Enzym- og proteindiagnostikk Flashcards

1
Q

Hva mener man med plasma?

A

Ved sentrifugering av blod får tre ulike sjikt:
- Plasma
- “Buffy coat”
- Erytrocytter

Plasma består av:
- 90% vann
- 6-8% plasmaproteiner
- 1% elektrolytter
- Næringsstoffer; glukose, aminosyrer
- Hormoner; kortisol, tyroksin
- Avfallstoffer; urea, kreatinin
- Blodgasser; O2, CO2

Proteinkonsentrasjon i plasma; 60-80 g/L

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Hva er definisjonen av plasmaproteiner?

A

Proteiner som har sin funksjon i det ekstracellulære rom og som har en molekylmasse over ca. 45 kDa

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hvilke funksjoner har plasmaproteinene?

A

Opprettholde det kolloidosmotiske trykket

Transportør for lavmolekylære substanser:
- Toksiner
- Vitaminer
- Hormoner
- Sporelementer
- osv.

Koagulsjon; omdanning av fibrinogen til fibrin

Inngår i kroppens forsvarssystem:
- Proteasehemmere
- Immunoglobuliner

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvordan bestemmes plasmaproteinenes konsentrasjon?

A

Bestemmes av:
1. Syntesehastigheten
2. Fordelingen mellom det intravaskulære og det ekstravaskulære rommet
3. Nedbrytning/eliminasjon

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hvordan endrer konsentrasjonen ved kroppsposisjon?

A

Konsentrasjonen i plasma øker!

Større effekt ses hos:
- Pasienter med høyt BT
- Pasienter med lav konsentrasjon av plasmaproteiner
- Eldre i forhold til yngre

Store individuelle forskjeller:
- Viktig med lik prøvetaking hver gang hos samme pasient for å kunne sammenligne resulateter

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hvordan vil fordelingen av plasmaproteinene se ut ved elektroforese?

A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hva mener man med “Akuttfase-reaksjon”?
Hva gjør dette med plasma?

A

“Akuttfase-reaksjon”:
- Endringer i plasmaet proteinsmønster i forbindelse med vevsskade og inflammasjon

“Akuttfase-protein”:
- Proteiene som øker i konsentrasjon ved akutt fase”

“Negative akuttfase-protein”:
- Proteiner som faller i konsentrasjon ved akutt fase

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hvilke hormoner har effekt på plasmaproteiner?

A
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Hvilke transportproteiner kan man f.eks. finne i plasma?
Hva transporterer de?

A

Albumin:
- Kalsium
- Kobber
- Sink
- Medikamenter

Retinolbindende protein:
- Vitamin A

Ceruloplasmin:
- Kobber

Haptocorrin:
- Kobalamin

Orosomucoid:
- Medikamenter

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Hvilken egenskap har albumin?

A

Proteinet med høyest konsentrasjon i plasma

Ikke livsviktig (analbuminemi)

Opprettholder kollioidosomotisk trykk

Over 50% av albumin finnes i det ekstravaskulære rom

Produseres av hepatocytter

Hovedsakelig regulert av kolloidosmotisk trykk og sekundært av proteininntak

Betydelig resirkulering

Halveringstid 15-20 dager

Negativt “akuttfase-protein”

Viktig transportprotein:
- Kalsium
- Bilirubin
- Medikamenter

Aminokilde for vevene

Øker ved dehydrering

Reduseres ved inflammasjon, proteintap og nedsatt produksjonskapasitet, malnutrisjon (underernæring)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Hvilke årsaker kan ligge til grunne for lav albumin?
Hvilke indikasjoner er det for å måle P-albumin?

A

Årsaker

  1. Proteintap:
    - Proteintapende enteropatier
    - Brannskader
    - Glomerulær skade, lekker ut i urin
  2. Alvorlig leversvikt:
    - Faller sent i forløpet pga. lang halveringtid og stor reservekapasitet
  3. Alvorlig underernæring

Indikasjon

Mistanke om proteintap

Kontroll av ernæringsstatus

Vurdere leverfunksjon

Tilleggsundersøkelse ved vurdering av albuminbundne komponenter:
- Kalsium
- Medikamenter

Ødem av ukjent årsak

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Hva er 𝛼1-antitrypsin?
Ved hvilke indikasjoner tar man prøver for dette?

A

Hemmer av flere proteaser:
- Viktigste er nøytrofil elastase
- Mangel fører til nedbrytning av elastiske fibre i lungevevet
- Polymerisering av proteinet fører til retensjon i leverceller og skade av cellene

Genetisk betinget mangel er en viktig årsak til emfysem og leversykdom

Finnes over 100 ulike mutasjoner
- Gentest finnes for de viktigste isoformene

Indikasjon for test:
- Tidlig utvikling av lungeemfysen/kronisk obstruktiv lungesykdom (30-40 årene)
- Neonatal hepatitt og juvenil cirrhose
- Leversykdom uten kjent årsak hos voksne
- Dersom 𝛼1-antitrypsin i plasma er under nedre referansegrense, bør tilstanden utredes videre med genotyping => obs! akuttfase, østrogen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Hva er haptoglobin?
Når er det indikasjon for å teste dette?

A

Binder fritt hemoglobin (haptein = å binde)

Komplekset elimineres raskt av monocytter og makrofager

Halveringstid:
- Haptoglobin; 3-4 dager
- Haptoglobin/hemoglobinkomplekset; 10-30 min.

Faller raskt ved intravasal hemolyse

Øker ved akuttfasereaksjon

Reduseres ved østrogenpåvirkning

Redusert syntese ved leversykdom

Indikasjon:
- Mistanke om hemolyse!
- Diff. diagnostikk ved anemi og ikterus
- OBS!: Tolkning ved samtidig akuttfasereaksjon (gir økte verdier), leversykdom eller østrogenpåvirkning (lave verdier)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Hva er ceruloplasmin?
Ved hvilken indikasjon tester man dette?

A

Kobberholdig protein

Hovedfunksjon er oksidasjon av Fe2+ til Fe3+

Inneholder 95% av kroppens kobber

Gjenspeiler kobbernivå fordi:
- Lav ceruloplasmin <=> lav s-kobber
- Apoceruloplasmin kortere T 1/2 enn holoceruloplasmin

Wilson sykdom:
- Lav s-Cp, lav s-Cu, høy u-Cu
- Får ikke koblet Cu til Cp i lever
- Skadelig avleiring av kobber i kroppen

Menke´s sykdom (X-bundet arv):
- Lav s-Cp, lav s-Cu, lav u-Cu
- Får ikke tatt opp Cu i tarmen
- Dødelig dersom ubehandlet

Indikasjon:
- Mistanke om forstyrrelser i kobberstoffskiftet;
- Wilson
- Menke

Tolkning:
- Øker ved akuttfasereaksjoner og leversykdom
- Øker ved østrogenpåvirkning
- OBS; ved utredning av tilstander hvor man forventer lave verdier

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Hva er transferrin?

A

Produseres hovedsakelig i lever

Transport av jern

Faller ved akuttfasereaksjon

Øker ved jernmangel og østrogen

Inneholder karbohydrat (5.5%):
- Karbohydratfattig transferrin (CDT) brukes som alkoholmarkør

Indikasjon for måling:
- Vurdering av jernstatus => TIBC, transferringmetning

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Ved hvilke tilstander tar man S-elektroforese?

A

Mistanke om:
- Myelomatose
- Waldenstrøms makroglobinemi
- Annen sykdom assosiert med M-komponent
- Kontroll av slike pasienter

Utredning av høy SR

17
Q

Hvilke prøver må rekvireres ved mistanke om myelomatose?

A

Rekvirere serum sammen med urin protein elektroforese og/eller s-lette kjeder
- Kan finne Bence Jones i urinprøve

18
Q

Kan man finne frie lette kjeder i serum?

A

Ja:
- Kappa og lamda

Kan kvantiteres

Øker før man kan påvise lette kjeder i urinen:
- Bence Jones proteinuria

Kappa/lamda ratio kan brukes i diagnostikk av lymfoproliferative tilstander:
- Myelomatose
- AL-amyeloidose

19
Q

Hvordan er det med proteinutskillese i urinen?

A

Proteiner < 40 kDa passerer normalt filteret i glomeruli. > 60 kDa holdes tilbake
- Reabsorberes normalt i tubulscellene

Ved glomerulær skade:
- Glomerulær proteinuri; albumin og transferrin
- “Plasmalikt” ved stor skade

Tubulær skade:
- Småmolekylære proteiner i alfasonen (elektroforese)
- Redusert reabsorbsjon av proteiner som finnes normalt

Elektroforese av urin ved mistanke om “Bence Jones proteinuri” => frie lette imunnoglobuliner i urin

20
Q

Hvilke hovedmål har man innenfor enzymanalyser i klinisk kjemi?

A
  1. Organdiagnostikk; finne hvilket målorgan eller organsystem som er sykt
  2. Å gi inntrykk av sykdommens omfang eller grad
  3. Å følge utviklingen av en sykdom

Utvalgt for å gi diagnostiske opplysninger
- Ikke nødvendigvis nøkkelenzymer i metabolismen

21
Q

Hvor kan man lokalisere enzymer?

A

Intracellulært i cytosol, mitokondrier, ER, membranbundet

Finnes stort sett i alle kroppens celler
- Katalyserer generelle intracellulære reaksjoner

Mengden varierer sterkt fra organ til organ
- Organ kan ha sitt spesifikke enzymmønster
- Enzymene har ulik organsspesifisitet

22
Q

Hva indikerer at enzymene finnes i plasma?

A

Økning av intracellulære enzymer i plasma skyldes:
- Iskemi; muskel, lever osv.
- Mekanisk skade; kontusjon, brannskade
- Toksisk skade; lever
- Inflammasjon

23
Q

Hvordan analyser man enzymene i prøver?

A

Massekonsentrasjonene er ofte for liten i plasma til at den kan måles direkte

Benytter enzymets katalytiske funksjon og måler enzymaktivitet

Enhet er ofte U/L:
- 1 U er den enzymaktiviteten som omdanner et 𝜇mol substrat per minutt

Ikke nødvendigvis sammenlignbare mellom laboratorier

24
Q

Hvordan er utslippsmønsteret til enzymer?

A

Enzymer i cytosol slippes først ut og i størst grad ved akutt cellesskade:
- F.eks. ALAT

Utslipp av mitokondrielle enzymer starter senere (delay) og utslipp er oftest lavere:
- F.eks. ASAT

Økning i mitokondrielle enzymer taler derfor for en mer uttalt skade

Fraktes via lymfen eller passerer kapillærene (delay)

25
Q

Hva er isoenzymer?

A

Enzymer med felles katalytisk funksjo0n, men moderate strukturelle forskjeller

Sammensetningen av ulike isoenzymer kan være forskjellig i ulike organ, f.eks.:
- Laktat dehydrogenase; 5 forskjellige isoenzymer
- ALP; lever, skjelett, placenta

26
Q

Hva er problemet med makroenzymer?

A

Kan gi tolkningstrøbbel!

F.eks.:
- Type 1; Enzymet binder seg til autologe antistoffer, oftest IgG/IgA
- Type 2; Selvpolymerisering eller bindes til fremmede substander (medikamenter)
- Konsekvens av dette; forlenget halveringstid

Kan gjøre at man måler forhøyet aktivitet i plasma, uten noen aktuell patologi
- Mulig forklaring på tilfeldig oppdaget forhøyede verdier; Amylase, CK, GT

27
Q

Hva kan årsaker være til økt enzymaktivitet i plasma?

A

Celleskade:
- Utsvømming av celleenzymer til ekstracellulærvæske

Økt produksjon i uendret cellepopulasjon:
- Alkalisk fosfatase (ALP) ved gallegangsokklusjon
- GT ved bruk av barbiturater
- Økt LD-aktivitet ved visse kreftformer; økt LD-aktivitet per gram i forhold til friskt vev

Økt antall enzymproduserende celler

Redusert eliminasjon:
- Eks. amylase ved nyresvikt
- Mulig ALP og GT ved gallegangsokklusjon

28
Q

Hvordan er forholdet mellom ALAT/ASAT?

A
29
Q

Ved hvilke tilstander kan ASAT/ALAT stige?

A

Akutt leverskade stigning x 500:
- Iskemisk
- Toksisk
- Traumatisk

Stigning x 20:
- Akutte virale hepatitter
- Medikamentindusert skade

Stingin 3-4x:
- Kronisk hepatitt
- Cirrhose
- Fedme eller alkohol (oftest)

Moderat økning ved gallestuvning
- Oftest normal ved cholecystitt

Lett økning av ASAT ved primære muskelsykdommer:
- Muskeldystrofier
- Dermatomyositt

30
Q

I hvilke tilfeller er ALAT høyere enn ASAT og vica versa?

A

ALAT > ASAT:
- Vanligvis ved akutt leverskade
- Kronisk leversykdom uten uttalt leverfibrose

ALAT < ASAT
- Lervercirrhose uansett årsak
- Alkoholrelatert leversykdom
- Wilsons sykdom

31
Q

Hva er LD?
Hva kan det brukes til?

A

Laktat dehydrogenase (LD)

Finnes i de fleste av kroppens celler

Katalyserer reaksjonen mellom laktat og pyruvat i cellene

Maks plasmaaktivitet ca. 2-3 døgn etter akutt celleskade
- Stigningen er ofte proporsjonal med størrelsen av skaden

Brukes ved:
- Anemidiagnostikk
- Leukemidiagnostikk
- Kreft; tumormarkør

5 ulike isoenzymer; ulik halveringstid

OBS! Hemolyse ved prøvetaking

32
Q

Hva er ALP?
Hva brukes det til?

A

Alkaliske fosfataser (ALP)

Finnes i knokler, lever/galleganger, tynntarm, nyre, placenta:
- Isoenzymer

Lever/galleveissykdom:
- Gallestuvning

Skjelettsykdom og beinvekst:
- Økt osteoblastaktivitet
- Øker ikke ved aldersosteoporose

Økning i siste trimester av svangerskapet

33
Q

Hva er CK?
Hva brukes det til?

A

Kreatininkinase (CK)

Finnes i skjelettmuskulatur, hjerne og hjerte

Dimer, tre forskjellige isoenzymer:
- CK-MM
- CK-BB
- CK-MB

Økt aktivitet ved:
- Muskulære lidelser
- Myskeldystrofi; Duchenne
- Øker også ved asymptomaptisk bærertilstand
- Akutt muskelskade; Rhabdomyolyse
- Endokrin myopati; hypotyreose

CK-MB tidligere brukt i diagnostikk av hjerteinfarkt:
- CK-MB kan måle i massekonsentrasjon; hjerteinfarkt

34
Q

Hva er 𝛾-GT?

A

𝛾-Glutamyl-transpeptidase (𝛾-GT)

Relativt leverspesifikt:
- Finnes og i nyre og pankreas

Membranbundet glykoproteinenzym

Øker ved gallestase

Induksjon ved antiepileptika

Indikasjon:
- Mistanke om kolestatisk leversykdom
- Diff. diagnostikk ved økt s-ALP
- Vurder leverpåvirkning ved overvekt og DM

“Gin and tonic”:
- Alkoholmarkør
- Ca. 52% av alkoholavhengige har økte verider
- Øker selv om det ikke er alkoholisk leverskade (induksjon)

35
Q

Hva er amylase?
Hva brukes det til?

A

Spalter polysakkarider til disakkarider

Pankreasamylase:
- Relativt pankreasspesifikt

Spyttamylase:
- Spyttkjertler
- Lunger
- Testis
- Ovarier og eggledere

Normalt 50/50 av hvert isoenzym i plasma

Fjernes hovedsakelig via nyrene pga. lav molekylvekt

Økte verdier ved:
- Betennelse i pankreas og spyttkjertler
- Redusert nyrefunksjon

Makroamylasemi:
- Danner kompleks med annet plasmaprotein; 1% av befolkningen
- Måle amylaseaktivitet i urin for diff. diagnose

36
Q

Hva er lipase?
Hva brukes det til?

A

Hydrolyserer triglyserider til monoglyserider, glyserol og fettsyrer

Øker ved akutt pankreatitt

Filtreres i glomeruli og reabsorberes i tubuli:
- Normalt skal ikke lipase påvises i urin

Holder seg høy lengre enn amylase

Gir omtrent samme diagnostiske info som amylase