Control of gene expression I Flashcards

1
Q

Hvorfor blir celletyper i en multicellulær organisme forskjellige fra hverandre?

A

Fordi de syntetisere og akkumulerer ulike sett av RNA og protein-molekyler.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Gi et eksempel på et protein som kun finnes i spesialiserte celler

A

Hemoglobin - som kun uttrykkes i røde blodceller - bærer oksygen.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Hvilket eksperiment ble utført for å bevise at celler syntetiserer og akkumulerer ulike RNA og proteiner uten å endre DNA-sekvensen sin?

A

I et forsøk med frosk ble kjernen til en fullstendig differensiert froskecelle injisert i et froskeegg hvor kjernen hadde blitt fjernet, og den injiserte donorkjernen var kapabel til å styre mottakeregget til å produsere et normalt rumpetroll. Ettersom rumpetrollet inneholder et fullt spekter av differensierte celler, hvor hver av dem er utledet fra DNA-sekvensen i kjernen til donor-hudcellen, betyr det at differensierte celler ikke kan ha mistet noen viktige DNA-sekvenser.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hvordan kan man bruke mRNA til å identifisere celletyper?

A

Hver celle produserer et karakteristisk sett av mRNA. Så, hvis alle mRNA i en celle er kjent, kan celletypen bli identifisert ved å anvende tidligere kunnskap fra cellelinjer eller analyser av vev. Denne tilnærmingen er mulig på grunn av evnen til å bestemme nukleotidsekvensen til alle mRNA som produseres av en enkelt celle.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Hvilke genprodukter har ofte alle celler felles?

A

Strukturelle proteiner for kromosomet, RNA- og DNA-polymeraser, DNA-repair enzym, ribosomale proteiner og RNA, enzymer som katalyserer de sentrale reaksjonene i metabolismen, og mange av proteinene som danner cytoskjelettet - slik som actin.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvorfor vil transkripsjonsregulatorer binde seg til DNA i nukleosomer med lavere affinitet enn til nakent DNA?

A

(1) overflaten av den cis-regulatoriske sekvensen som gjenkjennes av transkripsjonsregulatoren kan peke innover på nukleosomet, mot histonkjernen, og derfor ikke være lett tilgjengelig for regulatorproteinet.

(2) selvom overflaten på den cis-regulatoriske sekvensen er eksponert på utsiden av nukleosomet, endrer mange transkripsjonsregulatorer subtilt konformasjonen når de binder seg, og disse endringene er vanligvis motarbeidet av den tette pakkingen av DNAet rundt histonkjernen.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvordan blir de fire ulike basene skilt fra hverandre når de er i kromosomet?

A

Kantene av hvert basepar har ulike mønster av hydrogenbånd-donorer og -akseptorer, og hydrofobe “patches” i både major og minor groove.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hvorfor danner mange transkripsjonsregulatorer dimere?

A

De danner dimere for å øke affiniteten og spesifisiteten de binder seg med. Når man danner dimere - som er dobbel lengde av en monomer - vil man minske antall tilfeldige sekvenser som regulatoren kan binde seg til, dermed økt spesifisitet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hva er en transkripsjonsregulator?

A

Transkripsjonsregulatorer kjenner igjen spesifikke DNA-sekvenser som ofte kalles cis-regulatoriske sekvenser, fordi de må være på samme kromosom som genet de kontrollerer. TRanskripsjonsregulatorer binder seg til disse sekvensene, og bindingen setter igang en rekke reaksjoner som spesifiserer hvilke gener som skal transkriberes og ved hvilken hastighet.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Ved hvilke 7 trinn kan en celle kontrollere proteinene den lager?

A

(1) Transkripsjonell kontroll: kontrollere når og hvor ofte et gitt gen blir transkribert (det eneste trinnet som forhindrer at cellen produserer overflødige mellomprodukter)

(2) RNA-processing control: kontrollere splicing og prosessering av RNA-transkripter

(3) RNA transport og lokaliseringskontroll: velge ut hvilke komplette mRNA som blir eksportert fra kjernen og til cytolsol, og bestemme hvor i cytosol de blir lokalisert

(4) Translasjonell kontroll: velge ut hvilke mRNA i cytoplasma som blir translatert av ribosomer

(5) mRNA degraderingskontroll: selektivt destabilisere visse mRNA-molekyler i cytoplasma

(6) Proteindegraderingskontroll: selektivt degradere spesifikke proteinmolekyler

(7) Proteinaktivitetskontroll: aktivere, inaktivere, eller lokalisere spesifikke proteinmolekyler

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hva er en pioneer faktor?

A

Det er en regulator som kan binde seg med nesten samme affinitet som til nakent DNA, og okkupere bindingssete mens DNAet enda er tett pakket rundt histonkjernen.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hvorfor er det positivt at transkripsjonsregulatorer kan “binde seg” med svært lav affinitet til alle DNA-sekvenser?

A

De kan da “scanne” sekvensen etter sitt komplementære fragment. Hvis regulatoren finner sitt komplementære fragment kan det binde seg, og hvis ikke kan det raskt dissosiere.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Hva er et operon?

A

Et operon er en koordinert transkribert gruppering.
Flere gener er organisert i en gruppe på kromosomet, og blir transkribert ut ifra en enkel promotor.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Hvordan påvirker tryptofan-konsentrasjonen E.coli?

A

Når det er lav konsentrasjon av tryptofan vil operonet bli transkribert, og det resulterende mRNAet blir translatert til å produsere et fullt sett av biosyntetiske enzymer som jobber sammen for å syntetisere tryptofan fra enklere molekyler.
Når det er høy konsentrasjon av tryptofan, vil aminosyren bli importert inn i cellen og stenge ned produksjonen av enzymene som det ikke lenger er behov for.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Hvordan blir lac-operonet regulert?

A

Lac-operonet blir kontrollert av både Lac-repressoren, og CAP-aktivatoren. Lac-operonet koder for proteiner som kreves for import og fordøyelse av laktose. I fravær av glukose, vil E.coli lage cAMP, som aktiverer CAP til å skru på gener som tillater at cellen anvender alternative kilder til karbon. Likevel ville det vært bortkastet for CAP å indusere ekspresjon av lac-operonet hvis laktose ikke er tilstede. Derfor er lac-operonet kun uttrykt når to kriterer er oppfylt: glukose må være fraværede og laktose må være tilstede.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Hvilke 4 tilstander finner vi lac-operonet i?

A

(1) Når glukose og laktose er tilstede, er opreonet av.
(2) Når glukose er tilstede og laktose fraværende vil lac-repressoren binde seg og operonet er av.
(3) Når glukose og laktose er fraværende vil CAP-aktivatoren og lac-repressoren være bundet slik at operonet er av.
(4) Når glukose er fraværende og laktose er tilstede, vil CAP-aktivatoren binde seg og operonet er på.

11
Q

Hvordan kan CAP-proteinet også fungere som en repressor?

A

Hvis bindingssetet for proteinet overlapper promotoren, vil proteinet forhindre binding av RNA-polymerasen, og dermed fungere som en repressor.

12
Q

Hvordan binder co-aktivatorer og co-repressorer seg til DNA?

A

Disse proteinene binder seg ikke direkte på DNAet, slik som de “originale” aktivatorene og repressorene. Istedenfor binder de seg med spesifikke interaksjoner til de DNA-bundne transkripsjonsregulatorene.

13
Q

Hva er funksjonen til “mediatoren”

A

Mediatoren fungerer som en bro mellom DNA-bundne transkripsjonsaktivatorer, RNA-polymerase, og de generelle transkripsjonsfaktorene, og styrer deres samling på promotoren.

14
Q

Hva er de viktigste måtene for å lokalt endre kromatinet?

A

(1) Kovalent histon-modifikasjon
(2) Nukleosom-remodellering
(3) Nukleosom-fjerning
(4) Histon-erstatning

15
Q

Hva er “trancriptional synergy”?

A

Når flere DNA-bundne aktivatorproteiner jobber sammen for å produsere en transkripsjonshastighet som er mye høyere enn summen av deres transkripsjonshastighet alene. Når flere proteiner jobber sammen, blir deres bidrag multiplisert sammen.

16
Q

På hvilke måter kan man frigjøre en “paused RNA polymerase”?

A

(1) Den nye aktivatoren bringer med seg et kromatin remodelleringskompleks som fjerner en nukleosomblokk til den forlengende RNA-polymerasen.
(2) Aktivatoren kommuniserer med RNA-polymerase (vanligvis via en koaktivator) som signaliserer at den skal gå videre.
(3) RNA-polymerase krever “elongation factors” for å effektivt transkribere gjennom kromatin. I noen tilfeller er nøkkeltrinnet i genaktivering den forsinkede lastingen av disse faktorene til RNA-polymerase, styrt av DNA-bundne transkripsjonsaktivatorer. Når de er lastet, tillater disse faktorene at polymerasen beveger seg gjennom blokker pålagt av kromatinstrukturen for å begynne å transkribere genet effektivt.

17
Q

Hva er en “insulator”?

A

Det er et DNA-element som forhindrer cis-regulatoriske sekvenser fra å gå amok og aktivere upassende gener. Insulator-sekvenser fungerer ved å danne løkker av kromatin. Løkkene er ment å holde genet og dets kontrollregion tett sammen, og å bidra til å forhindre at kontrollregionen “spill over” til nærliggende gener.

18
Q

Hvordan er cellehukommelse forskjellig mellom prokaryoter og eukaryoter?

A

Når en celle forplikter seg til differensiering av en spesiell type celle, vil cellen holde seg til dette i flere generasjoner. Hos prokaryoter vil derimot et gen kun skru seg av ved tilstedeværelsen av et substrat, og når substratet fjernes vil gener skrus på igjen.

19
Q

Hvilke måter finnes for å kontrollere aktiviteten til transkripsjonsregulatorer inne i eukaryote celler?

A

(1) Proteinsyntese
(2) Ligandbinding
(3) Kovalent modifikasjon
(4) Tillegg av en subenhet
(5) Unmasking
(6) Stimulering av nukleær entry
(7) Frigjøring fra membranen

20
Q

Hva innebærer kombinatoriell kontroll?

A

Det innebærer at transkripsjonsregulatorer ikke kun har én spesifikk oppgave. De kan fungere som ord i et språk: de brukes med ulik mening i en variert kontekst og sjeldent alene; det er den velvalgte kombinasjonen som formidler informasjonen som spesifiserer en genregulatorisk handling.

21
Q

Hva er iPS celler?

A

iPS står for “induced pluripotent stem cells”. Det er celler som ser ut som og som oppfører seg som pluripotente embryone stamceller som blir utledet fra embryoer. Når tre spesifikke transkripsjonsregulatorer blir kunstig uttrykt i mus-fibroblaster, blir et antall av dem iPS celler.
Det er et eksempel på at kunstig manipulasjon av transkripsjonsregulatorer kan få differensierte celler til å de-differensiere til pluripotente celler som er kapable til å gi opphav til de ulike celletypene i kroppen.

22
Q

Hvordan kan en enkel transkripsjonsregulator raskt kontrollere ekspresjonen av mange ulike gener?

A

For at glukokortikoid-reseptorproteinet skal kunne binde seg til den cis-regulstoriske sekvens i genomet, må det først danne et kompleks med et molekyl av et glukokortikoid-steriodhormon. Kroppen frigjør hormonet under sult eller ved intens fysisk aktivitet, og blant sine andre aktiviteter, stimulerer hormonet leverceller til å øke produksjonen av glukose fra aminosyrer og andre små molekyler. For å kunne respondere på denne måten, øker leverceller ekspresjon av mange ulike gener som koder for metabolske enzymer, slik som tyrosin-aminotransferase. Selvom disse genene har ulike og komplekse kontrollregioner, er deres maksimale ekspresjon avhengig a bindingen av hormon-glukokortikoid reseptorkomplekset til sin cis-regulatoriske sekvens, som er tilstede i kontrollregionen til hvert gen. Når kroppen har hentet seg inn og hormonet ikke lenger er til stede, faller ekspresjonen av hvert gen til normale nivåer i leveren.

23
Q

Hva betyr “terminally differentiated”?

A

Når en celle har differensiert seg, vil den vanligvis forbli differensiert. Dette gjelder også alle dens avkomsceller. Men noen svært spesialiserte celler, slik som muskelceller og neuroner, deler seg aldri igjen etter de har blitt differensiert, og de er da “terminally differentiated”.

24
Q

Hvordan kan celler forsikre seg om at dattercellene “husker” hva slags celle de er?

A

Gjennom en positiv feedback-loop hvor a master celletype transkripsjonsregulator aktiverer transkripsjon av sitt eget gen, i tillegg til transkripsjon av de andre celletype-spesifikke genene som trengs for å opprettholde en celletype. Hver gang en celle deles, blir regulatoren fordelt til begge datterceller hvor den fortsetter å stimulere den positive feedback-loopen og lage mer av seg selv og de celle-spesifikke proteinene den kontrollerer hver deling.