Ch 12: La transcription et la modification de l'ARN Flashcards
Introduction
- Au niveau moléculaire, un gène est un segment d’ADN utilise pour faire un produit fonctionnel.
- Soit un ARN ou un polypéptide
- Transcription est la première étape dans l’expression génique
- Transcription en génétique réfère à faire une copie de l’ADN sous forme de séquence d’ARN
Expression génique
- Les gènes structuraux codent pour les séquences d’AA ou polypeptides
- Transcription d’un gène structural produit un ARNm (messager)
- La séquence des nucléotides de l’ARNm détermine la séquence d’AA d’un polypeptide durant la traduction
- La synthèse d’une protéine détermine les traits d’un organisme
Ceci porte le nom de dogme central
Figure 12.1
Survol de la transcription
- Les séquences de bases de l’ADN définissent le début et la fin du gène et régulent le niveau de synthèse de l’ARN.
- Les protéines doivent reconnaitre et se fixer sur l’ADN pour que la transcription ait lieu.
- L’expression de gène est un processus utilisé pour produire une protéine fonctionnelle qui à son tours déterminera un trait avec le concours des facteurs environnementaux
- Les facteurs de transcriptions (prots) peuvent se lier directement au promoteur et faciliter la transcription
- D’autres recconnaissent les séquences de régulations ou éléments de régulations (petite séquence d’ADN impliquée dans la régulation de la transcription)
- Les facteurs de transcriptions se lient à ces séquences et augmentent ou diminuent le taux de transcription
Les différents types de séquences de bases - ADN
ADN
- Promoteur: lieu lié par ARN polymérase, signaux où commence la transcription
- Terminateur: là où arrête la transcription
- Séquences régulatrices: lieux liés par des prots régulatrices. Rôle dans l’expression des gènes. Peuvent être trouvées dans une variété d’endroits chez les euc
- normalement on peut les trouvés partout (loin ou proche du promoteur)
Les différents types de séquences de bases - ARNm
ARNm
-Ribosomal binding site (RBS): site de liaison du ribosome. La traduction commence près de ce site. Le ribosome survol ensuite l’ARNm pour le codon de début
-Les RBS s’apellent la séquence Shine Dalgarno
- Codon d’initiation (start codon): codon pour le premier aa dans la prot, formylméthionine (bact) ou méthionine (euc)
- Codons: un code à base de 3 nucléotides chez lARNm qui indique quel aa devrsit être dans la prot. La séquence de codons dans l’ARNm dicte la séquencce des aa dans le polypep
- L’ARNm bact peut être polycistronique (code pour plusieurs prots)
fig 12.2
Les étapes de la transcription
- Trois étapes
- Initiation
- Elongation
- Terminaison
-Ces étapes impliquent des interactions protéines-ADN
-Protéines comme l’ARN polymérase qui interagit avec les séquences d’ADN
fig 12.3
Quest ce qui induit le début de la transcription?
La première étape est une étape de reconnaisance: le promoteur est reconnu par plusieurs facteurs de transcription
Transcription - initiation
1 )Promoteur = site reconnu par les facteurs de transcription (FT)
2) FT aident ARN poly à se lier au promoteur et former le complexe fermée
3) ADN est dénaturé pour former le complexe ouvert
v
Transcription- Élongation
Le complexe ouvert se déplace le long de l’ADN et la polymérase fait la synthèse de l’ARN
Transcription - terminaison
Un signal fait que la polymérase s’enlève de l’ADN et l’hybride ARN-ADN se défait
Les transcrits d’ARN ont différentes fonctions
- Gènes structuraux
- Transcrits en ARNm
- Codent pour des polypep
- 90% des gènes
-Gènes non-structuraux
-Non traduits
-Ex: font partie des ribosomes, splicéosomes et télomérases
fig 12.4
Promoteurs
- Promoteurs: sont des séquences d’ADN qui favorisent l’expression des gènes.
- Plus précisément ils dirigent la location exacte pour l’inititation de la transcription
- Promoteurs sont typiquement localisés en avant du site du début de la transcription
- Les bases des promotuers sont numérotées en relation avec le site du début de la transcription (convention)
- Directement en avant ou en avant mais un peu plus loin
- Le promoteur peut contenir plusieurs douzaines de nucléotides mais de courtes séquences sont particulièrement critiques pour la reconnaisance du promoteur
- En comparant la séquence des bases d’ADN de plusieurs promoteurs, le chercheurs ont appris que certaines séquences sont plus importants et nécessaire pour la fonctionnalité du promoteur
-Dans plusieurs promoteurs d’E. coli et espèces similaires , 2 séquences semblent importants et localisées aux sites -35 et -10
fig 12.5
Séquences des promoteurs
- Les séquences d’ADN trouvées dans les promoteurs ou les éléments de régulation varient selonn les espèces
- Les bases les plus communes dans un type spécfique sont appelés ‘séquences consensus’
- La fig 12.5 illustre les séquences trouvées dans difs promoteurs d’E.coli
- La séquence consensus observée en bas de l’image est efficacement reconnue par les prots qui initient la transcription
- Pour plusieurs gènes de bact, il existe une bonne corrélation entre le taux de transcription et le degré de compatibilité (agreement) avec les séquences consensus des régions -35 et -10
Transcription bactérienneInitiation – La polymérase
- ARN polymérase
- Enzyme qui catalyse la synthèse de l’ARN
- Lecture d’ADN de 3’ à 5’
- Élongation de l’ARN de 5’ à 3’
- E. coli, l’holoenzyme est composé de:
- Cœur
- 5 sous-unités
- a2bb’
- Facteur Sigma
- 1 sous-unité = s
Transcription bactérienne Initiation- la polymérase suite
- Les 2 sous-u alpha jouent un rôle important dans l’assemblage de l’holoenz et le processus de liaison à l’ADN
- Béta et béta’ sont importantes dans la liaison à l’ADN et font la synt catalytique de l’ARN
- ω est imp pour le bon assemblage du cœur de l’enz
- Le premier rôle de sigma est de reconnaître le promoteur
- La holoenz est nécessaire pour initier la transcription
- Les prots qui influencent la fonction de l’ARN polymérase sont un type de transcription facteur
Transcription bactérienne-Initiation la liaison du facteur sigma
-L’holoenzyme ARN polymérase, lie l’ADN et le parcours en recherche du promoteur
- Une fois trouvé, Sigma (facteur de spécificité) reconnait les régions -35 et -10
- Requiert interaction entre un motif de l’hélice-tour-hélice et l’ADN
-Ceci forme un complexe fermé = Liaison de la polymérase au promoteur d’ADN
fig 12.6
Transcription bactérienne-Initiation suite
- Formation du complexe ouvert = ADN lié par polymérase et les liaisons H de l’ADN (boîte -10) sont interrompues pour ouvrir les brins.
- Synt d’un court brin d’ARN à l’intérieur du complexe ouvert
- Synt d’ARN plus longue et stabilisation du complexe ADN-ARN
- Libération du facteur sigma dégagement de la polymérase du promoteur, ceci marque la fin de l’initiation
- Déplacement du cœur de l’enz le long de l’ADN pour la synt du brin d’ARN: c’est l’élongation
Transcription bactérienne-Élongation
- Déplacement de la bulle de transcription et synthèse du transcrit d’ARN de 5’ à 3’
- Bulle de transcription = 17pb de long
- Derrière la bulle l’ADN reforme l’hélice double
- 43 nucléotides par seconde
- Les bases de thymine sont remplacées par l’Uracile
- Le brin d’ADN utilisé comme matrice pour la synt d’ARN est appelé matrice ou brin antisens
-Le brin opposé de l’ADN s’appelle le brin codant, il a le même séquence de bases que le transcrit d’ARN sauf que j’aurais uracil au lieu de thymine
fig 12.7/8