Extração de ácidos nucleicos Flashcards

1
Q

Qual o objetivo da extraçã

A

Isolar material genético

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2
Q

Quais as etapas da extração

A

Lise da célula
Separação das fases (DNA/RNA/PROTEÍNAS)
Precipitação
Reidratação

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3
Q

Qual a função do buffer TEN?

A

equilibrar o pH

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4
Q

Qual a função da proteinase K?

A

desnaturar proteínas

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5
Q

Qual a função do SDS 10%?

A

é um sal com função de desnaturar moléculas (pontes de H+), ou seja, ele rompe a célula e libera o DNA

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6
Q

Qual a função do FENOL?

A

desnatura proteínas e RNA, além de separar a fase aquosa da orgânica, o DNA fica na fase aquosa e todo o resto na orgânica

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7
Q

Qual a função do clorofórmio / álcool / isoamílico?

A

ele se une ao fenol e também irá separar as fases

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8
Q

Qual a função do nacl?

A

torna o DNA insolúvel no álcool

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9
Q

Qual a função do etanol absoluto e do alcool 70%?

A

absoluto: forma o pallet e limpa a solução
70%: limpa o pallet

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10
Q

Como mensurar a qualidade do DNA/RNA extraído?

A

quantidade: através de eletrofotometria, fluorometria, eletroforese
qualidade: espectrofotometria

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