Culture de cellules végétales Flashcards
Les cultures végétales ont un double intérêt, lequel ?
- La micro-propagation
- Eradiquer les maladies
- Manipulations génétiques
La production à grande échelle de métabolites secondaires et les biotransformations sont des objectifs dans le cadre de l’alimentation et de la médecine aujourd’hui, vrai ou faux ?
C’est vrai.
Avec applications en médecine, en thérapeutique, dans l’alimentaire
Quel est l’objectif de la technique de mise en culture cellulaire ?
Isoler les cellules, ici d’une plante, afin de les mettre en culture à grande échelle pour ensuite produire des substances avec intérêt thérapeutique.
Qu’est-ce qu’un explant ?
Un morceau de plante (pour notre cas)
Pour choisir et préparer l’explant ; il ne doit pas être réactif, l’influence de la saison est important, il doit y avoir une absence de contamination, vrai ou faux ?
C’est faux, tout est vrai sauf qu’il doit être réactif justement.
Tout cela afin de :
- Créer une culture de masse en obtenant un grand nombre de cellules végétales à division
rapide dans un premier temps : caractéristiques des cellules dédifférenciées ou
indifférenciées.
- Exploiter cette culture de masse pour produire ou transformer des substances dans un second
temps : caractéristiques des cellules différenciées dont la vitesse de division est alors ralentie.
Quelles sont les étapes de préparation de l’explant ?
- Préstérilisation
- Stérilisation
- Rinçage (5 fois)
- Scarification de l’explant (excise les bords abimés)
- Mise en culture (pendant 1 à 5 semaines, dans un milieu de culture semi-solide)
- Incubation à 25°C (37 pour les cellules animales)
Quels sont les 3 grands types d’hormones ?
Les auxines
Les gibbérellines
Les cytokinines
- Si on diminue la quantité en cytokinine dans le milieu, on voit apparaître des racines.
- Si on diminue l’auxine, on voit apparaître des tiges.
- Si on retire l’auxine, il n’y a pas de vision.
Ce sont les hormones qui pilotent le succès de la culture.
Que se passe-t-il quand le cal est formé ?
On va le subdiviser pour faire des subcultures à repiquages ou passages.
Le temps de division des cellules végétales set beaucoup plus court que celui des microorganismes, vrai ou faux ?
C’est faux, il est beaucoup plus long (on parle en jours voire en semaines, et pas en heure voire en minutes).
Les cellules végétales sont plus grandes que les microorganismes et ont une sédimentation rapide, vrai ou faux ?
C’est vrai, mais en même temps elles sont plus sensibles aux cisaillements -> peu d’agitation.
La mesure de croissance des cellules végétales n’a pas besoin d’être très précise tant qu’on voit en gros les 4 phases (latencce, exponentielle, etc), vrai ou faux ?
C’est faux, elle doit être précise car :
- Si le changement du milieu est trop précoce : surcoût de production, manque à gagner pour l’industriel
(le bioréacteur contient des milliers de litres)
- Si le changement est trop tardif : phase de déclin difficile à rattraper, les cellules manquent de nutriments
et sont déjà entrées en apoptose il est quasi impossible de les récupérer.
Il faut donc pouvoir mesurer le moment où l’on va changer le milieu avec différentes méthodes de
surveillance.
Comment se fait l’estimation de la croissance des cellules végétales ?
- Estimation du poids sec et du poids frais.
1/4 poids frais : filtration + pesée
1/4 poids sec : filtration puis séchage (18h à 60°C) + pesée - Numération des cellules
- Estimation de la viabilité des cellules (colorants comme FDA ou bleu d’Evans)
- Estimation de l’index mitotique (nb noyaux en mitose/nb total noyaux comptés x 100)
A quoi servent les métabolites secondaires dans l’industrie ?
- rôle de défense avec action “active” (répulsif) voire toxique (antiseptique) selon la dose
- rôle d’adaptation du végétal à l’environnement
A quoi sert l’équipement enzymatique à l’intérieur des cellules végétales ?
transformer un substrat en un produit d’intérêt
La culture végétale est très fréquente, vrai ou faux ?
C’est faux, elle est assez peu fréquente, on a souvent recours à d’autres méthodes.
