Chap 1,2,3 Flashcards
Quelles sont les 6 différences entres procaryotes et eucaryotes ?
- membrane nucléaire
- mitochondrie
- chloroplaste
- Appareil de golgi
- noyau
- protéine histone
Quelles sont les 3 types détaillés de micro-organismes ?
1) acellulaire : virus,prions
2) unicellulaire : euraryote,procaryote
3) pluricellulaire : helminthe,
arachnides, parasites
Éléments obligatoires chez les procaryotes ?
- génome
- paroi
- cytoplasme
- membrane cytoplasmique
Éléments facultatifs des procaryotes ?
- plasmide
- pili
- organes locomoteurs
- capsule
- spores
Le cytoplasme chez les procaryotes ?
- vacuoles
- ribosomes
- granulation
- ADN double brins
- parfois plasmide
La paroi des procaryotes ?
-responsable de la forme de la bactérie
- compose de PDG : composé de polysaccaride+peptides
- sert à différencier gram+ et gram- car
Gram-: compose d une membrane externe qui enveloppe la fine couche de PDG
Gram+: compose d’une épaisse couche de PDG
Expliquez la coloration de gram ?
1) placer le frottis dans le CV
2) le CV coloré le cytoplasme en rose
3) traitement du frottis au lugol (effet de mordençage) qui va former un complexe avec le CV
4) traitement du frottis à l’acétone ou à l’éthanol ( méthode de différenciation )
5) coloration à la saphranine (pas obligatoire )
Étape 4 pour les gram+ : l’alcool ne parvient pas à traverser l’épaisse couche de PDG => alcoolo-resistante => mauve
Pour les gram-: l’alcool va dissoudre la membrane externe et traverser la fine couche de PDG et va dissoudre le complexe CV-lugol => non alcoolo résistante , coloration à la saphranine , rose
Gelose TS
Propriétés et composants : peptone=triptone, NaCl
Cibles : toutes les bactéries NE
Lectures et conclusions : aspect des colonies
Gelose sabouraud
- gelose sélective ( inhibe la croissance de certaines bactéries en favorisant celles d autres bactéries )
Propriétés et composants : gelose nutritive , forte concentration en glucose ( sélectif ) , pH acide
Cibles : levures et champignons
Lectures et conclusions :
si poussent : suspicion de champignon ou bactérie acidophile
Si ne poussent pas : présence de bactéries
Gelose Columbia au sang cru
-gelose différentielle ( permet l identification de la bactérie )
Propriétés et composants : gelose nutritive , sang cru , hemolyse et la lyse des globules
Cibles : coque Gram+
Lectures et conclusions : identification de là bactérie suivant le type d’hemolyse
Alpha : fausse hémolyse , pigmentation de l hémoglobine, couleur verdâtre autour de la colonie
Gamma: pas d’hemolyse
Bêta : vraie hémolyse , les bactéries digèrent l’hemolyse , zone translucide autour de la colonie
Remarque : si on veut sélectionner les Coques gram + et inhiber les bacillus gram - => ajout d’acide nolidixique
Gelose mannitol sel (MS)
-sélective et différentielle
Propriétés et composants : mannitol rouge ou phénol (différentielle ) forte concentration en NaCl (7,5g/L) (sélectif )
Cibles : staphylococcus
Lectures et conclusions :
⚠️(Couleur gelose )
Si poussent : rouge => mannitol -
Jaune => mannitol + , staphylococcus pathogène
Si ne poussent pas : bactéries ne supportent pas Nacl
Gelose EMB
- gelose sélective et différentielle
Propriétés et composants : eosine, bleu de methylene ( sélectif ) lactose ( différentielle )
Cibles : bactérie bacille gram- NE entérobactéries pseudomonas et plus particulièrement E.coli
Lectures et conclusions :
⚠️couleur des colonies
Ne poussent pas : gram + , gram - E
Si poussent :
Couleur clair : lactose -
Couleur sombre : lactose +
Si en plus reflet métallique : forte suspicion d’E.coli
Gelose Mac Conkey (MC)
-gelose sélective et différentielle
Propriétés et composants : sels biliaires , Crystal violet , NaCl ( sélectif ) ; lactose , rouge neutre (différentielle ) Cibles : bactéries bacilles , gram - , NE , entérobactérie , pseudomonas Lectures et conclusions ⚠️ couleur des colonies Si poussent : Rose vif : lactose + Blanc , jaune , orange : lactose - Si ne poussent pas : gram + , gram- NE
Gelose SS
-gelose différentielle et sélective
Propriétés et composants : sels biliaires , citrate Na, vert brillant (sélectif ) , lactose rouge neutre , soufre + fer ( étude de la production d’H2S) (différentielle ) Cibles : bacilles gram-, NE , entérobactérie , et plus particulièrement les enteropathogenes (shigella H2S- et salmonella h2s+ Lectures et conclusions : Si poussent : Rose : lactose + Orange , jaune , blanc : lactose - Si précipité : H2S+ Si pas de proximité : H2S-
Gelose hektoen
-gelose sélective et différentielle
Propriétés et composants : sels biliaires (sélectif ) , S et Fe (différentielle) lactose , salicine,saccharose (différentielle ) étude de l utilisation des sucres + production d’H2S
Cibles : bactérie bacille gram - entérobactérie , NE , plus particulièrement enteropathogene (shigella et salmonella)
Lectures et conclusions :
Si poussent : orange -saumon => glucides +..
Vert : glucides -.. => enteropathogene
Précipité : H2S+
Pas de précipité H2S-
La capsule
Présente chez certaines bactéries , elle entourent la où un ensemble de bactéries , role important dans le pouvoir pathogène est d’empêcher la phagocytose , est l’Ag K
Les cils et flagelles
Caractérisent les bactéries mobiles , est L’Ag H
Les pilis
Parfois présent sur les bactéries :
Pili I : responsable de l’adhésion des bactéries sur les eucaryotes
Pili F (sexuel) : responsable du phénomènes de conjugaison dans lequel une bactérie donneuse va donner une copie de son plasmide à une bactérie receveuse
Les spores
Sortent de mini bactéries dans là bactéries elles mêmes , n’inactivent sauf si conditions particulières , résistantes aux ATB , et aux conditions extrêmes
La fixation
La fixation est un procédé dans lequel on n’inactive les enzymes et conserve la structure de la bactérie la plus proche du vivant
- fixation physique : pour les bactéries, passage d un frottis bactérien séché sous la flamme , conserve la morphologie et les structures intracellulaire
- fixation chimique : pour les eucaryotes , conserve tout , toxique , plus long
A quoi sert la Coloration ziehl-nielsen
Coloration différentielle permettant d’identifier les mycoplasma, les spirochètes et les mycobacteries
Comment identifier la capsule
1) coloration à l’encre de Chine => Bon
2) l aspect des colonies => rapide mais pas fiable
3) recherche de l’AgK par anticorps marqué => fiable mais très coûteux
4) étude de la solubilité dans les sels biliaires => lent, pas spécifique , possibilité d’erreur
- mise en culture
- apparition d’un trouble
- ajout de sels biliaires
- disparition du trouble => présence de sels biliaires
identification Spores
1) la coloration => peu utilisée
2) visualisation au microscope => rapide et sûre
3) traitement à la chaleur => extrêmement sure mais très lente
- chauffer l’échantillon a 100 degré
- mort des cellules
- mise en culture
- apparition de nouvelles bactéries si présence de spores
Identification des Flagelles
1) coloration spécifique => sure mais toxique
2) visualisation au microscope => très difficile risque d erreur
3) recherche d’AgH par immunomarquage => très fiable mais très cher
4) examen a frais => pas cher , simple rapide mais pas très sure
5) la culture sur gelose semi -solide => sure mais lent
- piqure et dépôt de bactérie sur une gelose
- laisser une journée
- si dispersion dans la gelose => bactérie mobile
De quoi une bactérie a besoin ?
- eau
- oligo-élément (microg/L)
- Ions (g/L)
- soufre
- phosphore
- azote
- carbone
- oxygène
- hydrogène
Carbone
Co2 + minéraux => autotrophe
Carbone organique => hétérotrophe
Hydrogène
Hydrogène inorganique : litotrophe
Hydrogène organique :organotrophe
Photosynthèse
Oui : photographe
Non : chimiotrophe
2 milieux de cultures possibles
Liquide : bactéries prolifèrent et se dispersent => observent un troubles
Solide : dénombrer les colonies et identifier leur morphologie
Les 4 phases de développement de la bactérie
1) phase de latence : elles s’habituent à leur nouveau milieux
2) phase de croissance : elles se multiplient par fission binaire pour atteindre une concentration de 10^8,10^9/ML
3) phase stationnaire : milieux dégradé , trop de déchets , plus suffisamment de nourritures pour la croissance
4) phase de décroissance : milieux degrade , mort des bactéries
3 façons de faire un milieu de culture sans O2
1) on recouvre le milieu d’huile de paraffine
2) utiliser un gaz
3) ensemencer en profondeur
