Chapitre 3.2 : Séquençage et clonage par PCR Flashcards
Définition :
Séquençage d’un ADN
Détermination de la succession des nucléotides le composant
ddNTP
2’-3’-didésoxyribonucléotides
ddNTP vs dNTP
Les ddNTP ne peuvent pas faire de lien phosphodiestaires à leur extrémité 3’ du au manque d’hydroxyl
RT-PCR
Reverse transcriptase-PCR
Comment on faire un isolement direct de l’ARN par PCR
Étape 1 - Synthèse de l’ADNc à partir de l’ARN, catalysée par des transcriptases inverses
Étape 2 – la PCR : inhiber la réaction de transcription inverse et de détruire/dénaturer le duplex ARN/ADNc par un traitement de ARNase
. Les transcriptases inverses vienne de où?
Les rétrovirus
principale difficulté de la RT-PCR
La contamination des échantillons par de l’ADN génomique