Chapitre 4 : Croissance de microorganismes Flashcards
temps de génération
Temps nécessaire pour que la population double quand le micro-organisme est en phase exponentielle de croissance
Équation de la phase exponentielle de croissance
Nt =N0 x2n
N0 : nombre de bactéries au début de la phase exponentielle de croissance
Nt : nombre de bactéries présentes après un temps t de la phase
exponentielle de croissance
T : intervalle de temps entre N0 et Nt
courbe de croissance
déterminé sur des micro-organismes dans un milieu de culture fermé. nbre de cellules exprimé en lot en fonction du temps
4 phases de la courbe de croissance
Phase de latence : synthèse de nouveaux composants cellulaires pour s’adapter ou réparer
Phase exponentielle : taux de croissance constant, rendement optimal du métabolisme
phases stationnaire : Nombre de cellule viable demeure constant. reproduction arrête, cellules plus petites, soit : épuisement de nutriments, manque d’oxygène, déchets toxiques, densité de population critique.
Phase de déclin : mort à un taux exponentiel
Méthodes pour mesurer la croissance cellulaire
Poids total, dosage chimique d’un composé cellulaire (ex: libérer de l’azote avec de l’acide sulfurique), comptage des cellules
Comment calculer le poids total
Masse de matière humide, masse de matière sèche, filtration sur membrane (filtration puis séchage jusqu’a un poids constant
méthodes comptage de cellules
-au microscope: peut pas différencier cellules mortes et vivantes
-au compteur de particules : passage dans une fenêtre, augmentation de la résistance, variation du voltage et du nombre d’impulsions. peut pas différencier cellules mortes et vivantes
-cytomértie en flux : cellules alignés les uns derrières les autres, longueurs d’ondes excitent les cellules. la fluorescence réfléchie donne de l’information sur le pigment
-comptage direct sur filtre: filtration de cellules au travers d’une membrane noire, marquer les cellules avec des colorants fluorescents. peut différencier les cellules vivantes des mortes
comment compter des cellules vivantes
dilutions en série et un comptage ou dénombrement sur filtre
turbidimétrie
estimation indirecte de la biomasse cellulaire à l’aide d’un spectrophotomètre.
plus de cellules=plus de dispersion lumineuse=moins de lumière détectée
calcul de mesure de l’absorbance A=log(Io/I)
Le Chémostat
culture en continu et maintient des cellules en phase exponentielle. Ajout du milieu stérile à la même vitesse que l’élimination du milieu qui contient les micro-organismes. Présence d’un nutriment limitant. À l’état stable.
état stable ou stationnaire
la concentration cellulaire totale et l’apport en nutriments sont équilibrés
intérêt des chémostat
Apport constant de cellules poussant en phase exponentielle avec un taux de croissance défini. étude de la croissance microbienne à très faibles concentrations en nutriments comme le milieu naturel. Étude des interactions. Microbiologie industrielle et alimentaire
Avantages et inconvénients courbe de croissance
pas de perte de microorganismes, produits peuvent être récoltés a n’importe quel moment, peut être à l’abris de contamination.
phase de latence n’a pas de production, rendement limité phase exponentielle pas maintenue, difficile a stériliser de grands milieux
Avantages et inconvénients chémostat
phase exponentielle maintenue = rendement optimal, produits récupéré au fur et à mesure.
système de régulation est difficile à contrôler, maintient d’une culture pure est difficile
acidophiles, neutrophiles, alkalophiles
acidophiles: 0-5.5
neutrophiles: 5.5-7
alkalophiles : 8.5-11
