Fixace Preparátu Flashcards
Co studuje histologie?
Tkáně
Základní typy tkání
Nervová, epitelová, svalová a pojivová
Max rozlišovací schopnost světelného mikroskopu
1500x
Typy mikroskopie (4)
Světelná (1500x, obarvené tkáně), fázová (neobarvené tkáně), fluorescenční (obarvené fluerescenčně), elektronová (dělí se transportní a skenovací)
Světelná mikroskopie (max. měřítko, co dělám s tkání)
Obarvená tkáň, 1500x, světelný mikroskop
Fázová mikroskopie (princip, co dělám s tkaní, název mikroskopu)
Na neobarvenou tkáň je vysláno světlo. Při průchodu různými strukturami má různý index lomu a rychlost. Vznikají tmavé a světlé struktury.
Mikroskop s fázovým kontrastem
Fluorescenční mikroskopie (co se dělá s tkání, název mikroskopu, technika barvení název)
Tkáň se obarví fluorescenčními barvami, Mikroskop s fluorescencí, imunohistochemie
Jak funguje sekundární imunohistochemie?
Vyrobím si primární protilátku, která se váže na protein, co chci. Pak sekundární protilátku, která se váže na tu primární a má na sobě fluorescenční barvičku
Jak si vyrobím protilátky pro imunohistochemii?
Naočkuji myšku, která mi začne produkovat protilátky. Pak jí odeberu buňky ze sleziny, které je produkují. Ty spojím s tumorovýmu buňkami. Vznikne hybridní buňka, která se hodně dělí. Z ní odeberu protilátky.
Na co se dělí elektronová mikroskopie
Transmitní a skenovací
Díky čemu dosáhnou elektronové mikroskopy většího zvětšení, než světelné?
Díky kratší vlnové délce paprsku elektronů
Jak funguje TEM?
Proud elektronů je vyslán na velmi úzce nakrájený, vysušený preparát. Tento proud snadněji projde místy s málo elektrony (ztratí míň energie). A vytvoří tím světlé a tmavé části na ploše s chemikálií, která září bíle při kontaktu s elektrony.
TEM
Transmitní elektronový mikroskop
SEM
Skenovací elektronový mikroskop
Jaký elektronový mikroskop dělá 3D a jaký 2D obrázky?
3D - skenovací
2D - transmitní
Jak funguje SEM?
Vzorek je pokryt ionty. Je na něj vyslán proud elektronů (tzv. primární). Ty uvolní (a nahradí) elektrony z iontů (tzv. sekundární). Sekundární elektrony jsou emitovány ven a zaznamenány detektorem.
Nevýhoda TEM a SEM
Zničí vzorek, nelze pracovat se živímy
Cesta vzorku z těla pod mikroskop (jednotlivé kroky) (5)
Odebrání vzorku, fixaci vzorku, zalévání do bločků, krájení, barvení preparátu
Odběr materiálu ze živého pacienta
Biopsie
Odebrání a vyhodnocení vzorku v průběhu operace
Peroperační biopsie
Odběr materiálu z mrtvého
Nekropsie
Odebrání celého orgánu/léze
Extirpace
Odebrání pouze kousku tkáně
Excize
Jak velké vzorky odebírám pro světelnou a elektronovou mikroskopii
Světelná - 1 cm^3
Elektronová - 1 mm^3
Nabodnutí části těla jehlou
Punkce
Punkce
Nabodnutí části těla jehlou
Typy punkce (3)
Punkční biopsie, aspirační biopsie, trepanobiopsie
Punkční biopsie
Nabodnutí tlustou jehlou, ve které zůstane váleček tkáně
Aspirační biopsie
Napíchnutí tenkou jehlou, odsátí buněk na cytologické vyšetření
Trepanobiopsie
Odběr kostní dřeně + kousek kosti jehlovitým nástrojem
Otisk
Přiložení sklíčka k lézi, přichycení nějakých buněk
Stěr
Volné setření buněk, gynekologie