Étude du PA Flashcards
Comment vérifier que nous avons bien un canal unique?
Dépolariser la membrane à plusieurs reprises.
Si le courant enregistré (PA) est toujours de même amplitude on a un canal.
Si le courant enregistré varie en amplitude de 2-3x on a 2-3 canaux il faut recommencer.
Quelles sont les 3 configurations possibles du patch clamp? Les nommer et les expliquer.
Inside out: on arrache le canal, il se forme un vésicule qui s’ouvre au contact de l’air.
L’intérieur du canal est donc exposé au milieu extracellulaire, hors de la pipette. Forme un “n”
Outside out: l’extérieur du canal est exposé au milieu extracellulaire et l’intérieur est dans la pipette. Forme un “U”
Cellule entière: l’extérieur du canal est dans la pipette et l’intérieur dans la cellule. Le canal n’est pas arraché.
En inside out, quel est le courant enregistré en voltage imposé de: - 70mV - 49mV - 51mV - 20mV \+ 20mV \+ 50 mV \+ 70mV
- 49mV: infralaminaire
- 51mV: courant entrant fort
- 20mV: courant entrant moins fort
+ 20mV: courant entrant moins fort
+ 50 mV: rien
+ 70mV: courant sortant
À quoi ressemble le graph de probabilité d’ouverture d’un canal en fonction du potentiel imposé (Na=K)?
- valeur toujours positive
- forme de S
- 1% au potentiel seuil = minimum pour activer les canaux
- potentiel seuil négatif (en X)
- valeur maximale de 0,8 environ (pt 25;0,8) donc jamais 100% de probabilité d’ouverture.
Résumez les propriétés du canal Na.
- activé par une dépolarisation
- valeur seuil nécessaire à son ouverture
- pas de délais d’ouverture
- 3 états: O, i, F
- sélectif seulement aux Na
- sa probabilité d’ouverture dépend du potentiel de membrane
- il est bloqué par la TTX
De combien de sous unités est composé le canal Na+? Quel sont leurs nom et leur longueur en aa?
α: 2000aa
β1: 200aa
β2: 200aa
Quelle est la structure de la sous unité alpha du canal Na?
Quel est le rôle des sections importantes?
Il est composé de 4 domaines transmembranaires chacuns composés de 6 hélices alpha(#).
Les hélices #5 et #6 forment le centre du canal.
Les 4 boucles entre les hélices #5 et #6 sont dans le canal
Les hélices #4 sont celles sensibles au voltage
La boucle entre les domaines 3 et 4 est responsable de l’inactivation des canaux.
Quel est le courant enregistré en patch clamp d’un canal K si on impose une dépolarisation?
Délais de 5ms puis
Un courant sortant constant, continue
Comment expliquer que Einv des canaux à potassium = -80mV?
Le canal K est sélectif au potassium seulement donc Einv=Ek
À quoi ressemble la courbe de courant k en fonction du potentiel de membrane imposé?
Courant toujours sortant et de plus en plus fort (droite)
La courbe commence à -50mV (en X) car sous cette valeur le canal est inactif
Si on prolonge la droite vers la gauche on tombe sur -80mV
Résumez les propriétés du canal k.
- activé par une dépolarisation
- valeur seuil de -50mV
- délais d’ouverture
- deux états: O, F
- sélectif aux ions K
- probabilité d’ouverture dépend du potentiel de membrane
- probabilité d’ouverture dépend du temps
- bloqué par le TEA
Quelle est la structure du canal à potassium?
4 sous-unités α transmembranaires
4 sous-unités β cytoplasmiques
Quelle est la structure des sous unités α?
Quel est le rôle des sections importantes?
Un domaine est composé de 6 hélices alpha
Les hélices #5 et #6 de chaque domaine forment le milieu du canal.
Les 4 boucles entre les hélices #5 et #6 sont dans le canal, mais ont une forme différente des canaux à sodium ce qui donne sa sélectivité au canal K.
L’hélice #4 est responsable de la sensibilité au voltage
Quel est le coup énergétique de la propagation du Pa?
Il est nul car propagé de proches en proches, l’activation d’un canal active le suivant.
Quel est le but de la technique du patch clamp?
Isoler un canal unique dans une pipette pour étudier son fonctionnement
On peut alors imposer un potentiel à ce canal seul
Nommez 2 moyens d’accélérer la propagation du PA dans une axone.
Agrandir le diamètre de l’axone
Myéliniser l’axone
Quelles sont les caractéristiques importantes liés à la myélinisation d’une axone?
Quelle est la modification de vitesse de propagation du PA?
Les canaux Na sont concentrés aux noeuds de ranvier pour créer un inversement de potentiel assez puissant pour activer les canaux du prochain noeud.
Propagation saltatoire du PA.
Sa vitesse passe de 1m/s à 120m/s
Quelle est la différence entre un courant capacitif et un courant résistif?
Capacitif: mouvement d’ions de part et d’autre de la membrane causé par les charges qui se repoussent. Aucun ion me traverse.
Résistif: quand un ion traverse la membrane via un canal
Comment se calcule la constante de temps?
Elle correspond au délai nécessaire à la membrane pour retrouver son potentiel de repos après un excitation.
On sais ainsi si le courant est seulement capacitif ou aussi résistif.
Que représente la pente de la courbe de variation du voltage de la membrane en fonction du courant injecté?
La résistance
Laquelle entre la constante de temps ou d’espace est la plus forte dans l’axone?
Espace!
