DNA recombinante Flashcards

1
Q

Aplicación de bases biotecnológicas
para producir productos que
pueden usarse para diagnóstico,
prevención y tratamiento.

A

biotecnología

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Q

subdisciplina de la biotecnología que se centra en la manipulación genética de un organismo para modificar sus características.

A

Ingeniería genética

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3
Q

Etapas de la ing. genética (ej. insulina)

  1. Identificar gen de insulina y cortarlo con
    enzimas de restricción
  2. Tomar un plásmido (de una bacteria) y cortarlo con enzimas de restricción
  3. Unir ambos con ligasa: DNA recombinante
  4. Meter el DNA recombinado en una célula huésped, que tendrá la info del gen de la insulina, la va a generar y va a proliferar
A

Lectura

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4
Q

Secuencias de DNA derivadas de más de una fuente

A

DNA recombiante

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5
Q

molécula de DNA que tiene dos secuecias de DNA de dos especies diferentes

A

DNA recombiante

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6
Q

Mecanismo de defensa natural de las bacterias frente a la entrada de ADN foráneo

A

enzimas de restricción

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7
Q

Las enzimas de restricción hacen dos cosas con el DNA:

A
  • degradan DNA extraño
  • no el ADN propio
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8
Q

Hay 2 enzimas de restricción:

A

a) endonucleasas
b) enzimas del sistema de modificación

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9
Q

Enzimas de restricción:

degradan DNA extraño, reconocen una secuencia y cortan el ADN

A

endonucleasas

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10
Q

Ej. de enzimas del sistema de modificación

A

metilasas

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11
Q

enzimas del sistema de modificación (metilasas)

  • ¿qué hacen?
  • ¿dónde metilan?
  • ADN metilado es___
A
  • modifican el ADN propio para que no sea degradado
  • adenina o citosina
  • inmune
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12
Q

Enzimas de restricción: endonucleasas

  • cortan, ¿qué?
  • reconocen, ¿que?
A
  • enlaces fosfodiéster del ADN en secuencias específicas
  • secuencias palindrómicas
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13
Q

Tipos de Enzimas de restricción: endonucleasas

  • Reconocen secuencias cortas 6 a 7 pb
  • sitio de corte lejos del sitio de reconocimiento
  • sitio de corte en el DNA aleatorio, fuera de la sec. diana
  • gasta ATP
A

Tipo I

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14
Q

Tipos de Enzimas de restricción: endonucleasas

  • Reconoce secuencias cortas 4 a 8 pn
  • sitio de reconocimiento es igual al sitio de corte
  • corte en el DNA es especifico, en la sec. diana
A

Tipo II

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15
Q

Tipos de Enzimas de restricción: endonucleasas

reconoce secuencias palindrómicas → ahí corta

A

Tipo II

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16
Q

Tipos de Enzimas de restricción: endonucleasas

  • 2 secuencias de reconocimiento
  • corte asimétrico
  • corte lejos de la sec. de reconocimiento (20 a 30 pb)
  • gasta ATP
A

Tipo III

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17
Q

Tipos de Enzimas de restricción: endonucleasas
reconoce DNA metilado

A

Tipo IV

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18
Q

Cortes de las endonucleasas:

en diferente posición (3 a 5 nt de diferencia)

A

cohesivos/asimétricos

19
Q

Corte de las endonuclesas que deja bases nitrogenadas libres

A

cohesivos

20
Q

Cortes de las endonucleasa:
simétricos en ambas cadenas

A

romos

21
Q

DNA de dos fuentes diferentes se tratan con una enzima de restricción que genera cortes
____

A

cohesivos

22
Q

Los fragmentos generados por la misma enzima de restricción
son complementarios, ¿A qué se refiere con ello?

A

DNA que estamos buscando como el DNA del plásmido se corta con la misma enzima de restricción

23
Q

Molécula de DNA con capacidad de albergar un fragmento de DNA exógeno

A

vector

24
Q

2 tipos de vectores

A
  • clonación
  • expresión
25
Q

Vector usado para obtener grandes cantidades de
DNA

A

clonación

26
Q

Plásmidos, bacteriófagos,
fagémidos, cósmidos son ejemplos de vectores de:

A

clonación

27
Q

Vector que Genera un transcrito o proteína

A

de expresión

28
Q

Plásmidos o bacteriófago son ejemplos de vectores de

A

expresión

29
Q

Vectores de clonación (componentes) (3)

A
  • origen de replicación
  • sitio múltiple de clonación
  • marcador de selección
30
Q

Vector de clonación (componentes)

Secuencia específica que es reconocida por las enzimas de restricción para poder insertar el DNA complementario (tiene secuencias palindrómicas)

A

sitio múltiple de clonación

31
Q

Vector de clonación (componentes)

resistencia antibióticos, pt verde fluorescente

A

marcador de selección

32
Q

Vectores de expresión (componentes) (6)

A
  • Origen de replicación
  • Promotor
  • IRES
  • Sitio múltiple de clonación
  • cola poliA
  • Marcador de selección
33
Q

Vectores de expresión (componentes)

Sitio de entrada a ribosoma

A

IRES

34
Q
  • dsDNA (doble cadena de DNA)
  • circulares
  • separados del DNA cromosómico

¿qué vector?

A

Plásmido

35
Q

¿donde encontramos los plasmidos? (2)

A

bacterias y levaduras

36
Q

Componentes de los plásmidos (3)

A
  • origen de replicación
  • gen de resistencia antibiótica
  • región de DNA exógeno
37
Q

Plásmido (partes)

secuencia de ADN que permite al plásmido replicarse de forma autónoma en la célula huésped

A

origen de replicación

38
Q

Plásmido (partes)

Permiten seleccionar células que contienen el plásmido en un medio con antibióticos (como Ampr)

A

gen de resistencia antibiótica

39
Q

AmpR

A

Resistencia a la ampicilina

40
Q

Plásmido
Las enzimas del huesped se unen a ____ e inician la replicación

A

ORI

41
Q

Virus que infectan a las bacterias.

A

bacteriófago

42
Q
  • Vectores híbridos
  • se combina el DNA de un plásmido con el de un bacteriófago
A

cósmido

43
Q
  • plásmido al que se le incorpora el origen de replicación de un fago
  • no tiene sitios cos (DNA lineal)
A

fagémidos

44
Q

Cromosomas artificiales (2)

A
  • BAC (bacterias)
  • YAC (levaduras)