Fabios Ergänzungen

Question 1

Wie lauten die Schritte der zellulären Atmung und wie ist die allgemeine Gleichung?

Answer 1

1: Glykolyse
2: Bildung Acetyl–Coa
3: Zitronensäurezyklus
4: Elektronentransport und oxidative Phosphorylierung

Glukose + Sauerstoff ==> Kohlendioxid + Wasser + ATP

Question 2

Wovon hängen Proteinwaschungen ab?

Answer 2

• Größe des Proteins
• Menge des Proteins
• Säure-Base Eigenschaften
• Hydrophobizität
• Biologische Aktivität
• Stabilität

Question 3

Welche chromatographischen Trennverfahren gibt es?

Answer 3

• Ionenaustausch-Chromatogr.
• Gelfiltrations-Chromatogr.
• Affinitätschromatographie
• Reversed-Phase-Chromatogr.
• Hydrophobe Wechselwirkungschromatogr.

Question 4

Wie funktioniert Ionenaustauschchromatographie?

Answer 4

Proteine mit negativerer Ladung durchqueren die Trennsäule schneller

Question 5

Wie funktioniert die Gelfiltrations- Chromatographie?

Answer 5

Je Größer (Vorsicht) das Molekül desto schneller durchquert es die Säule!

Kleine Moleküle gehen in die Poren des Gels und brauchen deshalb länger

Question 6

Wie funktioniert Affinitätschromatographie?

Answer 6

In der Säule befinden sich bestimmte Liganden die nur an das interessante Protein binden, Nun läuft ein Proteingemisch durch die Säule und ungebundene Proteine laufen durch.
Nur die Größeren Bindenden Proteine laufen nicht schnell hindurch sondern Ers später wenn man mit Ligandenlösung nachspült

Question 7

Was sind Entkoppler und welche Rolle spielen sie in der Atmungskette?

Answer 7

membranlöslich: zerstören Protonengradienten
-> es kann kein ATP mehr gebildet werden

Bsp: Thermogenin (braunes Fettgewebe) / 2,4-Dinitrophenol DNP

Question 8

Wie ist das sichtbare Spektrum?

Answer 8

von 380nm (Violett) bis 780nm (Rot)

Question 9

Was sind Streuung, Beugung und Reflexion?

Answer 9

Streuung: Wechselwirkung von Licht mit kleineren Objekten

Beugung: Lichtwechselwirkung mit Hindernissen

Reflexion: Gleichgerichtete, kohärente Streuung

Question 10

Merksatz Reflexion ?

Answer 10

Einfallswinkel gleich Ausfallswinkel

Question 11

Wo liegt die Auflösungsgrenze des Auges?

Answer 11

200 μm / 0,2 mm

Tags bei ca. 50 Hz

Nachts bei ca. 10 Hz

Question 12

Unterschied Kohäsion und Adhäsion?

Answer 12

Adhäsion= Zusammenhalten von Atomen verschiedener Arten (Wassertropfen auf Blume)

Kohäsion= Zusammenhalten von Atomen der gleichen Art
(Bei Festkörpern am Stärksten)

Question 13

Wie lautet Mitchells Hypotese? (Chemiosmotische Hypothese)

Answer 13

Ohne Protonengradient keine ATP- Synthese

Question 14

Was ist der isoelektrische Punkt? (iP)

Answer 14

Nettoladung eines Proteins ist 0

Question 15

Anode und Kathode Facts?

Answer 15

Anode: Oxidation ( - )

Kathode: Reduktion (+)

Question 16

Besonderheit von Peptidbindung?

Answer 16

Nicht frei drehbar wegen partiellem Doppelbindungscharakter

Question 17

Prost-Translationale Modifikationen?

Answer 17

Phospholierung
Methylierung
Glycosylierung
Etc.

Question 18

Proteinfunktionen?

Answer 18

Rezeptoren
Enzym. Aktivität
Struktur
Speicherung
Transport

Question 19

Wie arbeitet die Protease?

Answer 19

Hydrolyse von Peptidbindungen

Question 20

Wo schneidet Trypsin?

Answer 20

Hinter basischen Aminosäuren

Lysin, Arginin (und modifiziertem Cystein)

Question 21

Was sind Detergenzien?

Answer 21

lagern sich an Proteine an, teilweise werden auch die Bindungen an den Proteinen gehalten

Question 22

Was muss man beachten bei der Extraktion von Metaboliten?

Answer 22

Alle Metabolite müssen extrahiert werden!!
Metabolit muss unverändert bleiben
Metabolite können sehr ähnlich sein (Masse)
Metabolite benötigen verschiedene Methoden, weil sie so komplex sind

Question 23

Was sind die Grundkomponenten für die Durchführung von Floureszenzmikroskopie?

Answer 23

Bildsensor/Kamera
Lichtquelle
Objektiv
Emissionsfilter
Anregungsfilter
Dichroider Spiegel

Question 24

Was ist ein dichroider Spiegel?

Answer 24

lässt eine Wellenlänge passieren und reflektiert eine andere

Question 25

5 Photophysikalische Parameter von fluoreszenten Proteinen

Answer 25

Absorptionsspektrum /Maximum
Emissionsspektrum /Maximum
Quantumeffizienz Q
Floureszenzlebenszeit tau
Anisotropie
Bleichverhalten / Photostabilität

Question 26

Womit färbt man Mitochondrien, Zellkern, Mikrotubuli?

Answer 26

Mitochondrien: Organellspezifischer Farbstoff (Fusionprotein mit GFP)
Zellkern: Histone mit RFP, BFP
Mikrotubuli: GFP

Question 27

Wie berechnet man die spezifische Aktivität eines Enzyms?

Answer 27

Aktivität / Gesamtprotein

Question 28

Wie sieht man, welche Aufreinigungsmethode die effektivste ist?

Answer 28

Der höchste Faktor von der spezifischen Aktivität des Enzyms von einem Aufreinigungsschritt zum nächsten

Question 29

Warum ist die Säurefällung eine ineffektive Aufreinigungsmethode?

Answer 29

die spezifische Aktivität sinkt, weil das Protein denaturiert

Question 30

Wie lässt sich die Reinheit eines Enzyms überprüfen?

Answer 30

Gelelektrophorese (SDS-Page) oder

Massenspektrometrie

Question 31

Wie berechnet man den Faktor der Aufreinigung?

Answer 31

Spezifische Aktivität am Ende / Spezi. Aktivität am Anfang

Question 32

Was wurde beim Bakteriorrhodopsin-Experiment gemacht und was konnte man damit zeigen?

Answer 32

künstliche Vesikel mit ATPase , ADP und Bakteriorrhodopsin (transportiert mit Lichtabsorbtion Protonen in die Vesikel)
ohne Licht: kein Protonengradient, keine ATP-Produktion
-> ATP-Produktion von Protonengradienten abhängig

Question 33

Wie sind Aminosäuren unterhalb/oberhalb ihres ioselektrischen Punkts geladen?

Answer 33

unterhalb: positiv
oberhalb: negativ

Question 34

Welcher Proteinkomplex der Atmungskette reduziert Sauerstoff und was ist der Elektronendonor?

Answer 34

Cytochrom-C-Oxidase mit Cytochrom-C

Question 35

Was ist das Prinzip der 2D-Gelektrophorese?

Answer 35

1. D: isoelektrische Fokussierung: pH-Gradient im Gel: Proteine wandern zu ihrem ioselektrischen Punkt
2. D: SDS-Page: Auftrennung nach Molekülgröße

Question 36

Was ist GFP?

Answer 36

grün fluoreszierende Protein aus der Qualle Aequorea victoria, das bei Anregung mit blauem oder ultraviolettem Licht grün fluoresziert

Möglichkeit, GFP mit beliebigen anderen Proteinen Gen-spezifisch zu fusionieren

Question 37

Was besagt die Jablonski-Theorie?

Answer 37

Bei Einstrahlung elektromagnetischer Wellen werden Elektronen durch Absorption der Energie des eingestrahlten Photons aus ihrem Grundzustand in energetisch höherliegende Zustände angeregt