Cours 9 Flashcards
Pourquoi peut-on prédire avec précision la structure tridimensionnelle d’une protéines?
Car la structure 3D (tertiaire) dépend de la structure primaire (séquence d’a.a. de N-terminal à C-terminal) et les prot suivent tjrs les mêmes lois physico-chimiques lors des repliements
Est-ce que le repliement de certaines protéines peut avoir lieu pendant leur synthèse (traduction)?
Oui
Dès que la chaîne polypeptidique est suffisamment longue pour créer des domaines protéiques, la protéine commence à adopter sa structure finale tridimensionnelle même en cours de traduction
4 étapes du repliement
- Traduction (élongation de la chaîne polypeptidique) de la protéine + premier repliement au niveau N-terminal
- Deuxième repliement….
- Codon stop + dernier repliement en C-terminal
- Structure finale et libération hors du ribosome
À quoi est-dû le fait que le repliement peut être difficile pendant la synthèse de la protéine?
Certaines protéines sont intrinsèquement moins solides structurellement et peuvent facilement se replier en une mauvaise structure qui ne permettra pas d’accorder à la prot la fonction désirée par la cellule
Comment guider les protéines pour qu’elles parviennent à leur structure (repliement) final? (pour les protéines moins solides)
+ leur rôle
Les molécules chaperons
→ permettent de faire en sorte que les protéines se replient correctement/retournent sur la voie de repliement normal en aidant la catalyse
Que se passe-t-il quand une protéine quitte plusieurs fois la voie de repliement aux niveaux intermédiaires de repliement (avec aide des chaperons)?
Les chaperons peuvent intervenir à plusieurs reprises pour remettre continuellement la protéine sur le droit chemin de repliement
molécules chaperons = “guides”
À quel moment du chemin de repliement, les protéines peuvent-elle dévier et adopter de mauvaises structures?
Au moment où elles ont une forme intermédiaire
(avant d’atteindre leur repliement/structure 3D finale)
Quelles sont les 3 voies que peut remprunter une protéine au cours de son repliement?
- Repliement voie normale
- Repliement voie annulée (nécessité de la catalyse aidée par les chaperons)
- Accidents irréparables
- Que se passe-t-il la protéine s’éloigne trop de la voie normale de repliement?
- Pourquoi est-ce nécessaire?
Les prot mal formées sont dégradées par les protéases = accident irréparable
= nécessaire d’éliminer les protéines malformées car elles sont toxiques pour la cellule
Quels problèmes peuvent causer les molécules hydrophobes sur la protéines? (3)
- Comme la molécule est un milieu aqueux, il peuvent entraîner des dégâts dans la cellule
- Empêchement du repliement correct de la protéine car en milieux aqueux, structures hydrophobes ont tendance à se rassemble pour diminuer leur surface et favoriser l’entropie
- Créations d’agrégats protéiques avec d’autres protéines qui ont des surfaces hydrophobes = développement de problèmes dans la cellule
Deux molécules chaperonnes qui aident au bon repliement des protéines:
- hsp 70
- Hsp 60
Pourquoi hsp?
Heat shock protein
Empêche mauvaise conformation à cause de la chaleur
Comment remédier aux problèmes causés par les molécules hydrophobes à la surface des protéines (hsp70)?
Chaperon hsp70 reconnaissent et engagent ces structures hydrophobes (en s’y fixant) pour les couvrir et ainsi laisser le temps à la protéine de terminer sa synthèse et d’adopter sa forme finale
= permettra de “cacher” les structures hydrophobes PENDANT LA TRADUCTION et après
⚠︎ consomme de l’ATP!
Rôle des molécules chaperons hsp 70
→ 4 étapes
- Reconnaissance + liaison
→ recouvrement des molécules hydrophobes sur la chaîne polypep à la sortie du ribosome - Hydrolyse de l’ATP en ADP (monoPi libéré)
- Prot commence à se replier (hsp70 toujours présents)
-
Libération des molécules chaperons + ATP
= protéines correctement repliées (ou pas)
V/F: Lors de l’aide au repliement par Hsp70, il y a une dépense énergétique car il s’agit d’un processus actif d’engagement des structure hydrophobes et de relargage des molécules chaperons
Vrai
Que se passe-t-il si la protéine est mal repliée après la première intervention des hsp70?
Le cycle de repliement peut recommencer (toujours avec l’aide de ces molécules chaperons)
hsp70, quel type de molécule?
Molécules chaperons
Qu’est-ce qui permet l’action des hsp70 et donc le bon repliement des protéines (4)?
- Reconnaissance générique des structures hydrophobes à la surface d’une prot
- Entrer en liaison avec ces structures
- Dépense d’énergie pour détachement des molécules chaperons
- Laisser la molécule tenter de trouver spontanément la bonne conformation
= système de reconnaissance des structures hydrophobes et dépense énergétique
Qu’est-ce que la molécule hsp60?
= molécule chaperon et complexe protéique
Qu’est-ce que les molécules chaperons hsp60 sont capables de faire?
Comment cela est-il possible?
- Reconnaissance (via polypep hydrophobes): les prot mal repliés entrent en liaison avec elles
Pour les protéines normales, les polypeptides hydrophobes doivent se trouver à l’intérieur du repliement
Ainsi, si les structures hydrophobes sont détectées (à l’extérieur), cela veut dire qu’il y a un prob
Rôle des molécules chaperons hsp 60
→ 8 étapes
- Reconnaissance des polypeptides hydrophobes des prot mal repliées par le complexe hsp60
- Liaison hsp60 et polypeptides hydrophobes qui vont être ENTIÈREMENT cachées (boîte/exclusion)
- Consommation d’ATP
- Fermeture de la boîte (coiffe)
- Protéine trouve sa bonne conformation seule à l’intérieur de la boîte
- Une fois que les structures hydrophobes sont cachées, la liaison avec le complexe prot hsp60 se brise
- Hydrolyse ATP → ADP (monoPi libéré)
- Prot bien repliée libérée
Que se passe-t-il en cas d’accident irréparable (protéine mal repliée toxique) (2)?
- Prot ubiquitinilée: système d’étiquetage des prot, marquage pour qu’elles soient détruites
- Mécanisme du protéasome
Qu’est-ce que l’ubiquitine?
Petite prot qui marque les protéines mal repliées (et qu’il faut détruire) par liaison covalente
= étiquette
Donner les 3 enzymes, actrice dans le système de l’ubiquitine et leurs rôles respectifs
- E1: activation de l’ubiquitine et transfert sur E2
- E2: porteur de l’ubiquitine dans le complexe E2-E3
- E3: Reconnaissance de la cible et catalyse de l’étiquetage (ligase)
7 étapes du déroulement du système d’étiquetage
on dit que la prot mal repliée est ubiquitinilée
- Activation de l’ubiquitine par E1 (transfert sur E2)
- Ubiquitine activée transportée par E2
- E3 reconnaît la protéine cible
- Formation complexe E3-prot mal repliée
- Formation complexe E3- prot cible + E2-ubiquitine
- Transfert de l’ubiquitine depuis E2 sur la prot mal repliée → Activité Ligase de E3
- Cycles répétées de plusieurs ajouts d’ubiquitines qui s’accumulent sur la prot cible = chaîne d’ubiquitine liées de façon covalente
= étiquette très facilement repérable
Ubiquitine se fixe sur quel a.a. de la prot mal repliée?
Lysine
Est-ce que le protéasome possède plusieurs sous-unités?
Quelles structure? Tertiaire ou quaternaire?
Oui = énorme complexe de protéines différentes (structure quaternaire)
Machine qui élminine les prot?
Protéasome
Fonctionnement protéasome
- Prot étiquetée arrive sur protéasome
→ déroulase reconnaît et déplie la prot (conso d’énergie) - Prot est tirée dans le cylindre central = protéase (utilisation d’énergie)
- Ciseau moléculaire (acti protéolytique) coupe en petits bouts de 5-10 AA
Où agir pour contrôler l’expression de la protéine (3):
Exemple?
Agir sur:
- Transcription de l’ARNm codant pour une prot
- Traduction de cette prot
- Le niveau des prot dans la cellule en les détruisant grâce au système d’ubiquitine-protéasome
Ex: le cycle cellullaire
Qu’est-ce que le repliement des prots permet de créer?
Des sites de liaisons (à un ligand spécifique)
→ base de l’interaction avec d’autres protéines
Comment prot se reconnaissent?
Grâce aux sites de liaisons (qui utilisent les “forces faibles”)
ex: site de liaison de l’AMP cyclique contient un mélange de toutes les forces “faibles”
Comment appelle-t-on la molécule qui se lie à une protéine bien repliée? (Comment ça se passe?)
Exemples
Le ligand
→ grande affinité et spécificité entre le ligand et la prot
(liés par des forces non-covalentes)
En général, qu’est-ce qui permet l’interaction entre un ligand et une protéine?
Qu’est-ce qui permet une affinité élevée?
Des forces non-covalentes (pas toujours mais la plupart du temps)
Quelle autre protéine que les enzymes nécessite des sites actifs?
Les Anticorps
(= structure quaternaire → boucles ss-unit créent une surface d’interaction avec l’antigène)
Structure de la protéine d’hémoglobine:
= Tétramère
→ 4 ss-unit (2 ⍺ et 2 ß) de structures semblables
+ présence 4 hêmes (= coenzyme groupe prosthétique)
→ chaque hème peut capter un atome de fer
V/F: L’Hb a plusieurs “bonnes” conformations
Expliquer
Vrai
Lorsque O2 se fixe, change confo d’1 ss-unit qui se transmet au autres → plus à même de capter O2 car affinité ↑
= allostérie
Expliquer la régulation allostérique des GPCRS après la liaison du ligand
Récepteur GPCR
→ son activation déclenche un mvt des hélices alpha qui se séparent pour transmettre la signalisation vers l’intérieur de la cellule
Quelles sont les 2 types d’action allostériques?
-
Activation allostérique → ligand (lié non-covalent à ez) permet à l’enzyme d’atteindre son activité maximale
= modulation positive → prot active, peut accueillir le substrat -
Inhibition allostérique → autre ligand diminue l’action de l’enzyme
= modulation négative → prot inactive, ne peut pas accueillir le substrat
Qu’est-ce que la phosphrylation?
Quels sont ses 2 effets?
= modification post-traductionnelle
= Ajout de Pi sur le grpmt OH d’une chaîne latérale (kinase) ou retrait d’un grpmnt Pi (phosphatase)
→ effet d’activation/désactivation varié selon la protéine
→ création/suppression de sites de liaisons entre protéines/ ligands
= effet sur relation prot-partenaire
→ création de site actif sur une enzyme qui n’était pas présent avant
= effet sur la prot
