Cours 4 Flashcards

1
Q

donnez le montage d’un microscope à fluorescence simple?

A
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Q

quels sont les outils pour scanner toute la surface de l’échantillon?

A
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3
Q

pourquoi on filtre 2 fois la fluorescence?

A
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4
Q

donnez le montage d’un microscope à fluorescence confocal?

A

laser –> miroire dichroique –> polariseur (milieu biréfringent) –> lentille de focalisation –> objectif –> échantillon –> lentille l2 (extinctrice de faisceau) –> pinhole –> filtre d’émission –> détecteur (photomultiplicateur ++ important)

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5
Q

pourquoi le laser comme source de lumière?

commet choisir son fluorochrome (critères)?

A
  • monochromatiques

- plusieurs types de lasers chacun a une long d’onde

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6
Q

donnez le nom du filtre qui nous permet de séparer les longueurs d’onde ?
qu’est ce qu’il fait?
+ nom du filtre alternatif au dicroique?
donnez ses 4 caractéristiques par rapport au dicroique?

A

acusto-optical tunabel filter AOTF
c’est un cristal qui avec une onde acoustique permet de séparer la lumieures en plusieurs longueurs d’ondes de façon que chaque direction correspondera a une longueuere d’onde.
- selon la fréquence de l’onde acoustique j’aurai une différents longueur d’onde.
- possibilitéde selectionner jusqu’à 8 raies et moduler leurs intensitées.
2/ fitre acusto_optique beam splitter AOBS
- remplace le filtre dichroique qui a une bande de longueur d’onde fixe.
- grande flexibilité et efficacité
- permet de réduire l’intesité du laser si souhaité t une aquisition rapide
- Controller jusqu’à 8 raies simultanément

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7
Q

quels sont les systèmes de balayage disponibles ? leurs caractèristiques?
quand est ce que’on utilise l’un par rapport à l’autre?

A

1/ miroire galvanométrique :
a/ balayage en xy
deux miroires qui bougent graçe a des moteurs galvanométrqiues (électriques)
balayage en x continue
balayage en y incrémenté
très rapide
b/ balayage en z
en bougenat l’objectif
miroire : Z drive qui a une grande amplitude, et precission de 10 nm
Objectif piezo : faible amplitude mais grande precission
en bougeant la platine
miroire : grande amplitude et precission
piezo: faible amplitude grande precission.

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8
Q

comment est fait le balayage en xy?

- celui en Z?

A
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9
Q
lorsque on à 
d<0,7 AU
d>1 AU 
section optique est ?
donnez 2 résultats ?
section optique --> X --> X
A

d<0.7 unités d’aray
la résolution est elevé => la section optique est faible => la résolution en Z est elevé => le signal récupéré est faible.

d> 1 AU
résolution faible ; section optique épaisse => résolution faible en Z => signal élevé

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10
Q
donnez deux types de détecteurs et leurs rendements?
- définir 
le gain
image
offset
résolution
moyennage
accumulation
A

le gain = le fait d’amplifier le signal d’entré pour augmenter la luminosité de l’image

  • image = ensemble de pixels chacun a une coordonnées et une intensité
  • offset = permet d’enlever le bruit de fond de l’image
  • résolution: nombre de pixels
  • moyennage= une technqiue qui permet de calculer la moyenne arythmiques de chaque valeurs d’intensités de chaque pixel et cela améliore le rapport signal/bruit
  • accumulation : amélioration du signal faible
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11
Q

que est ce qu l’optique non liniaire?

A
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12
Q

section efficace de monophotonique Vs biphotonique.? chiffres

A
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13
Q

loi de probabilité d’absorption biphotonique?

- quels sont les conditions necessaires pour l’absorption biphotonique? deux

A
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14
Q

avantages de la microscopie à 2 photons ?

if not sur try hints on answers because this part is important!

A

SLI => 3 avantages

ABP => 3 avantages

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15
Q

quels est l’air de la courbe de abs mono et bi photonique de l’intensité de fluorescenece en fonction de l’intensité d’excitation?
donnez le rapport intensité de fluorescence et I excitation?

A
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