krájí, teplota)

A

Preoperační biopsie, želatina (nízké teploty -20°)

69
Q

Biopsie, která odebírá kus kostní dřeně i s kouskem kosti

A

Trepanobiopsie

70
Q

Velikost erytrocytu

A

7,3 mikrometru

71
Q

Postup zalévání do parafínu

A

1) odvodnění vzestupnou alkoholovou řadou
2) Projasnění intermédiem, ve kterém se parafín rozpustí (benzen, xylen, toluen…)
3) Odstranění intermédia, prosycení parafínem 58°
4) zalití do zkvalitněného parafínu
5) tvrzení

72
Q

Zkvalitněný parafín

A

Přefiltrovaný za vysoké teploty a přidání 3-5% včelího vosku

73
Q

Název stroje na krájení preparátů

A

Mikrotom

74
Q

Sáňkový milrotom

A

Pohybuje se ostří

75
Q

Rotační mikrotom a jeho výhoda

A

Pohybuje se preparát (mohu dělat sériové krájení - více vrstev za sebou)

76
Q

Název zmrazivacího mikrofonu

A

Kryostat

77
Q

Kryostat (max. Teplota, využití)

A

Využívá se u Peroperační biopsie, teplota max. -20°

78
Q

Co udělám už s nakrájenými preparátem?

A

Napnu jej na vodní hladině (40°), nalepím na sklíčko a vysuším

79
Q

Čím lepím preparáty na sklíčko?

A

Směsí glycerinu a vaječného bílku 1:1

80
Q

Typy mikrotomů

A

Sáňkový, Rozační a Kryostat