ELISA - Substratos Cromogênicos Flashcards
Substratos Cromogênicos - Função
Sob ação enzimática → originam produtos coloridos solúveis ou insolúveis medidos por densidade óptica em espectrofotômetro.
Cromógenos - Enzimas 2
Peroxidase
Fosfatase Alcalina
Peroxidase - Substrato
H2O2
Fosfatase Alcalina - Substrato
P-Nitrofosfato (NPP)
Cromógenos - Peroxidase
H2O2 (substrato) + OPD (ortofenilenodiamina) ou ABTS (ácido 5-amino salicílico) (cromógenos)
Tabela - Enzima / Substrato / Cromógeno / Cor
Peroxidase → ? → ? → ?
Fosfatase Alcalina → ? → ? → ?
Tabela - Enzima / Substrato / Cromógeno / Cor
Peroxidase → H2O2 → Tetrametilbenzidina / Diaminobenzidina → Laranja / Azul /Marrom / Violeta
Fosfatase Alcalina → P-Nitrofosfato (NPP) → Nitrobluetetrazólio → Amarelo / Lilás
Tabela → não precisa saber nome dos cromógenos
Tabela → não precisa saber nome dos cromógenos
Produto Final Corado - Como surge? (2 Definições)
Ação da enzima → converte substrato incolor em produto colorido
Substrato alterado pela enzima → induz mudança de cor de uma substância indicadora
Produto Final Corado - Medição (SLIDE)
Quantidade de Ag ou Ac do produto final corado → através de leitura em fotocolorímetro.