cours 3

Question 1

quel est l’inconvénient des techniques basées sur le microscope optique pour apprécier les viabilité cellulaire?

Answer 1

entraîne souvent une sous estimation de la fraction de cellules mortes car les phases précises peuvent être accompagnées de changement morphologique discret

Question 2

quel est le principe du test MTT ?

Answer 2

mesurer les activités liées au maintien cellulaire et à la survie, ici l’activité mitochondrial
( montre par coloration ou fluorescence la densité de cellules vivantes )

Question 3

comment le taux d’ATP peut il être analysé ?

Answer 3

par des bio marqueurs métaboliques

Question 4

quel est le principe du test d’accumulation du rouge neutre ?

Answer 4

color les lysosomes des cellules vivantes

Question 5

que colore le bleu trypan ?

Answer 5

il se diffuse dans les cellules mortes

Question 6

comment fonctionne l’iodure de propidium ?

Answer 6

c’est un fluorochrome qui se diffuse uniquement au travers des membranes plasmiques des cellules morte qui donne une fluorescence rouge

Question 7

quel est le principe du test LDH ?

Answer 7

dosage de LDH qui est un enzyme cytosolique que les cellules mortes libère donc permet de doser les cellules mortes

Question 8

comment peuvent être détectées simultanément les cellules mortes et vivantes ?

Answer 8

par l’utilisation de deux colorant qui permettent de mesurer en parallèle l’activité métabolique des cellules vivantes et la perte d’intégrité de la membrane plasmique des cellules morte

Question 9

quelles sont les techniques de séparation de divers types de cellules ?

Answer 9

immunopanning :
méthode de séparation des motoneurones embryonnaires
méthode de purification avec présence de récepteurs à basse affinité au NGF (p75)
c’est après l’incubation qu’on va pouvoir éliminer le surnageant

tri magnétique :
méthode de séparation des motoneurones embryonnaires
même principe que celui d’avant juste on a rajouter des billes magnétiques sur les Ac anti p75
donc grâce à un champ magnétique les cellules coupler avec l’Ac sont retenus

elutriation :
technique qui utilise la taille des cellules pour les séparer grâce à une chambre d’élutriation avec une force centrifuge et la force du flux qui font que les cellules se place à l’équilibre

par adhésion

en fonction du milieu de culture