Cours 9 France

Question 1

Quels sont différentes méthodes d’analyse de la quantification de l’expression génique?

Answer 1

Expression génique individuelle
- Gène rapporteur
- Northern
- Reverse-transcriptase
- RT-PCR
- RT-qPCR

Expression génique globale (transcriptome)
- Biopuce
- SCOTS
- RNA-seq

Question 2

Comment peut-on évaluer l’expression génique?

Answer 2

Par la mesure de la qt d’ARN ou de protéine

Question 3

Comment fonctionne le gène rapporteur?

Answer 3

Le gène rapporteur est contrôlé par le promoteur du gène d’intérêt

Le gène rapporteur peut être:
- Plasmidique ou intégré au chromosome
- Fusion transcriptionnelle
- Fusion traductionnelle

L’expression du gène rapporteur est factilement observable: fluorescence, luminescence, couleur..

Question 4

Revoir diapo 5??

Question 5

C’est quoi la luminescence?

Answer 5

Liaison de l’enzyme à son substrat = lumière
luciférase + luciférine = photon

Question 6

C’est quoi la GFP?

Answer 6

Protéine fluorescente stable, non toxique isolée d’une méduse

Peut servir à la mesure de l’expression génique si elle est fusionnée à un promoteur, ou au marquage cellulaire

Question 7

À quoi peut servir le gène rapporteur?

Answer 7

• Déterminer le niveau d’expression
• Déterminer la condition qui favorise l’Expression maximale
• Déterminer la localisation (du gène?)