Croissance bactérienne et exigence nutritionnelles des bactéries Flashcards
Vrai ou faux la croissance des moo est définie par un accroissement du nombre de cellules seulement.
faux, ou de la MASSE cellulaire TOTALE
Chez la plupart des procaryotes, la croissance d’une cellule se fait comment?
par fission binaire (scissiparité)
le chromosome se réplique, se sépare et il y a un anneau qui se forme pour séparer le matériel génétique répliqué et former une nouvelle cellule
EXAM : On observe 4 phases de croissances, quelles sont-elles?
latence
exponentielle (logarithmique)
phase stationnaire
phase de mortalité
La courbe de croissance d’une population bactérienne (sur un graphique) peut être représentée par quelle variable?
le log10 de la concentration bactérienne (bact./ml) en fonction du temps d’incubation (heures)
Qu’est-ce qui caractérise la phase de latence? Sa durée varie en fonction de quoi?
phase d’adaptation = aucune division cellulaire
durée dépend :
- âge des bactéries
- de l’origine (composition et température du milieu)
Qu’est-ce qui caractérise la phase de croissance exponentielle?
logarithmique
accélération de la croissance bactérienne + division cellulaire
les moo se divisent à la vitesse MAXIMALE
population bactérienne est uniforme (propriétés chimiques et physiologiques)
ELLE EST DE COURTE DURÉE
relation enter concentration des nutriments et croissance
Qu’est-ce qui caractérise la phase stationnaire? Quelles sont ses causes?
nombre total de moo reste constant (équilibre entre division et mort cellulaire)
(10^9 cellules/ml)
Causes :
manque de nutriments
accumulation de déchets toxiques, acidité
Qu’est-ce qui caractérise la phase de mortalité? Quelles sont les causes?
arrêt de la division cellulaire
nb de bactéries viables ou cultivables diminue de façon constante en fonction du temps
Causes :
- dmg irréparables qui conduisent à une perte de viabilité
- réponse génétique déclenchée (mort cellulaire programmée)
- formation de cellule viables non cultivables (état de dormance)
Quelles sont les méthodes directes pour quantifier le nombre de moo?
décompte total des moo (DÉPEND DE LA TAILLE)
hémocytomètre
cellule de Petroff-Hausser
décompte des unités viables
méthodes des filtres de cellulose
Vrai ou faux, dans un laboratoire pour des élèves non expérimentés, il est plus avantageux d’utiliser un compteur de cellules Coulter ou un Cytomètre de flux qu’un hémocytomètre.
faux
Quels sont les avantages/inconvénients de l’hémocytomètre et de la cellule de Petroff-Hausser?
on fait le dénombrement sur un microscope (plus simple pour les élèves)
facile à utiliser, rapide et peu coûteux
information du la taille et la morphologie des moo
Inconvénients :
- densité microbienne élevée (on doit procédé à des dilutions pour déterminer la densité bactérienne dans la suspension d’origine)
- on ne peut pas distinguer les cellules mortes et vivantes (**PAR CONTRE il existe des kits commerciaux permettant de distinguer les cellules mortes et vivantes)
Qu’est-ce qu’un hémocytomètre? Il permet de faire le décompte de quels moo? EXAM : Quelles sont ses dimensions?
pour les levures et les cellules de mammifères
c’est une lame de verre spécialisée (pas la même chose qu’une lame normale)
dimension : 0,1 cm x 0,1cm x 0,01cm = 1/10000 cm^3
Comment détermine-t-on le nombre de cellules bactériennes par ml (cellules/ml) de la suspension de départ avec un hémocytomètre?
10000* x cellules comptées x facteur de dilution*
- pour tenir compte du volume
- si on a diluée la suspension bactérienne parce qu’elle était trop dense
La cellule de Petroff-Hausser nous permet de compter quel moo?
les bactéries!
Qu’est-ce que la cellule de Petroff-Hausser? Quelles sont ses dimensions? Comment peut-on calculer le nombre de cellules bactériennes dans la suspension de départ?
permet de compter les bactéries
dimensions : 10 fois plus petite que l’hémocytomètre
cellules/ml = 100 000 x cellules comptées x facteur de dilution
Vrai ou faux, les dimensions de l’hémocytomètre sont 10 fois plus petites que la cellule de Petroff-Hausser.
VRAI
Qu’est-ce que que le décompte des unités viables ? Quelles sont les deux méthodes?
décompte les unités qui sont capables de se repoduire
- > dilution en milieu liquide + étalement sur gélose
- > méthode des filtres de celluloses
Quels sont les avantages et désavantage de la méthode de dilution et étalement sur gélose pour faire le décompte des unités viables?
A : colonies proviennent seulement des cellules vivantes capables de se reproduire
D : un amas de cellule = 1 colonie
Qu’est-ce que veut dire le terme UFC?
unités formant des colonies
Quel est le calcul pour connaître la concentration de moo dans la suspension de départ pour la méthode de dilution en milieu liquide sur gélose?
nombre de colonie (entre 30 et 300) x facteur de dilution = x UFC (unité formant des colonies) par mL
Qu’est-ce que la méthode des filtres de cellulose?
permet de faire le décompte d’unité viable
on prend la suspension bactérienne et on la fait passer au travers d’un dispositif contenant un filtre de cellulose (avec une certaine porosité pour retenir les bactéries (dans les microns))
on retire le filtre, on le dépose à la surface d’une gélose nutritive et ensuite on peut compter les colonies
Quelles sont les méthodes indirectes pour mesurer la croissance bactérienne?
- mesure de l’activité (mesure la consommation de substrat, excrétion de certains produits, concentration de certains constituants cellulaires)
mesure de la masse cellulaire
Vrai ou faux, il est possible d’évaluer la concentration microbienne d’un échantillon juste en mesurant l’excrétion de certains produits par des moo comme le CO2 ou le NH3.
vrai, cependant c’est une méthode indirecte, on mesure l’activité d’une suspension
Comment arrive-t-on a dénombrer des moo en mesurant le poids sec des moo? Est-ce une méthode indirecte ou directe?
c’est une méthode indirecte
récolte des moo sur un filtre
lavage (à 100ºC)
pesée (bactéries mortes et vivantes sont comptées)
valeur exprimée en g/L
ensuite on se base sur une courbe standard et on peut avoir une valeur exprimée en cellules/ml
Qu’est-ce la turbidimétrie?
évaluation de la concentration cellulaire à l’aide de sa densité optique (limite de concentration microbienne entre 10^6 et 10^8/ml)
il faut comprendre que la densité optique d’une suspension bactérienne est directement proportionnelle à sa concentration cellulaire
Vrai ou faux, la densité optique d’une suspension bactérienne est directement proportionnelle à sa concentration bactérienne.
vrai (principe de la turbidimétrie)
Que faut-il faire pour évaluer la concentration microbienne d’une suspension inconnue en turbidimétrie?
on doit préalablement établir à l’aide d’un spectrophotomètre une courbe de référence pour des concentrations microbiennes connues
EXAM : Qu’est-ce que le temps de génération ou de doublement? Quelle est son équation?
expression mathématique de la croissance bactérienne
c’est l’intervalle de temps entre deux division cellulaires successives
g = t/n (n = nombre de génération)
ex : E.coli (20min) vs Mycobacterium.t (800 min)
EXAM :Qu’est-ce que le taux de croissance? Quelle est l’expression mathématique pour calculer le taux de croissance?
nombre de génération par unité de temps (inverse du temps de génération = autre équation pour calculer la croissance bactérienne)
k = n/t
E.coli (3/h)
Mycobacterium t. (0,075/h)
Quelles sont les 3 expressions mathématiques pour calculer la croissance bactérienne?
temps de doublement : g = t/n
taux de croissance : k = n/t
nombre de génétation : nombre de cellule au temps t - nombre initial de cellule (avant incubation)
Qu’est-ce qu’une culture continue (ouvert)?
Permet de soutenir la culture (utilisé dans des productions industrielles)
apport en nutriments
élimination des déchets
LA PHASE DE CROISSANCE EXPONENTIELLE est MAINTENUE sur une plus longue période
permet d’avoir une concentration constante de la biomasse
Quels sont les deux types de culture continue? (chémostat et turbidostat peux-tu expliquer la différence?)
chémostat : apport constant de nutriments à la même vitesse que le milieu est éliminé
turbidostat : la vitesse de dilution est déterminée par la densité
Quel est le point commun de tous les milieux de culture?
leur préparation est utilisée pour réaliser la croissance, le transport ou la conservation des moo
Vrai ou faux, la composition des milieux de cultures varie à l’infini.
vrai
Vrai ou faux, les milieux de cultures n’ont pas besoin de respecter les exigences nutritives des moo.
faux faux faux, les exigences des moo sont TRÈS diversifiées et donc si on veut cultiver un moo en particulier on doit le faire sur un milieu qui contient les bons éléments nutritifs pour que l’organisme puisse croître
Quelle est la SEULE différence entre un milieu liquide et solide?
liquide : bouillon de culture (suspension microbienne)
solide : même composition que les bouillons, sauf contient AGAR à 1-2% qui permet de PRODUIRE DES COLONIES MICROBIENNES que l’on peut isoler et observer!
Quels sont les deux types de milieux de culture?
a) classés selon leur composition : synthétique ou empirique
b) classés selon leur usage : sélectif ou différentiel (ou les deux)
Qu’est-ce qu’un milieu de culture synthétique ou définis?
Composition chimique entièrement connue
–> permet de produire des milieux pauvres = permettent la croissance d’un certain type de moo!
Qu’est-ce qu’un milieu de culture empirique ou complexe?
contiennent des extraits de sources biologiques (extrait de levure, peptone)
composition chimique INDÉTERMINÉE (moins standardisé)
milieux RICHES = croissance d’une GRANDE variété de moo
Milieux enrichis (nous pouvons l’enrichir avec certains additifs comme du sang, sérum, etc) : permet croissance de certains moo EXIGEANTS : les hétérotrophes fastidieux
Vrai ou faux, la gélose de MacConkey permet d’isoler des bactéries gram +.
faux, gram -