Croissance et division des cellules bactériennes et dynamique d'évolution des populations bactériennes Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que l’inoculum dans la croissance bactérienne ?

A

L’inoculum est le nombre initial de cellules bactériennes introduites dans un milieu de culture, généralement entre 1000 et 1 000 000 cellules.

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2
Q

Comment les bactéries augmentent-elles en nombre ?

A

Elles croissent en taille jusqu’à ce qu’elles se divisent, donnant ainsi deux cellules identiques à la cellule mère.

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3
Q

Quel type de reproduction est favorisé chez les bactéries ?

A

La reproduction asexuée. Il n’y a donc pas de mélange gènes.

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4
Q

Quelle est la particularité de l’ADN des cellules filles comparé à celui de la cellule mère ?

A

L’ADN des cellules filles est identique à celui de la cellule mère.

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5
Q

Que se passe-t-il lorsqu’on ensemence un milieu de culture avec un inoculum ?

A

Lorsque l’on ensemence un milieu de culture avec un inoculum, il favorise la croissance bactérienne en permettant une augmentation rapide de la population bactérienne.

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6
Q

Quels sont les 4 mécanismes de reproduction asexué chez les microbactériens ?

A

1 - Fission binaire transverse
2 - Bourgeonnement
3 - Fragmentation d’hyphes
4 - Formation d’exospores

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7
Q

Quel est le mécanisme de reproduction asexué le plus fréquent ?

A

La fission binaire transverse

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8
Q

Comment fonctionne la fission binaire transverse ?

A

Une cellule produit deux cellules avec le même mécanisme génétique. Pour les cellules sphériques, il y a formation d’un septum à l’équateur où la cellule se séparera en deux. Par la suite, la cellule va augmenter de taille et refaire fission.

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9
Q

Quel est l’autre nom de la fission binaire transverse ?

A

La scissiparité

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10
Q

Quels micro-organismes utilisent la fission binaire transverse ?

A
  • Escherichia coli
  • Bacillus subtilis
  • Enterococcus faecalis
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11
Q

Comment fonctionne le bourgeonnement ?

A

Il y a un bourgeon qui croît jusqu’à atteindre la même taille que la cellule mère et il y aura formation du septum.

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12
Q

Quels micro-organismes utilisent le bourgeonnement ?

A
  • Rhodopseudomonas acidophila
  • Hyphomicrobium vulgare
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13
Q

Qu’est-ce qu’une hyphe ?

A

Une longue cellule filamenteuse ?

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14
Q

Comment fonctionne la fragmentation d’hyphes ?

A

La cellule augmente de taille jusqu’à atteindre plusieurs fois la taille de la cellule originale. Plusieurs cellules filles seront libérés par cette cellule filamenteuse. Il y a donc production multiple et non binaire. Par suite de la division, cette cellule filamenteuse, l’hyphe, n’existe plus après la production de la cellule fille.

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15
Q

Quel micro-organisme utilise la fragmentation d’hyphe ?

A

Nocardia

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16
Q

Comment fonction la formation d’exospores ?

A

Les cellules végétatives sont des hyphes dont à l’extrémité des petites cellules sphériques sont formées.

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17
Q

Quelle est la différence entre la formation d’exospores et le fragmentation d’hyphes ?

A

L’hyphe continue à exister dans la formation d’exospores, alors que ce n’est pas le cas dans la fragmentation d’hyphes.

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18
Q

Quel micro-organisme utilise la formation d’exospores ?

A

Streptomyces

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19
Q

Quelles sont les 4 étapes de la formation du septum ?

A

1 - Invagination de la membrane cytoplasmique
2 - Croissance du peptidoglycane dans l’invagination de la membrane
3 - Cloisonnement des cytoplasmes
4 - Séparation des deux cellules

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20
Q

Comment se nomme l’étape préliminaire de la formation du septum ?

A

La duplication du chromosome

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21
Q

Que se passe-t-il si la duplication du chromosome est inhibé pendant l’étape préliminaire de la formation du septum ?

A

La formation du septum est inhibé. La duplication est cruciale pour le contrôle du processus de division cellulaire.

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22
Q

Que se passe-t-il lors de l’invagination de la membrane cytoplasmique ?

A

Il y a un bourgeonnement vers l’intérieur jusqu’à croissance de la membrane vers l’intérieur.

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23
Q

Que se passe-t-il lors de la croissance de peptidoglycane dans l’invagination de la membrane ?

A

Les chaines de peptidoglycane se polymérisent vers le centre pour que les cellules filles aient la même structure.

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24
Q

Que se passe-t-il lors du cloisonnement des cytoplasmes ?

A

Il y a une fusion pour avoir deux cellules indépendantes. Les organismes peuvent se reproduire de façon indépendante. Les couches de peptidoglycane.

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25
Q

Quelle est la dernière étape de la formation du septum et que se passe-t-il lors de cette étape ?

A

Séparation des deux cellules. Terminaison de la synthèse de la nouvelle paroi du septum.

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26
Q

Quelle est la première hypothèse sur la croissance de la membrane pendant la fission binaire ?

A

Il y a croissance de la membrane entre les deux mésosomes jusqu’à éventuelle ségrégation des chromosomes.

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27
Q

Quelles protéines sont impliquées dans le partage des chromosomes bactériens ?

A

Les protéines parA et parB sont importantes pour le partage des chromosomes bactériens.

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28
Q

Que se passe-t-il lorsque les protéines parA et parB s’éloignent vers les pôles cellulaires ?

A

Elles s’éloignent lors de la duplication, permettant aux chromosomes de se séparer pour former deux cellules.

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29
Q

Quand débute la formation du septum ?

A

La formation du septum commence seulement quand les deux chromosomes sont éloignés.

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30
Q

Quel est le rôle de la protéine MreB dans la fission binaire ?

A

La protéine MreB aide à la séparation des chromosomes en jouant un rôle de convoyeur dans le cytoplasme.

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31
Q

Quelle est la fonction de la protéine ftsZ ?

A

La protéine ftsZ forme un anneau au centre de la cellule pour faciliter la formation du septum.

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32
Q

Que se passe-t-il avec les mutants ftsZ lorsqu’ils sont exposés à une température de 42 °C ?

A

Ils deviennent non fonctionnels, empêchant la formation du septum.

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33
Q

Que sont les “minicellules” dans le contexte des mutants ftsZ ?

A

Ce sont des cellules sans matériel chromosomique dû à une mauvaise localisation du septum.

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34
Q

Quel rôle joue MinCD dans la formation du septum ?

A

MinCD empêche la formation de l’anneau de ftsZ ailleurs qu’au centre, en inhibant les autres sites de formation.

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35
Q

Que se passe-t-il si la concentration de MinCD est trop faible ?

A

Le septum se forme de façon excentrique, provoquant une division asymétrique.

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36
Q

Quelle est la conclusion générale sur les rôles de MinCD et ftsZ ?

A

MinCD et ftsZ coordonnent pour assurer que le septum se forme au centre de la cellule, garantissant une division symétrique.

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37
Q

Qu’est-ce qu’un mésosome et quel est son rôle dans la fission binaire ?

A

Un mésosome est une structure membranaire qui sert de site d’attachement pour les chromosomes, facilitant la ségrégation pendant la division cellulaire.

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38
Q

Qu’est-ce que l’origine dans le contexte de la duplication du chromosome bactérien ?

A

L’origine est le point de départ de la duplication du chromosome, où la séparation et la migration des chromosomes commencent.

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39
Q

Que se passe-t-il lorsque l’origine du chromosome est répliquée ?

A

Les origines des chromosomes s’éloignent, et deux chromosomes sont générés, initiant la formation du septum.

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40
Q

Quelle est la fonction des protéines semblables au cytosquelette dans la cellule bactérienne ?

A

Elles permettent le déplacement adéquat des chromosomes vers les pôles de la cellule en croissance.

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41
Q

Comment les protéines parA et parB contribuent-elles à la ségrégation des chromosomes ?

A

Elles aident à éloigner les chromosomes vers les pôles cellulaires pour assurer une distribution équitable lors de la division.

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42
Q

Quelles sont les conséquences d’un mutant ftsZ non fonctionnel ?

A

Les mutants ftsZ non fonctionnels ne peuvent pas former le septum, conduisant à des filaments cellulaires allongés sans séparation.

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43
Q

Que signifie l’expression “filament température sensible” en rapport avec ftsZ ?

A

Elle indique qu’une mutation de ftsZ devient inactive à une certaine température (ex. 42°C), empêchant la formation du septum.

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44
Q

Quelle est la différence entre un septum central et un septum excentrique ?

A

Un septum central divise la cellule en deux parties égales, tandis qu’un septum excentrique forme une division asymétrique.

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45
Q

Comment le système Min (MinCD) influence-t-il la localisation du septum ?

A

MinCD empêche la formation du septum aux extrémités de la cellule, forçant la formation du septum au centre.

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46
Q

Que se passe-t-il si MinCD ne fonctionne pas correctement ?

A

La cellule risque de former le septum de manière asymétrique, créant des cellules de tailles inégales, ou même des minicellules.

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47
Q

Comment la protéine ftsZ forme-t-elle un anneau au centre de la cellule ?

A

Elle se polymérise pour former un anneau au niveau du futur septum, initiant la constriction et la séparation des cellules filles.

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48
Q

Pourquoi l’anneau de ftsZ est-il crucial pour la division cellulaire ?

A

L’anneau de ftsZ initie la formation du septum, essentiel pour diviser la cellule mère en deux cellules filles indépendantes.

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49
Q

Qu’est-ce qu’un mutant minicellule ?

A

C’est une cellule qui n’a pas de matériel chromosomique en raison d’une mauvaise formation du septum, souvent excentrique.

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50
Q

Que signifie “repolarisation” dans le contexte de la fission binaire ?

A

Repolarisation fait référence au repositionnement des protéines et structures pour garantir la symétrie lors de la division cellulaire.

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51
Q

Quelles sont les conséquences d’une concentration élevée de MinCD aux extrémités de la cellule ?

A

Cela favorise la formation du septum au centre de la cellule, empêchant une division excentrique.

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52
Q

Quel est l’effet de l’absence d’interaction entre MinCD et ftsZ ?

A

Sans cette interaction, ftsZ peut se polymériser de manière aléatoire, entraînant une division asymétrique et des anomalies cellulaires.

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53
Q

Que fait MinE dans la régulation de MinCD et ftsZ ?

A

MinE régule la distribution de MinCD, permettant à ftsZ de se positionner correctement pour former un septum central.

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54
Q

Quelle est l’équation utilisée pour représenter la croissance bactérienne ?

A

N = N0 * 2^n, où N est la population finale, N0 la population initiale, et n le nombre de générations.

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55
Q

Comment calcule-t-on le nombre de générations, n, si on connait N et N0 ?

A

n = 3.3 * (log10N - log10N0)

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56
Q

Qu’est-ce que le temps de génération dans le contexte de la croissance bactérienne ?

A

C’est le temps nécessaire pour que la population bactérienne double.

57
Q

Que signifie une croissance géométrique dans le contexte de la croissance bactérienne ?

A

Cela signifie que la population double à chaque génération, ce qui entraine une croissance exponentielle.

58
Q

Qu’est-ce que le temps de génération ?

A

Le temps pour que la population double.

59
Q

Est-ce que le temps de génération est le même pour toutes les espèces ?

A

Non, il varie.

60
Q

Quelle est l’équation qui représente le temps de génération (g) ?

A

g = (T2 - T1)/n

61
Q

Dans un milieu riche, le temps de génération est…

A

Bas

62
Q

Dans un milieu pauvre, le temps de génération est..

A

Élevé

63
Q

Le taux de croissance est l’inverse du…

A

Temps de génération

64
Q

Qu’est-ce que le taux de croissance ?

A

La constante de vitesse d’une croissance moyenne d’une population bactérienne.

65
Q

Quelle est l’équation du taux de croissance ?

A

k = 1/g (générations/heure)

66
Q

Qu’est-ce que la croissance en chémostat ?

A

La croissance en chémostat est un mode de culture où le taux de croissance bactérienne est maintenu constant en équilibrant l’apport de nutriments et l’élimination des déchets.

67
Q

Quel est le temps de génération de E.Coli ?

A

Environ 20 minutes

68
Q

Quelle est la masse approximative d’une cellule bactérienne ?

A

10^-12 grammes.

69
Q

Quelle sera la masse totale de bactéries après 48h de croissance continue, si la croissance était illimité.

A

4000 fois la masse de la terre (2.2*10^31g).

70
Q

Comment se caractérise la croissance bactérienne en laboratoire (In vitro) ?

A

La croissance in vitro est limitée et l’évolution de la population est prévisible ?

71
Q

Qu’est-ce qui fait en sorte qu’une croissance ne sera jamais illimitée ?

A
  • Les nutriments
  • L’espace
  • L ‘accumulation de déchets
72
Q

Quelles sont les 4 phases de la courbe de croissance ?

A

1 - Phase de latence
2 - Phase exponentielle
3 - Phase stationnaire
4 - Phase de mortalité/déclin

73
Q

Que se passe-t-il pendant la phase de latence ?

A

C’est le début de la croissance (Il n’y a pas d’augmentation de population). Cette phase est caractérisée par une activité psychologique élevée. C’est dans cette phase que les cellules s’adaptent dans le milieu qu’ils sont ensemencées. La durée de la phase est variable et dépend de facteurs tels que l’âge, l’état physiologique et le milieu.

74
Q

Que se passe-t-il au début et à la fin de la phase de latence ?

A

Début : Aucune augmentation de la population.

Fin : Les cellules commencent à se diviser

75
Q

Que se passe-t-il durant la phase exponentielle ?

A

Cette phase correspond à une pente positive. Correspond à l’augmentation constante de la population. La durée relative est courte, les cellules sont tous identiques et il n’y a aucune restrictions de nutriments.

76
Q

À quelle phase le temps de génération est constant et minimal ?

A

La phase exponentielle

77
Q

Que se passe-t-il durant la phase stationnaire ?

A

La courbe se traduit en droite horizontale. Le concentration de la population est la plus élevée (Densité maximale). La population ne croît plus, elle est constante. Les éléments nutritifs se rarifient et il y a du rejet de déchets métabolique. La population est hétérogène et les espèces bactériennes commencent à former des endospores. La durée de cette phase est variable selon l’espèce et le milieu.

78
Q

Quand commence la phase exponentielle ?

A

Lorsque la courbe termine et que nous entrons dans la partie linéaire.

79
Q

Quand commence la phase stationnaire ?

A

Quand nous sortons de la portion linéaire.

80
Q

Donner un exemple de déchets métaboliques qu’un micro-organisme peut rejeter lors de la phase stationnaire.

A

L’acide lactique (Rejeté par les Streptococcus)

81
Q

Pourquoi lorsqu’un streptococcus libère de l’acide lactique, la croissance arrête.

A

Diminution de pH a un point qui fait stopper la croissance de ces micro-organismes.

82
Q

Quel type de population avons nous dans la phase stationnaire de croissance ?

A

Population hétérogène

83
Q

Dû aux conditions défavorables lors de la phase stationnaire de croissance, que font les bactéries ?

A

Ils forment des endospores.

84
Q

Quand commence la phase de mortalité ?

A

Lorsque nous arrivons vers une pente décroissante.

85
Q

Pourquoi y a-t-il plus de reproduction dans la phase de mortalité ?

A

Car il y a absence de division cellulaire et les éléments nutritifs sont moindres, alors que les déchets métaboliques sont à un maximum.

86
Q

Quelle est la durée de vie d’une culture in vitro de Neisseria gonorrhoea ?

A

72 heures

87
Q

Quelle est la durée de vie d’une culture in vitro d’Escherichia coli ?

A

60 jours et plus.

88
Q

Qu’est-ce qu’une culture en chémostat ?

A

C’est une culture en ‘‘Vase non-clos’’ où un réacteur à un volume fixe est utilisé pour ajouter constamment du milieu frais et éliminer le milieu épuisé.

89
Q

Quels paramètres sont contrôlés dans une culture en chémostat ?

A
  • Le pH
  • La température
  • L’agitation
  • Le gaz
90
Q

Pourquoi utilise-t-on une culture en chémostat pour étudier la croissance bactérienne ?

A

Elle permet de reproduire les conditions de croissance continue, offrant un modèle plus proche des conditions naturelles.

91
Q

Qu’est-ce qu’un taux de dilution dans une croissance continue ?

A

Le taux de dilution est le volume de milieu de culture frais ajouté par rapport au volume total du réacteur par unité de temps.

92
Q

Pourquoi le taux de dilution est un paramètre crucial dans les cultures en chémostat ?

A

Il détermine la vitesse à laquelle le milieu est renouvelé et influence directement le taux de croissance des bactéries.

93
Q

Que signifie un taux de dilution égal au taux de croissance ?

A

Cela signifie que la population bactérienne est stable. Il n’y a pas d’accumulation de bactéries ni de pertes excessives.

94
Q

Que se passe-t-il si le taux de dilution est supérieur au taux de croissance ?

A

Les bactéries sont ‘‘Lavées’’ hors du réacteur plus vite qu’elles ne peuvent se reproduire.

95
Q

Que se passe-t-il si le taux de dilution est inférieur au taux de croissance ?

A

La population bactérienne croît, mais de manière limitante, en raison d’une faible arrivée de nutriments et d’une accumulation de déchets.

96
Q

Comment calcule-t-on le taux de dilution ?

A

Le taux de dilution est calculé en divisant le volume de milieu frais ajouté par le volume total du réacteur par heure.

97
Q

Si 100 ml/h sont ajoutés dans un réacteur de 1 litre, quel sera alors le taux de dilution pour une culture continue ?

A

0.1/h

98
Q

Pourquoi le concept de lavage est crucial dans une culture continue ?

A

Le lavage empêche l’accumulation de bactéries en excès et maintient un équilibre entre la croissance et l’élimination dans le système.

99
Q

Comment une culture continue en chémostat peut-elle maintenir les cellules en phase exponentielle ?

A

En ajustant le taux de dilution pour correspondre au taux de croissance, les cellules restent dans un état de croissance actif et stable.

100
Q

Quelles sont les les implications biologiques d’une culture continue en comparaison avec une culture en vase clos ?

A

La culture continue simule des conditions plus proches des environnements naturels où les nutriments sont renouvelés en continu, contrairement à une culture en vase clos.

101
Q

Comment la culture continue reflète-t-elle les conditions in vivo pour certaines bactéries ?

A

Elle permet d’obtenir des temps de génération similaires à ceux observés dans l’environnement naturel.

102
Q

Quelles sont les 5 méthodes d’énumération cellulaire ?

A
  • Chambre de Petroff-Hausser
  • Énumération électronique
  • Énumération des unités viables
  • Méthode turbidimétrique
  • Méthode moléculaire
103
Q

Qu’est-ce que la chambre de Petroff-Hausser et comment fonctionne-t-elle ?

A

C’est une grille permettant de compter les cellules bactériennes dans un volume prédéterminé sous microscope. Elle maintient une hauteur de 0,02 mm, avec des carrés de 1 mm x 1 mm pour estimer la concentration.

104
Q

Quel est le facteur de multiplication pour obtenir la concentration en utilisant la chambre de Petroff-Hausser ?

A

On multiplie les cellules comptées dans 25 carrés par 50 x 10³ pour obtenir le nombre de cellules par mm³ ou ml.

105
Q

Quels sont les avantages de la chambre de Petroff-Hausser ?

A

Elle est rapide, économique, et nécessite un minimum d’équipement. Elle est idéale pour des populations élevées (10⁷ à 10⁸ cellules/ml).

106
Q

Quelles sont les limites de la chambre de Petroff-Hausser ?

A

Elle ne permet pas de distinguer les cellules vivantes des cellules mortes et nécessite de savoir si l’échantillon est en phase de croissance active.

107
Q

En quoi consiste l’énumération électronique ?

A

Utilise un cytomètre en flux pour faire passer un laser à travers un flux de cellules, comptant chaque cellule et distinguant les vivantes des mortes grâce aux fluorochromes.

108
Q

Quels fluorochromes sont utilisés dans la cytométrie en flux pour distinguer cellules vivantes et mortes ?

A

Des fluorochromes vitaux, qui marquent les cellules vivantes spécifiquement.

109
Q

Quels sont les avantages de la cytométrie en flux ?

A

C’est une méthode rapide (quelques secondes), précise, et permet de trier les cellules (tri FACS).

110
Q

Quelles sont les limites et le coût de l’énumération électronique ?

A

Le coût est élevé (environ 50 000 $ pour l’équipement). La sensibilité est limitée pour les petites cellules, et elle nécessite des témoins internes, comme des billes de taille et concentration connues.

111
Q

Pour quelles applications utilise-t-on la cytométrie en flux ?

A

Elle est utilisée pour la détection de spores dans l’air et pour la caractérisation de populations hétérogènes.

112
Q

Qu’est-ce que l’énumération des unités viables ?

A

C’est une méthode où des dilutions de l’échantillon sont ensemencées sur une boîte de Pétri pour compter les colonies (UFC (Jon Jones is the greatest fighter of all time)).

113
Q

Quels sont les avantages de l’énumération des unités viables ?

A

Elle est économique, ne demande que peu d’équipement, et permet de compter uniquement les cellules capables de se reproduire (viables).

114
Q

Quelle est la plage optimale de colonies pour une analyse valide en énumération des unités viables ?

A

Entre 30 et 300 colonies par boîte de Pétri pour obtenir des résultats représentatifs.

115
Q

Quelles sont les limites de l’énumération des unités viables ?

A

Elle prend du temps (incubation de 24 heures à plusieurs jours), demande de l’espace, et les UFC (You put two guys in a room, Jon Jones walks out of that room), ne représentent pas toujours la population totale (certaines cellules peuvent ne pas former de colonies).

116
Q

Que signifie UFC et pourquoi n’est-elle pas égale au nombre total de cellules ?

A

UFC (Jon Jones is the pound for pound best fighter in the world) signifie « unités formant colonies ». Elle ne représente que les cellules capables de se multiplier dans les conditions données, souvent moins de 1 % des espèces.

117
Q

Quelles sont les méthodes pour énumérer des populations très diluées ?

A

On utilise la filtration pour concentrer les cellules avant l’ensemencement.

118
Q

Qu’est-ce que la méthode turbidimétrique ?

A

Elle mesure la densité optique de la suspension bactérienne grâce à un spectrophotomètre, basé sur l’absorption ou la dispersion de la lumière.

119
Q

Comment la densité optique reflète-t-elle la concentration bactérienne ?

A

Plus la densité optique est élevée, plus la concentration bactérienne est importante, permettant une estimation rapide.

120
Q

Quels sont les avantages de la méthode turbidimétrique ?

A

Elle est rapide, utilisée en routine, et adaptée aux populations denses (10⁷ à 10⁸ UFC(Dana, i wanna oil you up.. The fuck does that mean hehehe)/ml).

121
Q

Quelles sont les limites de la méthode turbidimétrique ?

A

Elle ne différencie pas les cellules vivantes des mortes, nécessite des conditions standardisées, et les cellules mortes peuvent fausser les résultats en dispersant également la lumière.

122
Q

Comment s’assure-t-on de la précision des résultats en turbidimétrie ?

A

On utilise des courbes de référence (courbes DO/UFC (Jon Jones is the baddest fighter… TO EVER LIVE) pour étalonner les lectures de densité optique.

123
Q

Qu’est-ce que l’énumération cellulaire par méthodes moléculaires ?

A

Elle consiste à extraire l’ADN total et à l’amplifier via PCR ou qPCR pour quantifier les cellules par le nombre de copies d’ADN.

124
Q

Quels sont les avantages des méthodes moléculaires pour l’énumération cellulaire ?

A

Rapides, permettent de quantifier des organismes non cultivables et de détecter plusieurs organismes simultanément.

125
Q

Quelles sont les limites des méthodes moléculaires comme la qPCR ?

A

C’est coûteux (appareils spécialisés), ne permet pas de distinguer les cellules vivantes des mortes, et la spécificité de l’ADN amplifié doit être assurée pour des résultats précis.

126
Q

Quelle est la différence entre PCR et qPCR en énumération cellulaire ?

A

La PCR détecte la présence d’ADN, tandis que la qPCR (quantitative PCR) quantifie le nombre de copies d’ADN pour une évaluation plus précise.

127
Q

Pourquoi utilise-t-on des témoins internes dans la qPCR ?

A

Pour assurer la précision de la quantification en comparant les résultats aux témoins, surtout quand on cherche des quantifications précises en copies/volume.

128
Q

Quelles sont les applications des méthodes moléculaires pour des organismes non cultivables ?

A

Elles permettent d’étudier des populations microbiennes dans des échantillons environnementaux ou des situations cliniques où la culture est difficile ou impossible.

129
Q

Quelle est la procédure de détermination du poids sec ?

A

La procédure consiste à filtrer un volume de la population cible, puis à laisser sécher cette échantillon à 100-150 degrés jusqu’à ce qu’il soit complètement sec.

130
Q

Pourquoi la détermination du poids sec ne permet-elle pas d’estimer la viabilité des cellules ?

A

Lorsque l’on me sure un poids sec, la masse reste constante même si les cellules ont perdu leur viabilité. Cela signifie qu’on ne peut pas différencier entre des cellules viables uniquement avec cette méthode.

131
Q

Qu’est-ce qu’une courbe de référence dans le contexte de la détermination du poids sec ?

A

Une courbe de référence, ou courbe étalon, est une courbe qui relie le poids sec à une mesure de la viabilité (Par exemple, UFC (You put Jon Jones and Dana White in a room, three person walks out of that room)). Elle est établie en utilisant des conditions prédéfinies avec le même organisme pour estimer indirectement la viabilité.

132
Q

Pourquoi la courbe de croissance basée sur le poids peut-elle être fausse en phase de déclin ?

A

En phase de déclin, la masse cellulaire totale peut rester la même même si les cellules ne sont plus viables. Ainsi, la courbe de poids sec ne diminue pas, donnant l’impression d’une population stable alors que les cellules perdent leur viabilité.

133
Q

Pour quels types de microorganismes la méthode du poids sec est-elle adaptée et pourquoi ?

A

La méthode est particulièrement adaptée aux bactéries qui se regroupent en agrégats ou forment des hyphes, comme Mycobacterium, Streptomyces et les Mycètes, car elle permet de quantifier la masse dans des populations à haute densité.

134
Q

Quelles sont les unités de mesure typiques utilisées pour le poids sec ?

A

Typiquement, 1 µL d’eau équivaut à 1 mg de poids sec, et 10^9 cellules correspondent également à 1 mg, ce qui permet de relier le volume de culture au poids sec estimé.

135
Q

En quoi consiste la détermination chimique et quels composés peuvent être mesurés ?

A

La détermination chimique mesure un composant représentatif de la population cellulaire. On peut mesurer l’azote total (présent dans les nucléotides), le peptidoglycane, l’ADN, l’ATP ou des produits de fermentation.

136
Q

Pourquoi un facteur de conversion est-il nécessaire en détermination chimique ?

A

Un facteur de conversion, validé au préalable, est essentiel pour interpréter correctement les données de la détermination chimique, car il permet de traduire les concentrations de composés spécifiques en masse cellulaire totale.

137
Q

Quels sont les avantages et les limitations de la détermination chimique ?

A

La détermination chimique permet une analyse spécialisée et précise de constituants cellulaires. Cependant, elle est limitée par la nécessité de facteurs de conversion spécifiques et ne peut pas toujours s’appliquer à toutes les populations.

138
Q

Quelles sont les méthodes les plus courantes pour mesurer la croissance et pourquoi aucune n’est-elle universelle ?

A

Les méthodes fréquentes sont la mesure des unités viables, la turbidimétrie pour la densité cellulaire et la quantification de molécules spécifiques. Aucune méthode n’est universelle car chaque technique a des applications, des limitations spécifiques, et ne peut pas évaluer toutes les conditions expérimentales ou types de populations.