Cours 4 Flashcards

1
Q

Quelle est la limite de ce qu’on peut voir à l’oeil nu?

A

100 micromètres, soit le diamètre d’un cil en bas des yeux.

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2
Q

Quelle est la taille d’une bactérie?

A

1 micromètre (micron).

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3
Q

Quelle est la taille d’une petite molécule?

A

1 nanomètre.

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4
Q

Quels sont les deux mécanismes qui nous permettent de voir la couleur?

A

1- Transmission; la lumière passe à travers les objets (translucides).
2- Réflexion; la lumière rebondit sur les objets

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5
Q

Qu’est-ce que la transmission nous dit, et qu’est-ce qu’elle ne nous dit pas?

A

La transmission nous dit quelles couleurs sont absorbées, mais ne dit rien sur le relief de l’objet.

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6
Q

Pourquoi est-il mieux de voir par réflexion que par transmission?

A

Parce que la réflexion nous renseigne sur l’absorption des couleurs par l’objet ainsi que sur le relief de la surface.

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7
Q

Distinguez optique et électronique.

A

Optique : photons (lumière)

Électronique : électrons.

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8
Q

Qu’est-ce qui fait qu’une loupe génère une image virtuelle plus grande (2)?

A

1- Le changement d’indice de réfraction entre l’air et le verre fait sortir l’image de la loupe avec un angle un peu différent
2- La courbure de la loupe

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9
Q

Qu’est-ce que l’Ouverture Numérique d’un objectif?

A

C’est l’angle de sortie des rayons lumineux, et celui qui définit la taille de l’image virtuelle.

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10
Q

Plus l’Ouverture numérique est grande, plus l’image est ___.

A

agrandie.

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11
Q

À quoi sert l’objectif d’un microscope? On le choisit en fonction de quelle caractéristique?

A

À remettre droite la lumière qui a été réfractée par l’échantillon. On choisit l’objectif en fonction de l’Ouverture Numérique, pour avoir le plus de lumière récupérée possible.

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12
Q

Pour l’objectif est puissant, plus son ouverture numérique est ___ (il est ___ de l’échantillon).

A

grande, proche.

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13
Q

À quoi sert le condensateur d’un microscope?

A

Il permet d’augmenter l’Ouverture Numérique effective du microscope (jusqu’à 2x).

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14
Q

Où se situent l’objectif, le condensateur et l’oculaire?

A

1- Le condensateur est placé entre la source lumineuse et l’échantillon; il focalise les rayons sur l’échantillon, qui sont ensuite déviés par celui-ci
2- L’objectif est situé au-dessus de l’échantillon, et il va récupérer les rayons et les refocaliser (être remis droits)
3- L’oculaire, au sommet, reçoit les rayons droits (ceux qui entreront dans l’oeil)

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15
Q

Qu’est-ce que la diffraction?

A

C’est le comportement des ondes lorsqu’elles rencontrent un obstacle ou une ouverture (la lumière est déviée par l’obstacle)

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16
Q

Quand est-ce que la diffraction se produit?

A

Lorsque la taille des objets est similaire à la longueur d’onde; la diffraction va se produire à l’endroit où la lumière essaiera de passer à côté de l’objet.

17
Q

Pourquoi la diffraction est-elle un problème?

A

Car elle nous empêche de voir les contours de l’objet de façon vraiment nette; elle limite la résolution du microscope.

18
Q

Qu’est-ce que la résolution d’un microscope?

A

La séparation minimale pour voir 2 points comme étant distincts.

19
Q

De quoi la distance minimale dépend-elle?

A

Elle dépend de la longueur d’onde et de l’Ouverture Numérique; plus la longueur d’onde est petite (bleu), plus on peut observer des détails fins dans l’image.
Dans des conditions parfaites, elle correspond environ à la longueur d’onde divisée par 2.

20
Q

Quelle est la valeur maximale du NA pour les objectifs secs et à huile?

A

1 pour des objectifs secs

1.4 pour des objectifs à huile (permet de voir des détails plus fins)

21
Q

Quels sont les trois astuces pour mieux voir?

A

1- Augmenter l’angle
En augmentant la taille de l’objectif et en le rapprochant
2- Augmenter l’indice de réfraction
En utilisant une huile d’immersion
3- Diminuer la longueur d’onde
En utilisant une plus petite longueur d’onde (couleur plus bleue)

22
Q

Décrivez l’utilisation des microtomes pour faire des échantillons minces.

A

Nécessitent la fixation, la déshydratation et l’enrobage
- On va enrober l’échantillon dans de la résine ou de la paraffine, puis on va utiliser une lame extrêmement fine pour faire des tranches qui vont être de l’ordre d’une centaine de microns
Désavantage : comme on doit d’abord le traiter chimiquement pour tuer et fixer les structures (fixation), on n’observe pas leur structure originelle.

23
Q

Décrivez l’utilisation des cryostats pour faire des échantillons minces.

A

Nécessitent la congélation de l’échantillon

  • On veut rendre l’échantillon plus solide en le congelant; permet de garder la structure davantage que la méthode des microtomes
  • Toutefois, quand on congèle, on détruit quand même plusieurs structures de la cellule
  • On tranche finement ici aussi
24
Q

Pourquoi est-ce difficile d’observer une image à faible contraste?

A

Car les cellules sont composées essentiellement d’eau et on les observe dans un milieu aqueux; même indice de réfraction donc on voit très mal.

25
Q

Comment peut-on améliorer le contraste (2 façons)?

A

1- Coloration sélective

2- Traitement d’image

26
Q

Comment fonctionne la coloration sélective?

A
  • On veut colorer les cellules pour pouvoir les observer par transmission
  • On va les modifier pour qu’elles puissent absorber certaines longueurs d’onde
  • Dans la cellule, on va colorer certaines parties des tissus pour que chaque composante soit d’une différente couleur
27
Q

Comment fonctionne le traitement d’images?

A
  • Soustraction d’arrière-plan
  • Égalisation d’histogramme (ici, on ne rajoute rien à l’image)
  • Déconvolution (filtres qui rendent l’image plus nette)
28
Q

Quels sont les 4 types de microscopes qui utilisent les propriétés de la lumière pour améliorer le contraste sans colorant?

A

1- Microscope à fond noir
Joue sur la déviation/réfraction de la lumière
2- Microscope à contraste de phase
Joue sur les phases de la lumière
3- Microscope à polarisation
4- Microscope à Contraste d’Inférence Différentielle
Joue sur la polarisation de la lumière

29
Q

Qu’est-ce que la fluorescence?

A

C’est l’émission de la lumière d’une couleur suite à l’excitation d’une molécule par une autre couleur.

30
Q

Vrai ou faux? La résolution du microscope confocal est supérieure.

A

Vrai.