Elektroforese Flashcards
Hvilken betydning har ladning/masse-ratio for separasjon av makromolekyler på gel?
Større molekyler vil møte mer motstand dersom porene i gelen er små.
Hvilken påvirkning har pH for amfolytters vandring under elektroforese?
pH påvirker molekylenes totalladning.
Hvilken påvirkning har molekylstørrelse for amfolytters vandring under elektroforese?
Jo større molekylene er i forhold til porene, jo mer motstand vil molekylene møte, og de vil bevege seg kortere.
Hvilken påvirkning har det elektriske feltet for amfolytters vandring under elektroforese?
Spenningsstyrken vil påvirke hvor fort molekylene beveger seg på gelen. Jo sterkere spenning, jo fortere vil molekylene trekke mot polene.
Hvilken påvirkning har temperatur for amfolytters vandring under elektroforese?
Temperaturen vil gjøre at molekylene vil bevege seg fortere.
Hvilken påvirkning har bufferens egenskaper for amfolytters vandring under elektroforese?
Bufferens oppgave er å opprettholde pH, og dermed også molekylenes totalladning. Det er i tillegg ionene i bufferen som “bærer” strømmen, og ionestyrke og konsentrasjon vil derfor bestemme migrasjonsrate og oppløsning.
Hvordan visualiseres separerte makromolekyler i gel?
De separerte molekylene fikseres, farges og avfarges.
Hva er isoelektrisk fokusering?
Man bruker en pH gradient til å skille proteiner med ulikt isoelektrisk punkt. Proteinene vil plassere seg ved pH som er mest lik deres isoelektriske punkt, og man vil dermed kunne skille de ulike proteinene fra hverandre.
Hva er western blot?
Blotting ved bruk av protein + antistoff.
Hva er kapillærelektroforese?
Elektroforese gjennom et kapillær-rør fylt med buffer eller polymer. Molekylene går gjennom kapillæren fra anode til katode.
Hva er forskjellen på denaturert og “native” elektroforese?
“Native” = naturlige proteiner, ikke denaturerte. Når proteinene er denaturerte har de en annen struktur enn når de er naturlige.
