Extração de ácidos nucleicos Flashcards
Qual o objetivo da extraçã
Isolar material genético
Quais as etapas da extração
Lise da célula
Separação das fases (DNA/RNA/PROTEÍNAS)
Precipitação
Reidratação
Qual a função do buffer TEN?
equilibrar o pH
Qual a função da proteinase K?
desnaturar proteínas
Qual a função do SDS 10%?
é um sal com função de desnaturar moléculas (pontes de H+), ou seja, ele rompe a célula e libera o DNA
Qual a função do FENOL?
desnatura proteínas e RNA, além de separar a fase aquosa da orgânica, o DNA fica na fase aquosa e todo o resto na orgânica
Qual a função do clorofórmio / álcool / isoamílico?
ele se une ao fenol e também irá separar as fases
Qual a função do nacl?
torna o DNA insolúvel no álcool
Qual a função do etanol absoluto e do alcool 70%?
absoluto: forma o pallet e limpa a solução
70%: limpa o pallet
Como mensurar a qualidade do DNA/RNA extraído?
quantidade: através de eletrofotometria, fluorometria, eletroforese
qualidade: espectrofotometria