Cours 1 Flashcards
Pourquoi modifier le génome?
Corriger des gènes défectueux. Il existe beaucoup trop de maladies héréditaires dues à des mutations dans des gènes. Certaines mutations entrainent des immunodéficiences sévères.
Comment fonctionne la thérapie génique conventionnelle ?
. C’est une méthode qui insère la correction au hasard et ça ne corrige pas tous les problèmes.
Comment fonctionne la thérapie génique par édition ?
Le gène muté est coupé et remplacé par un gène normal. Cela est inséré à un endroit précis et évite la cohabitation de gènes.
Quels sont les types de thérapies géniques conventionnelle?
Théorie par compensation d’un gène défectueux
Théorie par inhibition d’un gène défectueux
Thérapie génique in vivo
Thérapie génique ex vivo :
Comment fonctionne la Théorie par compensation d’un gène défectueux?
Cellule avec un gène muté, non fonctionnel ou pas suffisamment fonctionnel + un ajout d’un gène fonctionnel ce qui résulte en une cellule exprimant la protéine mutante et la protéine normale.
Comment fonctionne la théorie par inhibition d’un gène défectueux ?
Cellule avec un gène produisant une protéine mutante toxique + un gène bloqueur ce qui fait en sorte que le gène bloqueur empêche l’expression du gène mutant ce qui résulte à une cellule fonctionnelle normale.
Comment fonctionne la Thérapie génique in vivo ?
Utilise virus qui transporte matière génétique vers les cellules du patient. Ce qui est un transfert direct, local et systémique. Virus majoritairement utilisés : rétrovirus et adénovirus. Il y a toujours un risque associé à l’intégration dans le génome car ce n’est pas une région ciblée, mais au hasard.
Comment fonctionne la Thérapie génique ex vivo ?
: Isolé des cellules d’un donneur ou du patient même pour amplifié par in vivo en cellules pour corriger la mutation pour finalement réinsérer le gène fonctionnel par thérapie conventionnel. Cela est un transfert indirect pour modification de cellules hématopoïétiques et l’expansion.
Quels sont les enjeux de la thérapie génique conventionnelle?
- Faisable avec la technologie existante
- Limites comme l’expression, la durée de l’effet thérapeutique et si l’intégration va perturber le fonctionnement du génome
- Résultats décourageants pour certaines maladies
Quel est le principe de la mutagénèse dirigée dans le génome CRISPR?
- L’endonucléase Cas9 (streptococcus pyogenes) est exprimée avec un signal de localisation nucléaire.
- Un ARN guide permet de cibler Cas9 sur une séquence du génome particulière.
- Cas9 déshybride l’ADN et coupe les deux brins avant le site PAM (proto-spacer adjacent motif, 5’-NGG-3’).
- Deux types de recombinaison possibles: a. NHEJ: Indel b. Recombinaison homologue
L’ARN guide comporte la séquence cible et l’échafaud qui est la partie constante qui permet à ce que Cas9 se lie à l’ADN.
Quelles sont les deux méthodes de correction d’un gène ?
1- Inactiver un gène pathogénique
2- Correction d’un gène par recombinaison homologue
3- Addition d’un gène par recombinaison homologue : Introduire un gène thérapeutique
Quelle est la solution pour modifier toutes les cellules de l’organisme?
Éditer les embryons
Quelles sont les 3 étapes d’édition génomique dans les zygotes?
1 ) Fécondation
2 ) CRISPR
3 ) Mutation chez la souris
Quelle est la nouvelle technique dans le CRISPR chez les zygotes humains viables qui permet de minimiser l’effet mosaique?
Injecte CRISPR et le spermatozoide en même temps, c’est plus rapide, aucun WT, pas d’effet mosaique.
Quelles sont les différences entre CRISPR conventionnel et intégratif?
Conventionnel : Hérédité mendélienne de l’allèle mutée , 50%/50%
Intégratif : Hérédité non mendélienne , 100% des allèles X soient mutées.
