Enzym- og proteindiagnostikk Flashcards
Hva mener man med plasma?
Ved sentrifugering av blod får tre ulike sjikt:
- Plasma
- “Buffy coat”
- Erytrocytter
Plasma består av:
- 90% vann
- 6-8% plasmaproteiner
- 1% elektrolytter- Næringsstoffer; glukose, aminosyrer- Hormoner; kortisol, tyroksin- Avfallstoffer; urea, kreatinin- Blodgasser; O2, CO2
Proteinkonsentrasjon i plasma; 60-80 g/L
Hva er definisjonen av plasmaproteiner?
Proteiner som har sin funksjon i det ekstracellulære rom og som har en molekylmasse over ca. 45 kDa
Hvilke funksjoner har plasmaproteinene?
Opprettholde det kolloidosmotiske trykket
Transportør for lavmolekylære substanser:
- Toksiner
- Vitaminer
- Hormoner
- Sporelementer
- osv.
Koagulsjon; omdanning av fibrinogen til fibrin
Inngår i kroppens forsvarssystem:
- Proteasehemmere
- Immunoglobuliner
Hvordan bestemmes plasmaproteinenes konsentrasjon?
Bestemmes av:
1. Syntesehastigheten
2. Fordelingen mellom det intravaskulære og det ekstravaskulære rommet
3. Nedbrytning/eliminasjon
Hvordan endrer konsentrasjonen ved kroppsposisjon?
Konsentrasjonen i plasma øker!
Større effekt ses hos:
- Pasienter med høyt BT
- Pasienter med lav konsentrasjon av plasmaproteiner
- Eldre i forhold til yngre
Store individuelle forskjeller:
- Viktig med lik prøvetaking hver gang hos samme pasient for å kunne sammenligne resulateter
Hvordan vil fordelingen av plasmaproteinene se ut ved elektroforese?
Hva mener man med “Akuttfase-reaksjon”?
Hva gjør dette med plasma?
“Akuttfase-reaksjon”:
- Endringer i plasmaet proteinsmønster i forbindelse med vevsskade og inflammasjon
“Akuttfase-protein”:
- Proteiene som øker i konsentrasjon ved akutt fase”
“Negative akuttfase-protein”:
- Proteiner som faller i konsentrasjon ved akutt fase
Hvilke hormoner har effekt på plasmaproteiner?
Hvilke transportproteiner kan man f.eks. finne i plasma?
Hva transporterer de?
Albumin:
- Kalsium
- Kobber
- Sink
- Medikamenter
Retinolbindende protein:
- Vitamin A
Ceruloplasmin:
- Kobber
Haptocorrin:
- Kobalamin
Orosomucoid:
- Medikamenter
Hvilken egenskap har albumin?
Proteinet med høyest konsentrasjon i plasma
Ikke livsviktig (analbuminemi)
Opprettholder kollioidosomotisk trykk
Over 50% av albumin finnes i det ekstravaskulære rom
Produseres av hepatocytter
Hovedsakelig regulert av kolloidosmotisk trykk og sekundært av proteininntak
Betydelig resirkulering
Halveringstid 15-20 dager
Negativt “akuttfase-protein”
Viktig transportprotein:
- Kalsium
- Bilirubin
- Medikamenter
Aminokilde for vevene
Øker ved dehydrering
Reduseres ved inflammasjon, proteintap og nedsatt produksjonskapasitet, malnutrisjon (underernæring)
Hvilke årsaker kan ligge til grunne for lav albumin?
Hvilke indikasjoner er det for å måle P-albumin?
Årsaker
- Proteintap:
- Proteintapende enteropatier
- Brannskader
- Glomerulær skade, lekker ut i urin - Alvorlig leversvikt:
- Faller sent i forløpet pga. lang halveringtid og stor reservekapasitet - Alvorlig underernæring
Indikasjon
Mistanke om proteintap
Kontroll av ernæringsstatus
Vurdere leverfunksjon
Tilleggsundersøkelse ved vurdering av albuminbundne komponenter:
- Kalsium
- Medikamenter
Ødem av ukjent årsak
Hva er 𝛼1-antitrypsin?
Ved hvilke indikasjoner tar man prøver for dette?
Hemmer av flere proteaser:
- Viktigste er nøytrofil elastase
- Mangel fører til nedbrytning av elastiske fibre i lungevevet
- Polymerisering av proteinet fører til retensjon i leverceller og skade av cellene
Genetisk betinget mangel er en viktig årsak til emfysem og leversykdom
Finnes over 100 ulike mutasjoner
- Gentest finnes for de viktigste isoformene
Indikasjon for test:
- Tidlig utvikling av lungeemfysen/kronisk obstruktiv lungesykdom (30-40 årene)
- Neonatal hepatitt og juvenil cirrhose
- Leversykdom uten kjent årsak hos voksne
- Dersom 𝛼1-antitrypsin i plasma er under nedre referansegrense, bør tilstanden utredes videre med genotyping => obs! akuttfase, østrogen
Hva er haptoglobin?
Når er det indikasjon for å teste dette?
Binder fritt hemoglobin (haptein = å binde)
Komplekset elimineres raskt av monocytter og makrofager
Halveringstid:
- Haptoglobin; 3-4 dager
- Haptoglobin/hemoglobinkomplekset; 10-30 min.
Faller raskt ved intravasal hemolyse
Øker ved akuttfasereaksjon
Reduseres ved østrogenpåvirkning
Redusert syntese ved leversykdom
Indikasjon:
- Mistanke om hemolyse!
- Diff. diagnostikk ved anemi og ikterus
- OBS!: Tolkning ved samtidig akuttfasereaksjon (gir økte verdier), leversykdom eller østrogenpåvirkning (lave verdier)
Hva er ceruloplasmin?
Ved hvilken indikasjon tester man dette?
Kobberholdig protein
Hovedfunksjon er oksidasjon av Fe2+ til Fe3+
Inneholder 95% av kroppens kobber
Gjenspeiler kobbernivå fordi:
- Lav ceruloplasmin <=> lav s-kobber
- Apoceruloplasmin kortere T 1/2 enn holoceruloplasmin
Wilson sykdom:
- Lav s-Cp, lav s-Cu, høy u-Cu
- Får ikke koblet Cu til Cp i lever
- Skadelig avleiring av kobber i kroppen
Menke´s sykdom (X-bundet arv):
- Lav s-Cp, lav s-Cu, lav u-Cu
- Får ikke tatt opp Cu i tarmen
- Dødelig dersom ubehandlet
Indikasjon:
- Mistanke om forstyrrelser i kobberstoffskiftet;- Wilson- Menke
Tolkning:
- Øker ved akuttfasereaksjoner og leversykdom
- Øker ved østrogenpåvirkning
- OBS; ved utredning av tilstander hvor man forventer lave verdier
Hva er transferrin?
Produseres hovedsakelig i lever
Transport av jern
Faller ved akuttfasereaksjon
Øker ved jernmangel og østrogen
Inneholder karbohydrat (5.5%):
- Karbohydratfattig transferrin (CDT) brukes som alkoholmarkør
Indikasjon for måling:
- Vurdering av jernstatus => TIBC, transferringmetning
Ved hvilke tilstander tar man S-elektroforese?
Mistanke om:
- Myelomatose
- Waldenstrøms makroglobinemi
- Annen sykdom assosiert med M-komponent
- Kontroll av slike pasienter
Utredning av høy SR
Hvilke prøver må rekvireres ved mistanke om myelomatose?
Rekvirere serum sammen med urin protein elektroforese og/eller s-lette kjeder
- Kan finne Bence Jones i urinprøve
Kan man finne frie lette kjeder i serum?
Ja:
- Kappa og lamda
Kan kvantiteres
Øker før man kan påvise lette kjeder i urinen:
- Bence Jones proteinuria
Kappa/lamda ratio kan brukes i diagnostikk av lymfoproliferative tilstander:
- Myelomatose
- AL-amyeloidose
Hvordan er det med proteinutskillese i urinen?
Proteiner < 40 kDa passerer normalt filteret i glomeruli. > 60 kDa holdes tilbake
- Reabsorberes normalt i tubulscellene
Ved glomerulær skade:
- Glomerulær proteinuri; albumin og transferrin
- “Plasmalikt” ved stor skade
Tubulær skade:
- Småmolekylære proteiner i alfasonen (elektroforese)
- Redusert reabsorbsjon av proteiner som finnes normalt
Elektroforese av urin ved mistanke om “Bence Jones proteinuri” => frie lette imunnoglobuliner i urin
Hvilke hovedmål har man innenfor enzymanalyser i klinisk kjemi?
- Organdiagnostikk; finne hvilket målorgan eller organsystem som er sykt
- Å gi inntrykk av sykdommens omfang eller grad
- Å følge utviklingen av en sykdom
Utvalgt for å gi diagnostiske opplysninger
- Ikke nødvendigvis nøkkelenzymer i metabolismen
Hvor kan man lokalisere enzymer?
Intracellulært i cytosol, mitokondrier, ER, membranbundet
Finnes stort sett i alle kroppens celler
- Katalyserer generelle intracellulære reaksjoner
Mengden varierer sterkt fra organ til organ
- Organ kan ha sitt spesifikke enzymmønster
- Enzymene har ulik organsspesifisitet
Hva indikerer at enzymene finnes i plasma?
Økning av intracellulære enzymer i plasma skyldes:
- Iskemi; muskel, lever osv.
- Mekanisk skade; kontusjon, brannskade
- Toksisk skade; lever
- Inflammasjon
Hvordan analyser man enzymene i prøver?
Massekonsentrasjonene er ofte for liten i plasma til at den kan måles direkte
Benytter enzymets katalytiske funksjon og måler enzymaktivitet
Enhet er ofte U/L:
- 1 U er den enzymaktiviteten som omdanner et 𝜇mol substrat per minutt
Ikke nødvendigvis sammenlignbare mellom laboratorier
Hvordan er utslippsmønsteret til enzymer?
Enzymer i cytosol slippes først ut og i størst grad ved akutt cellesskade:
- F.eks. ALAT
Utslipp av mitokondrielle enzymer starter senere (delay) og utslipp er oftest lavere:
- F.eks. ASAT
Økning i mitokondrielle enzymer taler derfor for en mer uttalt skade
Fraktes via lymfen eller passerer kapillærene (delay)
