Chapitre 12 Flashcards
Qu’Est-ce que l’hybridation des acides nucléiques et le séquençage d’ADN
- L’appariement d’un brin d’Acide nucléique avec la séquence complémentaire d’un deuxième brin.
- Une opération qui permet d’établir la séquence nucléotidique complète d’une molécule d’ADN
définir plasmide
petites molécules circulaires d’ADN qui se répliquent séparément.
à quoi servent les PCR
Recréer les conditions naturelles de réplication de l’ADN dans un tube.
dénaturation, hybridation et élongation;
quand on fait varier la température, l’ADN se comporte de façon différente.
Résumer les grandes étapes de PCR
- prélèvement d’un échantillon
- désactivation du virus
- extraction de l’ARN viral
- transcription inverse
- PCR en temps réel
- résultats
résumer les grandes étapes du clonage d’un gène à l’aide d’un plasmide
- Extraction et amplification de l’ADN
- L’ADN est coupé et recollé à l’aide d’enzymes in vitro
- Introduire le plasmide modifié dans une bactérie
- Utilisation directe ou transfert chez d’autres organismes
quelles sont les 2 catégories d’utilisation possible de gènes clonés?
- Fabriquer un grand nombre de copies d’un gène particulier par amplification
- Produire une protéine par l’expression de ce gène.
Décrire la technique de l’électrophorèse sur gel et son utilité
technique = laboratoire
utilité = pour séparer et visualiser différent fragments d’ADN
Les molécules plus courtes se déplacent plus rapidement que les plus longues; penser au serpent sur le sel…
décrire le dépistage d’ARNm par RT-PCR
technique =
1. La synthèse de l’ADNc est effectuée par la transcriptase inverse en présence des ARNm et des autres composants nécessaires.
2. Il y a amplification par PCR
3. L’électrophorèse sur gel révèle les produits d’ADN seulement dans les échantillons qui contiennent de l’ARNm transcrit du gène spécifique.
utilité = analyse de l’expression de gènes uniques.
décrire le clonage d’animaux complets ; végétaux et animaux
- on prend une cellule souche (somatique d’un donneur) et on prend un ovule d’une donneuse.
- on enlève le noyau des 2 cellules puis on met celui du donneur dans celui de l’ovule (qui n’a plus noyau).
- l’embryon reconstruit se développe pour 1 semaine environ.
- l’embryon est implanté dans la mère porteuse
- le clone nait avec le même ADN que celui du donnEUR.
décrire les preuves médico-légales et profils génétiques
L’analyse des marqueurs génétiques qui varient dans la population permet de déterminer l’ensemble des marqueurs génétiques propres à un individu, c’est-à-dire son profil génétique = méthode plus ancienne parce qu’elle demandait beaucoup d’échantillon frais ce qui peut être moins accessible.
STR = 13 locus qui comprennent des segments STR
En cas de meurtre, elle permet de comparer les petits échantillons de sang avec l’ADN du suspect et celui de la victime. Il s’agit d’une preuve médico-légale.
L’étape du PCR est alors très utile pour amplifier l’échantillon que nous avons.