Exercice 1 à 5 Flashcards
Quelles sont les 3 principales tâches d’un microscope ?
- Produire une image agrandie d’un spécimen
- Résoudre les détails de l’image
- Rendre ces détails visibles aux yeux de l’observateur
À quoi serve l’oculaire, l’objectif, la résolution, l’ouverture numérique et l’éclairage de Köhler
Oculaire : Grossir l’image projetée par l’objectif
• Mesurer la dimension des cellules (avec un
réticule gradué et standardisé)
Objectif : • Recueillir la lumière émanant des différentes parties du spécimen à observer
• Construire une image réelle et agrandie
Ouverture numérique : • Responsable de la résolution de l’objectif
• Plus l’ouverture est élevée, plus la quantité de lumière qui entre dans l’objectif est élevée
Résolution: Capacité de chaque objectif à séparer deux points qui sont proches l’un de l’autre
Éclairage de Kölher : • Répartir de façon homogène la lumière sur la surface observée
• élimination des rayons marginaux/parasites et de la lumière diffuse
Qui suis-je ? - Gram négatif - psychrophile - produit une capsule autour de sa cellule - visible en contraste de phase lorsqu'elle est cultivée dans un milieu contenant du lait - forme de bâtonnet - non-motile 
Novosphingobium capsulatum
Décrivez les caractéristiques d’une bactéries à Gram positif.
- retient le colorant primaire (cristal violet)
- Grande quantité de peptido
Décrivez les caractéristiques d’une bactéries à Gram négatif.
- colorant primaire est chassé et remplacé par la safranine
- quantité de peptido plus petite
Pourquoi fixe-t-on le frottis lors de la coloration de Gram ?
Pour rendre la membrane des bactéries plus perméable aux colorants, pour fixer leurs structures et pour les faire adhérer à la lame.
Sur quel principe repose le test du KOH ?
La paroi cellulaire des bactéries à Gram négatif se brise facilement dans une solution alcaline entraînant la libération de leur ADN et la formation de filaments visqueux.
Pourquoi observer les microorganismes en contraste de phase?
- Observation de m-o vivants afin de déterminer leurs morphologies et caractéristiques
- Volume et dimension réels
- Observation des structures internes (spores) ou externes (capsule) et certaines caractéristiques (motilité), etc
Qui suis-je ? • Coque Gram-positif • Tétrades • Aérobie • Peau, sol, eau • Colonies jaunes
Micrococcus luteus
Qui suis-je ? • Gram négatif • Photosynthétique • Forme spirale • Motile • 30-35 ̊C • Ubiquitaires, lacs, sol
Rhodospirillum rubrum
Qui suis-je ? • Gram-positif • Température optimale: 30 - 40 ̊C • Sol, spore, endotoxine (cristal) • Insecticide microbien
Bacillus thuringiensis
Qui suis-je ? • Famille des Enterobacteriaceae • Colonie rouges (prodigiosine) • G-, non-motile • Ubiquitaires: Sols, plantes, eaux, aliments • Conséquences historiques
Serratia plymuthica
Qui suis-je ? • Gram-négatif • Flore intestinale des mammifères • indicateur de la pollution fécale • Rarement pathogène • Diversité des sérotypes (+700 sérotypes)
Escherichia coli
Qu’est-ce que l’agar ?
Polysaccharide complexe isolé d’une algue rouge. L’agar fond à 100C et se solidifie entre 43-44C. Pour dissoudre l’agar, le milieu doit être chauffé à ébullition et être conserver dans un bain à 50-55*C.
- Ne permet pas la croissance des thermophiles extrêmes.
Décrivez ce type de milieu de culture : Liquides ou bouillons de culture
ces milieux permettent une croissance abondante et sont idéaux pour les pré-cultures.
• diffusion rapide des produits du métabolisme
Décrivez ce type de milieu de culture : solides ou géloses
milieux de culture solidifiés en ajoutant habituellement 1,5% d’agar. Les milieux solides sont utilisés pour isoler une colonie ou compter des colonies isolées
• motilité réduite (figé localement)
• concentration des produits du métabolisme
Décrivez ce type de milieu de culture : Semi-solides ou géloses molles
ces milieux sont des bouillons nutritifs auxquels on ajoute une plus faible quantité d’agar (0,75%). Ces milieux sont utilisés pour vérifier la motilité des bactéries ou pour énumérer des bactériophages
Décrivez ce type de milieu de culture : Synthétiques
Ces milieux contiennent uniquement des substances pures et chimiquement définies et en quantités déterminées.
Décrivez ce type de milieu de culture : Semi-synthétiques ou complexes
ces milieux contiennent des éléments chimiquement définis additionnés d’un ou d’éléments de nature mal définis comme par exemple des extraits de levure ou des peptones.
Décrivez ce type de milieu de culture : Électifs ou d’enrichissement
Ces milieux permettent un développement abondant de certains microbes présents dans un milieu naturel. Pour obtenir un milieu électif, on incorpore simplement les substances nutritives minimales nécessaire à la croissance de la bactérie à l’étude.
- Toujours liquide
Décrivez ce type de milieu de culture : Sélectifs
ces milieux sont habituellement solides et permettent un développement abondant de certains microbes présents dans un milieu naturel; les autres membres de la flore microbienne du milieu ne se développent que lentement ou très peu. Pour obtenir un milieu sélectif, on incorpore en plus des substances nutritives, des composés inhibant la croissance de certaines espèces. Ex : MSA
Décrivez ce type de milieu de culture : identification ou différentiels
Ces milieux servent à mettre en évidence une ou plusieurs propriétés caractéristiques d’une espèce. Ces milieux permettent la croissance de plusieurs espèces mais font ressortir les différences entre les espèces, ce qui nous permet de les identifier. Ex : gélose sang.
Quel est ce type de milieu ? K2HPO4 KH2PO4 MgSO4.7H2O (NH4)2SO4 Glucose
Milieu synthétique
Quel est ce type de milieu ? K2HPO4 KH2PO4 MgSO4.7H2O (NH4)2SO4 Glucose Extrait de levure
Milieu semi-synthétique
Quel est ce type de milieu ?
• Tryptone 10 g
• Extrait de levure 5 g
Milieu complexe
Quel est ce milieu ?
isoler des bactéries lactiques (produisent acide lactique à partir du glucose) à partir d’un échantillon de fromage fait avec du lait cru
- Tryptone (0,5%)
- Extrait de levure (1,0%)
- Glucose (2,0%)
- Non tamponné: BL résistantes à l’acide
Milieux d’enrichissement
Quel est ce milieu ?
on veut isoler du sol des microorganismes résistants à la pénicilline
• On prépare un milieu et on y ajoute de la pénicilline
• On y étale des dilutions de sol
• Seuls les microorganismes résistants à la pénicilline vont pouvoir se développer
Milieu sélectif
Complétez : Une gélose sang est un milieu______.
Milieu d’identification
Qu’est-ce que la valeur D ?
- Temps requis pour réduire une population microbienne de 1 log pour une température donnée
- Détermine D par expérimentation pour chaque souche/espèce bactérienne et pour chaque température
Qui suis-je ?
• Pathogène du cheval (gourme)
• G+; 0,6 à 1,0 μm de diamètre
• Assemblée par 2, en courtes ou en longues chaînes
• Responsable d’infections chez le cheval
• β-hémolytique
Streptococcus equi
Qui suis-je ? • Gram-positif • Coque, non motile, EPS • Fermentaire • Pionnière de la bouche à la naissance • Jusqu’à récemment faisait partie du groupe de risque 2
Streptococcus salivarius