Cours 2 - Canaux ioniques Flashcards
Dans le montage de voltage imposé, quel appareil rend le potentiel de membrane identique au voltage imposé par rétroaction?
Amplificateur de stabilisation
À quoi est dû le courant capacitif observé suite à un changement de voltage?
Réorganisation de charges des deux côtés de la membrane
Quel ion est responsable du courant entrant transitoire?
Entrée de sodium
Quel ion est responsable du courant sortant retardé?
Sortie de potassium
Quelle est la caractéristique du courant à l’équilibre?
Le courant est nul
Vm = E ion
(E = équilibre électrochimique ion)
I ion = g ion * (Vm - E ion)
Qu’est-ce que représente la conductance ionique (g ion)?
Le flux ionique à travers les canaux ouverts
Comment varie la conductance ionique en relation avec le voltage?
Plus le voltage augmente, plus on dépolarise, plus de canaux sont ouverts, plus le flux ionique augmente
DONC: conductance augmente
De quoi dépend le flux ionique?
- Quantité de canaux ioniques ouverts
- Conductance unitaire des canaux
Quelle technique permet l’enregistrement de canaux ioniques individuels?
Patch-clamp
Permet de mesurer le flux ionique pour ce canal
Quelle observation peut-on faire lorsqu’on enregistre des canaux sodiques en patch-clamp?
- Reflète ce qu’on obtient en voltage imposé classique, donc prouve que ce qui est observé en patch-clamp est sous-jacent au voltage classique
- Ouverture transitoire
Quel est le principe de base d’ouverture et de fermeture des canaux sodiques?
- Ouverture rapide
- Inactivation
- Fermeture lorsque retour au potentiel initial
Quel est le principe de base d’ouverture et de fermeture des canaux potassiques?
- Long délai d’ouverture
- Durée d’ouverture plus longue
- Pas de mécanisme d’inactivation
Bref: cinétique d’activation plus lente
Donner deux exemples de fonctions nécessitant des éléments structuraux spécifiques.
- Détecteur de voltage
- Pore sélectif
Quel est le rôle des conductances sodiques et potassiques dans le PA?
- Sodique: responsable de la phase montante (entrée de sodium)
- Potassique: responsable de la repolarisation (sortie de potassium)
De quoi dépend l’excitabilité des neurones?
Du complément de canaux exprimés
Quelles sont les différences entre les composantes sodiques et potassiques?
Potassique:
- Délai d’activation identique peu importe l’intensité de la dépolarisation
- Reste actif durant toute la durée de la dépolarisation
Sodique:
- Ouverture plus rapide quand dépolarisation plus grande
- Conductance maintenue pendant seulement quelques secondes
Quelle propriété est similaires pour les composantes sodiques et potassiques?
Sensibilité au voltage similaire: plus on dépolarise, plus la conductance augmente
Comment peut-on calculer la durée de l’inactivation sodique?
Dépolarisations successives: déterminer le laps temps entre 2 dépol. pour que les conductances sodiques aient la même amplitude
Vrai ou Faux: la durée de l’inactivation est la même pour tous les types de canaux sodiques
Faux: différente pour différents types de canaux
Sachant que l’ion Na est plus petit en taille que le K, lequel des pores de leur canal respectif est le plus petit?
K -> à cause de la sphère d’hydratation de Na qui est plus grosse
Quel est le rôle de l’hydratation dans la perméabilité sélective?
Pores des canaux sont faits pour accommoder la grosseur d’une sphère d’hydratation spécifique (pas la taille de l’ion, la taille de l’ion entouré de sa sphère)
Quelle méthode a été utilisée pour analyser l’ouverture « Tout ou rien » des canaux ioniques?
Bicouche lipidique artificielle
Décrire le montage pour obtenir une bicouche lipidique artificielle.
- Appareil de V imposé
- 2 compartiments remplis de sln aqueuse séparés
- Trou entre les 2 compartiments bouché par des lipides
- Ajout de canaux qui viennent s’insérer dans la bicouche
Quelle est l’utilité de la bicouche lipidique artificielle?
Permet d’identifier les caractéristiques du canal d’intérêt:
- conductance ionique unitaire
- flux ionique
Expérimentalement, quelle mesure nous permet de déterminer quels ions passent à travers un canal?
Mesure du potentiel d’équilibre
Pourquoi dit-on que l’ouverture des canaux ioniques est « tout ou rien »?
Canal devient ouvert uniquement lorsque tout est parfaitement aligné ; pas d’entre deux
Quelle méthode permet d’étudier les caractéristiques des canaux ioniques dans le contexte de cellules entières?
Patch-clamp ; enregistrement cellule entière
Quel type de technique patch-clamp doit-on utiliser pour tester l’influence d’un messager intra-cellulaire sur le fonctionnement d’un canal?
Inside-out
Quel type de technique patch-clamp doit-on utiliser pour tester des molécules qui pourraient influencer les domaines extra-cellulaires d’un canal?
Outside-out
Quel type de technique patch-clamp permet d’exposer l’intérieur du canal au milieu extra-cellulaire?
Inside out
En étudiant des récepteurs ACh en mode cellules entières, qu’a-t-on pu constater? (Pipette contenant ACh donc canal activé)
- Conductance du canal est fixe (unitaire): si on ne change pas le potentiel, le courant est toujours le même
- Le passage d’ouvert à fermer est instantané
Qu’est-ce qu’un canal ohmique?
Canal qui suit la loi d’Ohm de façon linéaire ; flux ionique proportionnel dans les deux sens
Qu’est-ce qu’un canal à rectification?
Courant plus faible dans un sens que dans l’autre
Quel est la différence entre un canal à rectification entrante versus sortante?
Entrante: I entrant > I sortant Sortant: I sortant > I entrant (I = courant)
Le canal NMDA subit quelle sorte de rectification?
Rectification sortante
Pourquoi est-ce que le canal NMDA est-il un canal a rectification sortante?
- Pas de Mg: linéaire
- Mg: plus c’est négatif, plus le pore ionique est bloqué par le Mg (négativité intracellulaire attire Mg)
Quel est un exemple de canaux à rectification entrante?
Canaux potassiques à rectification entrante
Comment fonctionnent les canaux potassiques à rectification entrante?
Spermine: canal interagit avec polyamine intracellulaire chargée positivement
Interaction avec sites chargés négativement lorsque le potentiel est positif (blocage)
Quelles sont les trois possibilités de mécanismes de changement de conformation menant à l’ouverture du canal?
1 : Changement de conformation localisé à une des régions du canal
2 : Changement de conformation généralisé qui se produit sur toute la longueur du canal
3 : Une particule bloquante vient se placer à l’ouverture du canal (s’enlève à l’ouverture)
Quel sont des mécanismes induisant l’ouverture de canaux?
- Liaison d’un ligand extracellulaire
- (Dé)Phosphorylation d’un ligand extracellulaire
- Changement de voltage
- Tension/pression
Quels sont les deux types de sites visés par la régulation pharmacologique de l’activation des canaux ioniques?
- Site orthostérique
- Site allostérique
Qu’est-ce qu’un site orthostérique?
Site de liaison principal de l’agoniste