Communicateur CanMED

Question 1

Le traitement des spécimens en laboratoire de pathologie implique:

Answer 1

• Plusieurs manipulations (du prélèvement jusqu’à l’envoie du rapport)- Plusieurs intervenants (médecins, infirmières, techniciens, pers. administratif)

Question 2

Des erreurs peuvent survenir à chacune des étapes de ce processus, risquant :

Answer 2

• résultats cliniques graves pour les patients- problèmes médicolégaux pour le personnel impliqué

Question 3

Quels sont les spécimens fréquemment impliqués dans les erreurs d’identification?

Answer 3

biopsies sein, gynéco, prostate

Question 4

Classifications (4) des erreurs

Answer 4

• Livraison
• Étiquetage des lames
• Confusion des spécimens ou des lames
• Rédaction et gestion des rapports

Question 5

Donnes des exemples d’erreurs liées à la livraison avant l’arrivée au service de patho.

Answer 5

• Étiquetage des contenants• Renseignements cliniques incomplets ouambigus sur la requête• Perte de spécimens chirurgicaux

Question 6

Donnes des exemples d’erreurs liées à la confusion des spécimens ou des lames

Answer 6

• par le technicien ou pathologiste• incluant la contamination croisée par des tissus étrangers

Question 7

Donnes des exemples d’erreurs liées à la rédaction et gestion des rapports

Answer 7

• Transposition/duplication (pendant la dictée ou la transcription)• Divergences entre résultat et les donnés cliniques non-reconnues/non-investiguées

Question 8

Nommer les facteurs contributoires aux erreurs d’identification des patients

Answer 8

• Multiples spécimens provenant d'un même patient• Patients similaires:	
* noms	
* #d'identification	
* infos cliniques	
* sites de biopsie
• Contamination croisée :	
* tissus prélevés sur un autre patient	
* tissus prélevés sur un site anatomique différent

Question 9

Quelles sont les considérations (6) en matière de gestion de risque et qui devraient sonner une cloche quant à une erreur d’identification?

Answer 9

• Existe-t-il des politiques et procédures claires dans le milieu concernant la manipulation, l’étiquettage, le traitement et les rapports de pathologie des spécimens de tissu?• Est-ce que la requête de pathologie contient les renseignements cliniques et les données pertinentes sur le spécimen ainsi que les identificateurs exacts du patient?• Les identificateurs du patient sur le contenant du spécimen à examiner correspondent-ils à la requête d’analyse et au rapport final de pathologie?• Ya-t-il correspondance entre les descriptions micro et macro du spécimen?• Les résultats de la pathologie correspondent-ils à l’impression clinique?•Sinon, quelles étapes ont été prises pour résoudre la divergence qui existe (ex: discussion des incohérences avec les autres médecins impliqués avant de donner suite aux résultats)

Question 10

Jusqu’à combien de lames auraient une contamination?

Answer 10

Selon une étude, jusqu’à 3% des lames ont une contamination• ≈1/10 contaminant malin• ≈1/3 présence sur une seule lame (i.e.introduit après mise en paraffine)

Question 11

Quelles sont les situations (3) les plus à risque de contaminations?

Answer 11

• coupes congelées
• coupe des tranches en macroscopie
• coloration

Question 12

Quels sont les indices (4) d’une contamination / erreur d’identification?

Answer 12

• type de prélèvement ne concorde pas avec la procédure
• diagnostic ne concorde pas avec les renseignements cliniques
• trouvaille histologique non-suspectée
• diagnostic très improbable selon le clinicien

Question 13

Quelles sont les étapes pour résoudre les problèmes de contaminants?

Answer 13

• Corrélation clinico-pathologique
• Immunohistochimie
• Tests de biologie moléculaire

Question 14

Décrire les différents points à vérifier pour l’étape 1 Corrélation clinico-pathologique lorsqu’il y a un problème de contaminant

Answer 14

1) Réviser les informations cliniques• Histoire clinique• Procédure chirurgicale• Noteopératoire• Communiquer avec le clinicien:• Quelle lésion a été biopsiée• Ses impressions au moment de la procédure• Éviter d’évaluer uniquement la probabilité du diagnostic.2) Réviser le rapport de macroscopie• Description macroscopique• Notes manuscrites au moment de la macro3) Réviser les étapes du traitement du spécimen• Communiquer avec les techniciens impliqués à chaque étape• Chercher une source de contamination• Évaluer les autres spécimens techniques durant la même période• Identifier une tumeur friable4) Réviser les lames histologiques• Comparer le nombre de fragments décrits, sur le bloc et sur la lame.• Le type de tissu sur la lame correspond-il au site de prélèvement?• Parfois difficile si morpho similaire ou si contaminant malin

Question 15

Décrire les différents points à vérifier pour l’étape 2 Immunohistochimie lorsqu’il y a un problème de contaminant

Answer 15

IHC peut aider si le tissu est présent dans le bloc et dans niveaux profondsAttention : néoplasies malignes peuvent avoir immunophénotype similaire Prévoir une analyse moléculaire subséquente sur le contaminant suspecté Ne pas épuiser le tissu Immunophénotype ABO non recommandé :- anticorps sous-optimaux- artéfacts de coloration- peu discriminatoire

Question 16

Décrire la procédure pour l’étape 3 Biologie moléculaire lorsqu’il y a un problème de contaminant

Answer 16

• Sélectionner les tissus à analyser• ADN du patient : tissu index, tissus antérieurs ou phlébotomie.• Source potentielle de contamination (ou du spécimen inversé)• Une approche standardisée est recommandée• Procédure en checklist• Documenter chaque cas (identifier les sources d’erreur récurrentes)

Question 17

Décrire le polymorphisme

Answer 17

• Aires du génome qui sont différentes entre les individus• Représentent <0,1% à 0,5% de la taille du génome• Probablement responsables de plusieurs différences de phénotype.• Types: Single nucleotide polymorphisms (SNP) Variations du nombre de copies (courtes ou longues séquences) (STR=short tandem repeat)

Question 18

Décrire un SNP (Single nucleotide polymorphisms)

Answer 18

• variante dans les positions de nucléotides uniques• presque toujours bi-alléliques• 6 millions de ces polymorphismes identifiés• la fréquence varie dans chaque population

Question 19

Décrire un STR (short tandem repeat)

Answer 19

• Séquence (2-7 paires de bases) identique, mais répétée un nb variable de fois.• Transmission Mendelienne (1 allèle père, 1 allèle mère)• Est le principal type de polymorphisme utilisé pour les tests d’ADN en clinique.

Question 20

Quelle est l’utilisation des STR?

Answer 20

• Laboratoire clinique : identité, perte d’hétérozygote, instabilité microsatellite• Tests de paternité• Médecine légale *Locus à utiliser pour tests d’identité: ceux avec grands taux de polymorphisme

Question 21

Quelles sont les caractéristiques des STR sélectionnés en médecine légale?

Answer 21

• Forte variabilité dans la pop générale.• Stabilité• Pouvoir de discriminer l’identité de différents individus.

Question 22

L’empreinte génétique en médecine légale est principalement étudiée avec quelle méthode?

Answer 22

« Multiplex PCR assays »

Question 23

Quels sont les problèmes potentiels lors de l’analyse d’empreinte génétique?

Answer 23

• Solvants• Taille de l’échantillon• Contaminants tumoraux

Question 24

Quels sont les effets du formol sur l’ADN?

Answer 24

• Endommage l’ADN via les ponts entre les protéines.• L’ADN est dégradé en fragments de <500 pb de longueur• Durée de fixation >1semaine : presque plus d’ADN utilisable pour les tests moléculaires à base de PCR .• Durée de fixation optimale entre 12-24h

Question 25

Quels sont les effetsdu décalcifiant sur l’ADN?

Answer 25

• Les fixatifs contenant de l’acide (surtout l’acide picrique, Bouin) sont les plus dommageables. • Les contaminants sont le plus souvent retrouvés uniquement sur une lame, donc micro-dissection souvent nécessaire. • Xylène pour retirer sécuritairement la lamelle.