färgningsmetoder för mikroskopi

Question 1

Htx-Eosin

Answer 1

Htx-Eosin är den i särklass mest använda färgningsmetoden för histologiska preparat. Den består av två färger. Hematoxylin (Htx) är en basisk, positivt laddad färg som binder till sura föreningar som t.ex. nukleinsyror och färgar dessa blå. Eosin är ett surt, negativt laddat färgämne som reagerar med basiska föreningar och färgar dessa rosa-röda i olika nyanser

Question 2

Alcianblått

Answer 2

Alcianblått färgar mucin och mucinlika substanser blå. Den blå färgen kommer från en reaktion med koppar i färgen. Kärnor färgas rosaröda och cytoplasma färgas ljusrosa.

Question 3

Alunkarmin

Answer 3

Alunkarmin används i detta kompendium till preparat A80 för att synliggöra kärlen i njuren. Alun injiceras i kärlen varpå dessa får en blå färg vid fixering av vävnaden. Karmin används för att kontrastfärga vävnaden i rött.

Question 4

Bests karmin

Answer 4

Bests karmin färgar glykogen rött.

Question 5

Fuchsin

Answer 5

Fuchsin kallas också anilinrött. Det är en aminsalt som kan protoneras av en starkare syra och därmed kan fuchsin sägas vara en basisk färg. Saltet är grönt i fast form och rött i löst form. I detta kompendium används det till preparat 23 som är ett slipsnitt av kompakt ben.

Question 6

Gallfärgning (silverimpregnering)

Answer 6

Gallfärgning med silverimpregnering innebär att vävnaden först impregneras med ett silversalt som i detta fall binder till endotelet i gallkapillärerna. Sedan behandlas vävnaden med ljus som reducerar silvret och det färgas svart. Silverimpregnering används också i många andra typer av vävnader.

Question 7

Giemsa

Answer 7

Giemsa är en rutinfärgning för blodutstryk men kan också användas i andra sammanhang. Det är en kombination av eosin, en anjonisk färg, och azur, en blåfärgad katjonisk färg. Vissa blandningar
innehåller också metylenblått. Metylenblått är en basisk färg, eosin och azur är mer acidofila. Metoden färgar erytrocyter rosaröda och där trombocyter och leukocyter färgas blått.

Question 8

Guldklorid

Answer 8

Guldklorid är en annan impregneringsmetod som principiellt fungerar likt silverimpregnering. Metoden används framförallt vid färgning av nervvävnad som färgas svart.

Question 9

Htx

Answer 9

Hematoxylin kan också användas separat utan att kombineras med eosin. Den används för att färga kärnor och färgar negativt laddade ämnen i blått. Htx förekommer ofta i kombination med olika
metallsalter t.ex. FeCl3 för preparat 78, A12, A22, A59 och A63.

Question 10

Htx-Hansen

Answer 10

Htx-Hansen är en kombination av hematoxylin och ett järnsalt. Kärnor och andra basofila komponenter färgas svarta. Den kan också användas för att tydligare framhäva tvärstrimmighet i hjärt- och skelettmuskulatur.

Question 11

May-Grünwald-Giemsa

Answer 11

May-Grünwald-Giemsa är en kombination av två färgningsprotokoll. May-Grünwald består av metylenblått och eosin och med Giemsa erhålls även en azur komponent. Erytrocyter färgas röda, trombocyter och leukocyter färgas blå.

Question 12

Metylgrönt-pyronin

Answer 12

Metylgrönt-pyronin är en metod för att visuellt kunna särskilja DNA och RNA. Metylgrönt är en katjon som har hög affinitet för fosfatradikaler i DNA vilket färgas grön-blått. Pyronin är också en
katjon som färgar RNA rött.

Question 13

OsO4

Answer 13

Osmiumtetroxid binder till lipider och lipoproteiner som t.ex. myelin och färgar dessa svarta.

Question 14

PAS

Answer 14

PAS (’Periodic acid-Schiff’) är en metod för att färga polysackarider t.ex. glykogen. Perjodsyran bryter ned polysackariden till aldehyder som sedan reagerar med Schiff-lösningen och får en lilaröd färg. Ibland kan hematoxylin eller andra basiska färger användas som kontrastfärgning för att se kärnor.

Question 15

Silverimpregnering

Answer 15

Silverimpregnering innebär att vävnaden först impregneras med ett silversalt som binder eller lagras i någon struktur i vävnaden t.ex. endotelceller i kärl. Sedan bestrålas vävnaden med ljus som reducerar silvret och det färgas svart. Palmgren är ett exempel på en speciell silverfärgning som används för att färga perifera nerver svarta.

Question 16

Sudan

Answer 16

Sudanfärger är en klass av fettlösliga färgämnen som färgar lipider svarta eller röda. I detta kompendium (preparat A9) används en sudanfärg som färgar fettceller röda och hematoxylin används som en kontrastfärgning (’counterstain’) och färgar kärnor blåa.

Question 17

Toluidinblått

Answer 17

Toluidinblått är ett basiskt färgämne med hög affinitet för sura vävnadskomponenter. Nukleinsyror färgas blå och polysackarider färgas lila. Vävnader som färgas lila är bland annat brosk och
mastceller. Mucin färgas lila till rött och kärnor färgas blått.

Question 18

Trikromfärgning

Answer 18

Trikromfärgning innefattar ett stort antal olika metoder som består av tre färgämnen. De används ofta för att särskilja muskelvävnad, kollagen, fibrin och erytrocyter. Bland preparaten i kompendiet
förekommer många trikromfärgningar: Ladewig, Mallory, Mason, Azokarmin-Pacini, Azokarmin-Lichtgrün och Azan. Det förekommer en viss variation i färger och nyanser mellan de olika metoderna men generellt sett färgas kollagen och epitel blått, muskulatur och erytrocyter orange-röda och kärnor röda

Question 19

Van Gieson

Answer 19

Van Gieson är en färgningsmetod som används för att färga kollagen. Den består av pikrinsyra och sulfonerat anilinrött (’acid fuchsin’) och används vid lågt pH. Pikrinsyra är en mindre molekyl och penetrerar de flesta vävnader som då färgas gula. Sulfonerat anilinrött är större och mekanismen tros vara att den kan ersätta pikrinsyran i kollagenet som är mer luckert än andra vävnader. Kollagen färgas mörkt rött, kärnor färgas svarta och övrig bindväv och muskulatur
färgas gul.

Question 20

Weigerts elastinfärgning

Answer 20

Weigerts elastinfärgning är en metod som används för att specifikt färga elastiska fibrer blå-svarta