Barvení Flashcards
Typy barvení dle času po odebrání vzorku
Vitální, Supravitální, Prosté (nevitální)
Vitální barvení
Obarvení živého organismu
Supravitální barvení
Obarvení tkáně hned po jejím oddělení
Prosté barvení
Obarvení tkáně po fixaci
Přirozená barviva (hlavně to jedno důležité)
Hemotoxylin, šafrán, karmín
Syntetická barviva
Eosin (derivát xantinu), fuchsin, Metylenová modř, Anilinová modř
Bazická barviva (příklad, struktury jakého typu barví a jejich příklady)
Hematoxilyn, Methylenová modř, Zásaditý fuchsin, barví bazofilní srtruktury = kyselé struktury, např. ribozomy, jaderný chromatin, chrupavky
Co jsou to bazofilní struktury?
Struktury, které se barví bazickými barvivy, sama jsou kyselé, např. Jaderný chromatin, ribosomy
Acidická barviva (příklady, jaké struktury barví)
Eosin, Kyselý Fuchsin, barví acidofilní struktury = zásadité struktury, např. Cytoplasma a kolagenní vlákna
Amorfní barviva
Umí se chovat jako kyselá i bazická barviva
Neutrofilní struktury
Struktury, které se barví jak kyselými, tak zásaditými barvivy
Typy barvení dle postupu
Progresivní, Regresivní, Sukcedánní, Simultánní, in toto
Progresivní barvení
Tkáň se postupně barví víc a víc, dokud nedosáhne chtěného obarvení. V průběhu kontroluji
Regresivní barvení
Tkáň se přebarví a přebytečné barvivo se vymyje vhodným roztokem
Sukcedánní barvení
Barví se nejprve jedním barvivem, poté dalším
Simultánní barvení
Barví se současně všemi barvivy
Barvení in toto
Barví se celá tkáň před krájením a zalitím
Nádoba na barvení
Kiveta
Typy barvení podle výsledku barvení
Ortochromatické, Metachromatické, Difúzní, Elektivní
Ortochromatické barvení
Složky tkáně získání stejnou barvu jako barvivo
(Modrým barvivem nabarvím něco modře)
Metachromatické barvení
Barvivem nabarvím část tkáně na jinou barvu, nežli má barvivo samo
(Modrým barvivem nabarvím něco na fialovo)
Difúzní barvení
Všechny složky tkáně jsou nabarveny stejnou barvou o stejné intenzitě
Elektivní barvení
Obarví pouze jednu složku tkáně
Princip barvící metody (jaké typy barviv dávám dohromady)
Jedno bazické + jedno, nebo více acidických
Nejčastější barvící metody (4)
Hematoxylin eosin (HE), Massonovy trichtomy, AZAN, Weigert van Gieson
Jakou barvu má obarvená tkáň po použití hematoxylinu eosinu?
“50 odstínů růžové”
Hematoxylin (co musím udělat, aby barvil)
Nažloutlý prášek ze stromu z Mexika, který se musí oxidovat na hematein. K tomu se přidávají tzv. mořidla = soli hliníku/soli železa
Např. Síran hlinatoamonný, síran železitoamonný
Postup barvení hematoxylinem eosinem (HE)
Rozpustím parafín xylenem, Poté se jej potřebuju zbavit: sestupná alkoholová řada (100%-> 0%), opláchnu ve vodě, Obarvení H pak E, Odvodnění vzestupnou alkoholovou řadou, 2x Xylenové lázně, Přilepení na sklo glycerinem/kanadský balzám/želatina
Proč vznikají artefakty?
Kvůli opakovanému scvrkávání a zvětšování preparátu při barvení. (Odvodňování)
Massonovy trichromy
Žlutý (HE + šafrán), modrý (po vyblednutí vypadá zeleně =>červené erytrocyty) , zelený (oranžové erytrocyty
AZAN (složení (3 látky)+ roztoky vhodné pro fixaci + jakou má barvu)
Azokarmín + Anilinová modř + oranž G
SUSA, Zenkerova tekutina
Výrazná modrá
Čím je specifický Weigert van Gieson
Má žlutou svalovinu
Jak barví struktury HE (jádra, cytoplasma, kolagen. vlákna, svalovina, erytrocyty)
Jádra- tmavě modrá, zbytek růžový, nejtmavší růžová = svalovina a erytrocyty
Jak barví struktury žlutý Massonův trichrom (jádra, cytoplasma, kolagen. vlákna, svalovina, erytrocyty
Jádra - tmavě modrá,
Světle růžová cytoplasma, tmavě svalovina s erytrocyty
Žlutá kolagenní vlákna
Jak barvil struktury modrý Massonův trichrom (jádra, cytoplasma, kolagen. vlákna, svalovina, erytrocyty
Jádra - hnědá
Cytoplasma- růžová
Kolag. Vlákna - modrá
Svalovina, erytrocyty - červená
Jak barvil struktury zelený Massonův trichrom (jádra, cytoplasma, kolagen. vlákna, svalovina, erytrocyty
Jádra - hnědá
Cytoplasma - růžová
Svalovina - červená
Kolag. Vlákna - zelená
Erytrocyty - oranžová
Jak barví struktury AZAN (jádra, cytoplasma, kolagen. vlákna, svalovina, erytrocyty
Jádro, cytoplasma, svaly, erytrocyty - růžové
Kolagenní vlákna - modrá
Jak barví struktury Weigert van Giesen (jádra, cytoplasma, kolagen. vlákna, svalovina, erytrocyty
Jádra - hnědá
Cytoplasma a svalovina, erytrocyty - žlutá
kolagenní vlákna - červená
Co jsou speciální barvící metody + příklad barviva a jeho barvy
Barvím s nimi pouze něco, co chci zvýraznit
Heidenheinův železitý hematoxylin (černo modrá barva)
Impregnační metody
Prosycení tkáně roztokem soli kovů (např. Stříbro, zlato, osmium)
